Ael亚型引起血型鉴定困难1例

正确地鉴定血型是临床输血的关键[l]。在临床上由于遗传因素引起血型变异,进而导致血型鉴定错误时有发生。本文报道因遗传因素引起血型为Ael亚型导致血型鉴定困难1例。

临床资料

胡某,女,28岁。怀孕9个月,几天前在外院作产前体检时,因血型鉴定困难遂到本院做血型鉴定。血型鉴定时正反定型不符,正定为“0”,反定为“A”型。血型血清学检查

1 试剂与方法:抗一A、抗J标准血清(上海血液生物医药有限责任公司,批号20120505);抗一A1、抗一H血清(上海血液生物医药有限责任公司),均在有效期内;人源抗-A、抗-B血清(上海血液生物医药有限责任公司,批号20120303);A、B、O标准红细胞为本实验室自配,分别来自3个献血者;3组A型标准血清和1组O型标准血清为本实验室自配,分别来自4个献血者;ABo、RhD血型鉴定的血型卡(DlagnostkGofols,s。A);抗体筛选与配血的IgG+C3d凝胶卡(Dagnost忆GⅡfo1s,s.A,批号12061.01);血型仪器(DlagnosttGhfoh,S。A);凝胶卡专用离心机、孵箱(DIag—nost记Grifols,s。A);水浴箱(上海一恒科学仪器有限公司),血型正反定型、吸收放散试验及唾液中和试验参照文献。

2 血型正反定型:首先用血型卡鉴定孕妇血型,结果见表1。接着进行试管法血型鉴定,正定型:经生理盐水洗涤3次的5%的孕妇红细胞分别与抗一A,抗B,抗-A、B血清反应,3组A型标准血清在4C,室温,37C条件下反应均不凝集;反定型:在4C,室温,37C条件下孕妇血清与B型红细胞均凝集,与A、O型红细胞均不凝集,提示孕妇血清中均含有抗B,

3 吸收放散试验:取新鲜O型压积红细胞和孕妇压积红细胞各1ml经3次洗涤后,分别加等量人源抗-A血清混匀,置于4C环境中吸收1h,然后以最快速度洗涤6次后,将末次洗液用含IgG的凝胶卡与标准A细胞和标准0细胞反应,结果为阴性。再加等量常温的生理盐水混匀,放人56C热放散10min后离心取放散液。将放散液用含lgG的凝胶卡与标准A细胞和标准0细胞反应,结果与标准A细胞反应呈强阳性,与标准0细胞反应呈阴性反应。将孕妇吸收后的细胞用含IgG的凝胶卡作直接抗人球蛋白试验,结果为阴性。见表3。

4 唾液血型物质检测:实验操作参照文献Ezl,将孕妇唾液煮沸离心处理后,用抗血清稀释液分别与标准A、B细胞和标准0细胞反应,可以得出以下结论:孕妇唾液中无A、B血型物质,有H血型物质。

5 其他试验:孕妇标本的血清用凝胶卡检测不规则抗体为阴性,未查到不规则抗体。把孕妇标本的红细胞用凝胶卡与抗-A1与抗-H物质反应,结果与抗A1反应呈阴性,与抗-H物质反应呈强阳性。

讨论

血型是人体的一种遗传性状,由遗传基因决定,不会轻易改变E3]。本次实验结果表明,该孕妇血型符合Ael亚型的反应格局,可以判定为Ael亚型。用上述相同的血清学方法检查孕妇父亲的血型及唾液物质,得出的血型与孕妇血型一致,可以确定孕妇及其父亲ABo血型为Ael亚型,属遗传性。通常条件下,Ael细胞与抗-A和抗A,B不发生凝集,虽可以结合这些抗体,但结合盯抗体必须经吸收放散技术才能检出。Ael分泌型唾液中无A、B物质,仅有H物质。ABo等位基因位于染色体gq34·1~q扭.2的ABo座位上,全长19.5kb,由7个外显子组成1062bp编码区。第6号和第7号外显子约占编码区长度的77%,编码酶催化区。A和B基因的cDNA序列在核苷酸297、526、657、703、796、803和930位有7个碱基不同,其中4个造成氨基酸的替换,分别为Arg176Gly、Gly235ser、Leu266Met、Gly268AlaE4]。本次实验结果表明,经吸收放散试验、0型对照红细胞为阴性等血清学试验,证实该孕妇红细胞上存在A抗原;红细胞上的H物质也增强,其血型符合Ae1亚型的反应格局,可以判定为Ae1亚型。根据家系调查可判断其Ael亚型血型为遗传性。因此,在做ABO血型鉴定时,正反定型同样重要,应同时应用;若发现正反定型不符,除检测血清中不规则抗体外,还要进一步做吸收放散、唾液血型物质测定等实验。为确保输血治疗的安全、有效,临床血型鉴定一定要准确,以保证安全输血。该孕妇为AeI亚型,血清中含有抗J抗体,故与正常A型血配血不会凝集[5]。但还是建议输注与其Ael亚型相同的红细胞悬液,紧急情况下也可以输0型洗涤红细胞悬液、输AB型的血浆和血小板。在临床输血时,当弱亚型患者血液被错误分型为0型而输注0型血液时,预期应无严重后果;但是,若具有弱A抗原的患者血液被错误分型为0型而输注0型血液时,则能引起严重的输血反应E6]。因此,为保证临床输血安全,在ABO血型鉴定中应重视亚型的存在。当血型反应较弱或正反定型不符时,应考虑是否有亚型或抗体的存在,并结合病情以确定给患者输注全血、红细胞悬液,或洗涤红细胞等血液成分,当血型确定无误后,再进行交叉配血实验,以确保临床输血的安全、有效。

参考文献

1 林莉,刘永秀。血型抗原减弱引起血型鉴定困难1例分析[J]辽宁中医学院学报,辽宁:辽宁中医学院学报出版社,⒛06:83.

2 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程[J].南京:东南大学出版社,1991。

3 陈稚勇.人血的血型会变吗[J].中华血液学杂志,1986,7(6):377.

4 蔡晓红,金沙,刘曦,等.中国人群ABO亚型中一个新的Ax等位基因的鉴定EJ彐.临床血液学杂志,⒛09,22(6):310,

5 肖星甫.输血技术手册EM彐.成都:四川科技出版社,1992:160-164.6刘达庄,主编。免疫血液学[J].上海科学技术出版社,2002:40.44.194-196.219-220.222.

(收稿日期:⒛13-1⒉15)

(本文编辑:姚萍)