GPI锚定修饰的慢粒白血病bcr/abl和鼠IL12真核双表达质粒的构建及表
发表时间:2009-06-26 浏览次数:664次
陶崑,王东,曾建明,黄世峰
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知网,万方
目的: 构建由糖基化磷脂酰肌醇(GPI)锚定修饰的bcr/abl和鼠IL12(mIL12)真核双表达质粒,在COS7细胞中检测其基因和膜蛋白表达. 方法: 以含有慢粒白血病(b3a2型)migP210全长序列的质粒为模板,通过PCR扩增获得654 bp的bcr/abl融合基因片段,酶切后插入pBudCE4.1空载中,经鉴定获得重组质粒pBB. 同时,RTPCR扩增人外周血淋巴细胞CD24分子中的GPI锚定序列,酶切后克隆入pBB质粒中与bcr/abl基因片断羧基端相连,获得重组质粒pBBG并鉴定.