pEGFPBMI1真核表达载体的构建、鉴定及其表达
发表时间:2009-10-13 浏览次数:529次
基因转染
陈凤花,胡丽华
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知网,万方
本研究构建真核表达载体pEGFPBMI1并观察其在HeLa细胞中的表达。 将BMI1逆转录聚合酶链反应(RTPCR)产物克隆入pEGFPN1,经酶切、PCR鉴定及测序分析,构建pEGFPBMI1真核表达载体;采用脂质体转染法,将融合基因pEGFPBMI1转入HeLa细胞,用荧光显微镜和Western blot 检测其表达,SYBR Green I实时定量RTPCR方法检测转染前后HeLa细胞中P16INK4a mRNA的表达变化。