《消化病学》
PTEN表达载体的构建及转染食管鳞癌细胞系EC9706
发表时间：2010-07-16 浏览次数：379次
引 用：
关 键 词：
PTEN;食管鳞癌;mTOR;转染
作者：
侯桂琴，鲁照明
作者单位：
出版年份：
0
期刊页数：
收录者：
知网,万方
摘要：
目的 筛选稳定表达野生型PTEN基因的食管鳞癌细胞株EC9706。方法 提取胎盘总RNA，设计引物，PCR扩增人野生型PTEN基因，经测序鉴定后，连接于pcDNA3.1(+)真核表达载体，构建pcDNA3.1PTEN，用脂质体介导的方法将其转染EC9706。而后加抗生素G418筛选稳定表达株，用RTPCR方法检测稳定表达株PTEN基因的mRNA水平，通过绘制生长曲线观察细胞生长情况。结果 PCR产物的电泳结果显示，在1 500bp左右有一明显亮带，测序结果与GenBank上PTEN序列完全一致;稳定表
