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《骨外科学》

实时荧光定量聚合酶链反应筛选重组人骨形态发生蛋白-2诱导比格犬骨髓基质干细胞成骨分化差异表达的miRNAs

发表时间:2014-11-18  浏览次数:1335次

引 用:

胡稷杰,刘亚伟,何敏毅等.实时荧光定量聚合酶链反应筛选重组人骨形态发生蛋白-2诱导比格犬骨髓基质干细胞成骨分化差异表达的miRNAs[J].中华创伤骨科杂志,2

关 键 词:

骨髓 间充质干细胞 聚合酶链反应 骨形态发生蛋白类

作者:

胡稷杰 刘亚伟 何敏毅 金丹 赵辉 余斌

作者单位:

1. 南方医科大学南方医院创伤骨科, 广州,510515 2. 南方医科大学基础医学院 3. 南方医

出版年份:

2013

期刊页数:

256-260

收录者:

知网,万方

摘要:

目的 利用实时荧光定量聚合酶链反应(Q-PCR)方法筛选骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)诱导比格犬骨髓基质干细胞(BMSCs)成骨分化的miRNAs,探讨过表达miRNAs对成骨分化的影响.方法 选取4只比格犬分离BMSCs原代,取培养至第3代BMSCs分为2组:对照组(用基础培养基培养)和实验组(在基础培养基中加入rhBMP-2培养7d,诱导细胞成骨分化).采用碱性磷酸酶染色法验证细胞成骨分化情况,采用Q-PCR法筛选成骨分化细胞与对照组细胞差异表达的miRNAs;随机选择其中一种低表达miRNA(miR-125b),采用Lipofectamine2000进行转染,其中实验组1转染miR-125bmimics以过表达miR-125b,其阴性对照实验组2转染mimics-NC,验证过表达miR-125b 7 d后对rhBMP-2诱导的比格犬BMSCs成骨分化的影响.

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