人KiSS1和p27Kip1基因在骨肉瘤MG63细胞株中的共表达
发表时间:2010-10-29 浏览次数:330次
骨肉瘤 重组 遗传 克隆 分子 基因 肿瘤抑制 细胞周期蛋白质类 肿瘤细胞 培养的
白国昌, 林建华
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知网,万方
目的 克隆肿瘤转移抑制基因KiSS1和细胞周期依赖性激酶抑制剂基因p27Kip1的表达序列,应用内部核糖体插入位点(IRES) 序列构建共表达载体pIRESKiSS1p27Kip1,测序鉴定,并获得稳定表达目的蛋白的细胞株。 方法 利用RTPCR从人正常胎盘组织中获得KiSS1和p27Kip1基因开放阅读框的cDNA序列,将两目的基因的cDNA序列重组至pIRES载体,构建共表达载体pIRESKiSS1p27Kip1,应用脂质体转染骨肉瘤MG63细胞,并通过RTPCR和Western