rAAV1-EGFP和rAAV2-EGFP转染犬骨髓间充质干细胞的比较
发表时间:2010-08-30 浏览次数:394次
骨髓间充质干细胞; 腺相关病毒; 增强绿色荧光蛋白; 组织工程; 犬
刘斌,蔡道章
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知网,万方
研究不同血清型腺相关病毒(rAAV)载体介导的增强绿色荧光蛋白基因(EGFP)对体外培养犬骨髓间充质干细胞(MSC)的转染效率及其毒性作用。【方法】 应用密度梯度离心法及贴壁筛选法分离培养犬MSC,倒置显微镜及Giemsa染色观察细胞形态,透射电镜观察其超微结构,流式细胞仪鉴定其表面标记物。取第3代MSC,以MOI为104 ~ 105 v.g./cell 的rAAV1-EGFP 和rAAV2-EGFP进行转染,3、7、21 d后荧光显微镜观察检测转染效率;MTT法检测rAAV1-EGFP 和rAAV2-E