食管癌细胞中fascin基因启动子区的克隆与初步鉴定
发表时间:2009-06-27 浏览次数:680次
杨章民,郭张燕,许丽艳
0
知网,万方
目的:对食管癌细胞中fascin基因启动子区进行克隆鉴定. 方法:应用PCR技术从食管癌细胞系EC109中扩增出fascin基因5′侧翼区5段不同长度的片段,并将其克隆至萤火虫荧光素酶报告基因表达载体pGL3Basic(pGLB)中, 然后将这些质粒与对照质粒pGLB、内参照质粒pRLTK共转染EC109细胞,48 h后用双荧光素酶检测系统分析这些重组子报告基因转染细胞的相对荧光强度,并结合生物信息学分析,以判断fascin基因启动子区所在位置. 结果:用DNA重组技术成功构建了5个系列缺失重组荧光素