定向基因传递载体pET15bZVP1的构建
发表时间:2010-05-24 浏览次数:384次
基因治疗;定向基因传递;JC病毒
折潇,屈秋民,翟海燕
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知网,万方
目的 在JCV VP1氨基末端插入SPA的IgG结合区(Z区),构建原核表达质粒pET15bZVP1。方法 PCR扩增JCV基因组VP1和SPA基因的Z片段;重组PCR连接Z片段和VP1;BamHⅠ和NcoⅠ双酶切将ZVP1片段插入原核表达质粒pET15b。结果 经PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳纯化,分别得到VP1和Z片段;再用重组PCR将Z片段和VP1连接成ZVP1重组基因;双酶切将ZVP1插入pET15b的BamHⅠ和NcoⅠ两个酶切位点之间,并经酶切鉴定和DNA测序证实。Western blo