Sema3AFc真核表达载体构建及诱导少突胶质细胞祖细胞迁移作用观察
发表时间:2010-04-16 浏览次数:439次
Sema3A Fc融合蛋白 真核表达 细胞迁移
陈焕然,黄其林,杨辉,马玉新
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知网,万方
目的 构建真核表达载体pIGSema3AFc,并观察Sema3AFc融合蛋白对少突胶质细胞祖细胞(OPCs)迁移的作用。方法 运用DNA重组技术自原核表达载体上将鸡来源的Sema3A基因克隆到真核表达载体pIGIgG1Fc上,并用双酶切、测序法进行鉴定。采用脂质体法转染非洲绿猴肾细胞株(COS7)细胞进行融合蛋白表达,培养3天后提取上清液,经蛋白A亲和纯化,Western blotting 进行鉴定。利用插入式细胞迁移小室(millicellPCF)细胞迁移仓观察其对OPCs细胞迁移的诱导作用。结