pSNAV2CTGF重组质粒构建及其在人胚肾293细胞中的表达
发表时间:2010-06-01 浏览次数:470次
结缔组织生长因子 腺相关病毒 质粒 基因转染 椎间盘
魏见伟
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知网,万方
目的 构建含人结缔组织生长因子(CTGF)的腺相关病毒(AAV)表达载体,并观察其在人胚肾293(HEK293)细胞中的表达。方法 以含有人CTGF基因序列的质粒pCMVSPORT6为模板,应用PCR克隆出CTGF基因,采用分子克隆的方法把CTGF克隆到AAV表达载体pSNAV2.0上构建重组质粒pSNAV2CTGF。把重组质粒转染HEK293细胞,用免疫荧光法对重组质粒目的蛋白的表达进行研究,MTT法检测细胞培养上清液中CTGF蛋白的生物学活性。结果 成功构建完全正确的CTGF基因序列的AAV表达载