整合素αvβ3小干扰RNA载体构建及其对人视网膜血管内皮细胞的干扰效应检测
发表时间:2010-07-27 浏览次数:540次
RNA干扰;人视网膜血管内皮细胞;整合素αvβ3;转染
杨成明 张兰华
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知网,万方
目的 设计和构建整合素αvβ3(integrin αvβ3)特异性的小干扰RNA表达载体,并初步验证其对靶基因的抑制作用。方法 设计靶点特异性的寡核苷酸,连接到经BamH I-Hind Ⅲ酶切线性化的pGCsilencer2.0-U6质粒上,转染重组质粒到人视网膜血管内皮细胞,通过免疫印迹 (Western印迹) 及逆转录(RT-PCR)实验检测靶基因的抑制情况。结果 成功构建pGCU6-ITGαv和pGCU6-ITGβ3 siRNAs重组质粒,转染人视网膜血管内皮细胞,Western印迹,RT-PCR