HIV1型病毒蛋白R基因表达载体的构建及其在前列腺癌细胞系PC3中的表达
发表时间:2010-08-17 浏览次数:298次
重组腺病毒; HIV1型病毒蛋白R; PC3细胞
樊卫飞1, 王子盾
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知网,万方
目的: 利用AdEasy腺病毒载体系统构建含HIV1 病毒蛋白R(viral protein R,Vpr)基因的重组腺病毒,使之有效感染靶细胞前列腺癌细胞系PC3,并在其中表达Vpr。方法: 自表达载体pCIneoVpr中扩增出Vpr基因,插入到pAdTrackCMV中构建成腺病毒穿梭质粒pAdTrackVpr,经限制性内切酶Pme Ⅰ酶切线性化后,利用磷酸钙介导法将其与腺病毒骨架质粒pAdEasy共同转化到BJ5183大肠埃希菌。挑选同源重组质粒,经Pac Ⅰ酶切后回收大片段,并将其转染包装