KiSS 1基因重组真核质粒的构建、鉴定及其表达
发表时间:2009-11-18 浏览次数:466次
肿瘤抑制蛋白类,遗传载体,转染,肝肿瘤,肿瘤侵润,真核细胞核,质粒
徐玫芳,臧盛兵,黄爱民,刘景丰,高凌云,高美钦
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知网,万方
构建KiSS1基因重组真核质粒,将其导入人高转移肝癌MHCC97H细胞中,获得瞬时表达的细胞株,为进一步研究KiSS1基因对人肝癌细胞侵袭转移的影响奠定基础。 方法 Trizol试剂法提取新鲜胎盘组织总RNA,经RTPCR扩增目的片段,PCR产物及真核表达载体分别双酶切后进行连接,并转化入大肠杆菌Ecoli.Dh5α扩增以获得重组载体,采用脂质体介导转染技术将高纯度的KiSS1质粒转染到人高转移肝癌细胞株中,用RTPCR和Western blot技术加以鉴定。