肾癌G250抗原基因在sp2/0细胞中的表达及其意义
发表时间:2009-06-24 浏览次数:637次
张亚东, 吴荣佩, 刘 雷, 李乐军, 曹开源, 李晓飞
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知网,万方
【目的】 将G250抗原cDNA片段转染入sp2/0细胞中并获得稳定表达,为G250基因疫苗研究提供实验工具。【方法】 用脂质体转染法将鉴定好的重组质粒转染入sp2/0细胞中,经G418筛选得到稳定表达,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) 、间接免疫荧光、Western blot检测G250基因在sp2/0细胞中的表达。【结果】 转染2周后,筛选出阳性sp2/0细胞克隆,通过RT-PCR证实有G250mRNA转录,间接免疫荧光可以见到阳性细胞,Western blot证实有G250抗原表达。【结论】