牙龈卟啉菌蛋白酶rgpAcd基因表达载体的构建
发表时间:2010-06-18 浏览次数:704次
牙龈卟啉菌;蛋白酶;表达载体
许静,李昂
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知网,万方
目的 构建牙龈卟啉菌蛋白酶rgpA催化结构域(rgpAcd)基因的表达载体。方法 利用PCR技术和基因重组技术,克隆牙龈卟啉菌蛋白酶rgpAcd, 插入中介载体pMD18T中并测序鉴定。将目的基因片断插入原核表达载体pET15b,构建表达质粒pET15b/rgpAcd,通过限制性酶切鉴定。结果 PCR产物电泳结果显示,在大约1.5kb处有一特异的条带,与预期的大小一致,核酸序列测定与分析的结果表明,克隆的1476bp基因序列与GenBank数据库中的序列呈现100%同源性,未发生任何突变;构建的表达质粒经