《妇产科学》
GM-CSF基因修饰的卵巢癌细胞NuTu-19/GM-CSF的构建
发表时间：2010-06-10 浏览次数：393次
引 用：
关 键 词：
NuTu-19细胞 粒细胞单核细胞集落刺激因子 卵巢肿瘤 免疫治疗
作者：
李奇灵，王英
作者单位：
出版年份：
0
期刊页数：
收录者：
知网,万方
摘要：
目的 构建能分泌表达粒细胞-单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)的卵巢癌细胞NuTu-19/GM-CSF。方法 将T-h GM-CSF重组质粒转化入感受态大肠杆菌中,筛选出耐药性单克隆菌落送测序。利用PCR技术扩增出GM-CSF目的基因片段，将PCR产物连入pGEM-T easy载体，转化入大肠杆菌中扩增，用SDS碱裂解法提取Teasy-GM-CSF重组质粒，用限制性内切酶酶切Teasy-GM-CSF重组载体，连入经相同酶酶切的pLXSN反转录病毒载体中。用磷酸钙沉淀法转染PA317包装细胞系进行病毒包装
