均相时间分辨荧光(HTRF)法测定重组单抗含量
发表时间:2014-08-12 浏览次数:755次
邓春平,秦玉敏,邓巧春,等.均相时间分辨荧光(HTRF)法测定重组单抗含量[J].中国生物工程杂志,2013,33(12):64-68.
均相时间分辨荧光 荧光共振能量转移 单克隆抗体
邓春平 秦玉敏 邓巧春 王博 彭育才
珠海市丽珠单抗生物技术有限公司 珠海519020
2013
64-68.
知网,万方
建立了一种HTRF检测方法,可以快速、简便、稳定地测定重组单克隆抗体的含量.将检测试剂、标准品及待测样品加入96孔板,孵育后即可在酶标仪上读取荧光信号值,用软件对信号值进行四参数曲线拟合,绘制标准曲线,根据标准品四参数方程计算待测样品中抗体的含量;同时对方法进行了验证.结果表明:该方法专属性强,抗体含量测定范围为25~1000 ng/ml,线性相关系数在0.99以上,回收率范围为92.8% ~ 103.6%,平均为98.9%;该法精密度较好,精密度的变异系数范围为0.2% ~11.6%,平均为4.3%.适用于生物制药工艺开发过程中细胞培养上清、纯化产物及制剂中抗体含量的测定