脑胶质瘤IDH2基因突变HRM检测方法的初步建立
发表时间:2014-08-12 浏览次数:686次
王银辉,张海燕,杨传红,等.脑胶质瘤IDH2基因突变HRM检测方法的初步建立[J].中国生物工程杂志,2013,33(12):57-63.
IDH2突变 胶质瘤检测 高分辨率熔解曲线分析
王银辉[1] 张海燕[1] 杨传红[1] 张伟[2] 赖晃文[1] 陈晓东[2] 王捷[2]
广州军区广州总医院医学实验科 广州510010 广州军区广州总医院病理科 广州510010
2013
57-63.
知网,万方
异柠檬酸脱氢酶2(IDH2)基因突变常常发生于WHOⅡ-Ⅲ级的星形细胞瘤,少突胶质细胞瘤,和大部分继发性胶质母细胞瘤中.在临床上,IDH2突变已经显示对胶质瘤患者有诊断和预后意义.拟通过提取胶质瘤石蜡包埋组织DNA,优化PCR反应条件,初步建立IDH2基因突变高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)检测方法.并与直接测序法对比,观察反应体系的检测灵敏度和稳定性.响应面分析结果证明20μl HRM反应体系中,引物浓度0.6μmol/L,模板量45ng,Mg2+浓度2.75mmol/L,退火温度52.5℃为最佳.HRM检测IDH2基因突变的结果和直接测序法一致,但灵敏度更高.表明所建立HRM方法简单,特异性强,准确可靠,可为IDH2突变检测的临床应用提供借鉴和依据.