《其他》
5型和35型腺病毒纤毛蛋白的原核表达及活性验证
发表时间：2014-08-12 浏览次数：707次
引 用：
张文峰,张琼宇,薄华本,等.5型和35型腺病毒纤毛蛋白的原核表达及活性验证[J].中国生物工程杂志,2013,33(12):15-20.
关 键 词：
嵌合腺病毒载体 腺病毒纤毛蛋白 原核表达
作者：
张文峰[1] 张琼宇[2] 薄华本[1] 邵红伟[1] 李晓程[1] 王腾[1] 黄树林[1]
作者单位：
广东药学院生命科学与生物制药学院;广东省生物技术候选药物研究重点实验室 广州510006 永
出版年份：
2013
期刊页数：
15-20.
收录者：
知网,万方
摘要：
目的:原核表达5型腺病毒纤毛蛋白(Ad5 fiber)和35型腺病毒纤毛蛋白(Ad35 fiber),并对蛋白活性进行初步分析.方法:将重组质粒pET28a-Ad5 fiber和pET28a-Ad35 fiber转化入E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达后,经Ni-NTA凝胶珠亲和纯化,用SDS-PAGE鉴定纯化蛋白,并用蛋白竞争性实验验证纯化蛋白的活性.结果:转化溶原菌后能够表达目的蛋白,Ad35 fiber蛋白对Ad5(5型腺病毒)感染无影响,只能阻断Ad5 F35(5型腺病毒纤毛被替换为35型腺病毒纤毛的嵌合腺病毒)对细胞的感染;Ad5 fiber蛋白对嵌合腺病毒Ad5 F35感染无影响,只能抑制Ad5对细胞的感染.结论:成功表达具有生物活性的5型和35型腺病毒纤毛蛋白,为进一步研究嵌合腺病毒Ad5F35感染细胞的机制奠定基础.
