建立基于超薄切片的高分辨成像技术解析组织的精细空间结构
发表时间:2014-06-23 浏览次数:1826次
吕春梅,孟军,李晓林等.建立基于超薄切片的高分辨成像技术解析组织的精细空间结构[J].上海交通大学学报(医学版)2013, 33(1).121-126
超薄切片 组织 高分辨 显微镜 抗体标记
吕春梅[1],孟军[1],李晓林[1],李小卫[1],郭妍[2]
上海交通大学系统生物医学研究院系统生物医学教育部重点实验室,上海200240;上海交通大学肿瘤研究所
2013
121-126
知网,万方
目的 建立基于超薄切片方法的高分辨三维成像技术,提高Z轴分辨率,并用于组织的精细结构研究.方法 组织样品用LRWhite树脂渗透聚合后,用钻石刀将组织切片切成50~1 000 nm的连续半薄或超薄切片,具体切片的厚度即Z轴的分辨率.切片经甲基蓝-洋红染色或多重抗体标记后,利用全自动显微镜对连续切片进行成像,通过二维拼接和三维重构获得组织高分辨的三维空间信息.结果 对人正常结肠组织和小鼠肝脏进行高分辨成像分析,获得比传统显微镜更高的分辨效果和更丰富的结构细节.结合多重抗体染色方法,对小鼠脑组织微管蛋白的分布进行了高分辨三维成像.结论 所建立的高分辨三维成像技术适用于各种组织的空间精细结构研究,超薄切片方法同时为超高分辨显微成像提供Z轴的解决方案.