《药理学》
乙型肝炎病毒逆转录酶区PCR产物测序方法的建立及应用
发表时间：2014-06-04 浏览次数：1265次
引 用：
陆仁飞1,吴月平1,张宏萍2等乙型肝炎病毒逆转录酶区PCR产物测序方法的建立及应用[J].国际检验医药,2014,4(35):1032-1033
关 键 词：
乙型肝炎病毒；逆转录酶区；PCR产物测序
作者：
陆仁飞1,吴月平1,张宏萍2等
作者单位：
1.南通市第三人民医院，江苏南通226001;2.南通市疾病预防控制中心，江苏南通226007
出版年份：
2014
期刊页数：
1032-1033
收录者：
知网,万方
摘要：
目的建立乙型肝炎病毒（HBV）逆转录酶区PCR产物测序方法，检测HBV耐药突变位点及基因型。方法采用了巢式PCR方法，分别在HBV基因组逆转录（RT）区头尾设计内外两对引物，扩增全长RT区1223bp序列。并用该方法对已经完成测序的HBVB、C基因型，拉米夫定耐药株，恩替卡韦耐药株全长重组质粒扩增RT区来验证方法的保真度；用该方法从病毒载量1×103~1×108copys/mLHBV血清中扩增RT区来验证方法的灵敏度；通过对4例临床标本的检测来验证方法的实用性。结果建立了乙型肝炎病毒逆转录酶区PCR产物测序方法；以已经完成测序的HBVB、C基因型，拉米夫定耐药株，恩替卡韦耐药株全长重组质粒为模板扩增RT区序列，测序结果与已知序列确证无误，有很好保真度；能从病毒载量1×103~1×108copys/mLHBV血清中扩增到目标序列，有很好的灵敏度；能从临床患者血清中扩增HBVRT区并测序，序列分析后能为临床提供HBV核苷（酸）类似物耐药位点突变及HBV基因型信息。结论建立了一种具有很好保真度、灵敏度以及实用性的HBV逆转录酶区PCR产物测序方法。
