硫化氢对再生肝细胞中细胞周期蛋白D1和p21Cip/WAK-1的影响
发表时间:2014-08-19 浏览次数:1258次
王新国,韩淼,丁虹等.硫化氢对再生肝细胞中细胞周期蛋白D1和p21Cip/WAK-1的影响[J].国际流行病学传染病学杂志,2013,40(4):244-246
硫化氢 知识脉络 肝细胞 知识脉络 p21Cip/WAK-1 知识脉络 Cyclin D1 知识脉络 再生 知识脉络
王新国[1] 韩淼[1] 丁虹[2] 黄利华[2] 刘寿荣[1]
浙江中医药大学附属杭州西溪医院肝病科,杭州,310023 214005,江苏省无锡市 第五人
2013
244-246
知网,万方
目的 观察肝细胞增殖时硫化氢对细胞周期蛋白D1 (Cyclin D1)和p21Cip/WAK-1的影响.方法 肝穿刺获取慢性乙型肝炎患者肝组织,并分离培养肝细胞.所获肝细胞分为4组,前3组分别给予促肝细胞生长素(HGF组),炔丙基甘氨酸(PPG)和HGF(PPG+ HGF组),硫氢化钠(NaHS)+ HGF(NaHS+ HGF组),剩余1组作为空白对照组.肝细胞培养24h后行台盼兰拒染实验及MTT比色法测定细胞增殖,利用去蛋白法检测细胞上清液中的硫化氢,免疫印迹(western)检查细胞内p21Cip/WAK-1和Cyclin D1变化情况. 细胞洗涤后,提取各组细胞DNA,判定硫化氢对DNA的影响.结果 培养后肝细胞的活性均超过90%.MTT比色法测定结果显示:与对照组比较,HGF组肝细胞增殖明显增强(0.713±0.207:0.411±0.113),且差异有统计学意义(t=6.943,P<0.01);与HGF组相比,PPG+ HGF组细胞增殖明显增强(0.965±0.329:0.713±0.207),差异有统计学意义(t=4.017,P<0.05),NaHS+ HGF组细胞增殖明显减弱(0.513±0.156:0.713±0.207),差异有统计学意义(t=5.328,P<0.05).Western实验结果显示,PPG+ HGF组p21Cip/WAK-1表达增加而Cyclin D1表达降低,NaHS+ HGF组两者表达量呈相反趋势.HGF组和PPG+ HGF组DNA复制明显增加,而NaHS+ HGF组DNA无明显复制.结论 硫化氢可能通过抑制细胞Cyclin D1和增加p21Cip/WAK-1表达抑制肝细胞增殖.