人促甲状腺素受体膜外区基因克隆及真核表达
发表时间:2010-05-24 浏览次数:449次
自身免疫性甲状腺疾病;人促甲状腺素受体;基因重组;真核表达
李雪萍 施秉银
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知网,万方
目的 克隆人促甲状腺激素受体胞外段基因,构建重组真核表达质粒,获得具有免疫学活性的纯化重组蛋白。方法 应用RTPCR技术从人甲状腺组织得到TSHR膜外区cDNA,插入真核表达载体pcDNA3.1(+),转染CHO细胞,RTPCR鉴定基因转录,用免疫细胞化学染色法和Western Blot鉴定表达蛋白。结果 经测序证实筛选得到的重组体中存在序列正确的TSHR膜外区基因,表达蛋白具有免疫活性。结论 成功克隆了人促甲状腺素受体膜外区基因和构建了真核表达载体,并将其在真核细胞中成功表达。