大肠癌转移淋巴结构建人源性抗大肠癌噬菌体Fab抗体库
发表时间:2010-04-29 浏览次数:519次
大肠癌;噬菌体;抗体
刘锐 孙立娟 何成彦 周劲松
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知网,万方
目的 构建人源性抗大肠癌噬菌体Fab抗体库。方法 术中剥取老年大肠癌患者系膜内转移淋巴结,提取细胞总RNA,逆转录合成cDNA,进行PCR,克隆于pComb3 载体,再经电转化大肠杆菌XLIBlue菌株,形成噬菌体抗体库,最后通过免疫印记法鉴定初级抗体库中噬菌体上有Fab段的表达。结果 从系膜内转移淋巴结中扩增出650 bp重链Fd和轻链基因产物,轻链基因产物插入测得转化菌数为4.7×106,鉴定插入率为70%;重链Fd基因产物测得转化菌数为3.5×106,插入率为60%;免疫印迹法鉴定成功建立噬菌体F