血清HCV-RNA、抗-HCV抗体及肝脏酶谱联合诊断治疗丙型肝炎的临床意义

　　丙型病毒性肝炎(以下简称丙型肝炎)是由丙型肝炎病毒(HCV)通过血液传播、性传播、母婴传播等途径的一类流行性强且治愈难的传染性疾病[1]。丙型肝炎极易转变为慢性肝炎及肝硬化，并最终可能导致肝癌[2]。研究显示，约有70%以上的丙型肝炎患者可无任何症状。因此，应及早对丙型肝炎做出诊断和治疗。同时检测HCV-RNA定量、抗-HCV抗体和肝脏酶谱等可有助于提高丙型肝炎检出率及肝脏损伤程度的判断，为临床治疗提供有利帮助。

　　1　资料与方法

　　1.1　一般资料　选择2012年2月至2013年3月本院疑似丙型肝炎患者150例(排除其他类型肝炎)，其中，男性95例，女性55例;年龄18～70岁。采集患者清晨空腹血，分为3管，分别做HCV-RNA定量、抗-HCV抗体及肝脏酶谱检测。由于RNA容易降解，应在短时间内送检，并分离血清，-20℃备用。对照组为本院体检中心健康体检者(排除肝炎患者)。

　　1.2　仪器与试剂　HCV-RNA定量检测采用美国BioRadCFX96荧光定量PCR仪，试剂盒由上海科华生物工程股份有限公司提供。抗-HCV抗体滴度采用美国雅培i2000全自动免疫发光分析仪，试剂由美国雅培公司提供。谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰基转移酶(γ-GT)均采用日本奥林巴斯AU2700全自动分析仪检测，试剂由上海科华生物工程股份有限公司和上海德赛诊断系统有限公司提供。

　　1.3　方法　HCV-RNA定量检测采用实时荧光定量PCR，定量测定范围为103～107IU/mL，测定结果大于或等于500IU/mL的标本为HCV-RNA阳性标本。抗-HCV抗体检测采用化学发光微粒子免疫检测法，检测中S/CO≥1.000的样本被认定为阳性。ALT、AST、γ-GT采用酶速率法检测。

　　1.4　统计学处理　采用SPSS19.0软件进行统计学分析，计量资料以x±s表示，计数资料以率表示，相关分析采用直线相关分析法，以p<0.05为差异有统计学意义。

　　2　结　　果

　　2.1　HCV-RNA定量结果和抗-HCV抗体之间的关系　在150例丙型肝炎患者血清中，抗-HCV抗体滴度和HCV-RNA水平均为阳性者121例(80.7%);抗-HCV抗体阴性，HCV-RNA阳性者12例(8%)，这12例患者10周后检测抗-HCV抗体和HCV-RNA均为阳性;抗-HCV抗体阳性，HCV-RNA阴性者17例(11.3%)，见表1。

　　2.2　HCV-RNA水平与抗-HCV抗体滴度的相关性　对HCV-RNA阳性患者133例进行分析，取HCV-RNA水平的对数值与抗-HCV的S/OD值进行相关性分析。结果显示，HCV-RNA水平与抗-HCV抗体滴度无显著相关性(p>0.05)，见图1。

　　2.3　肝脏酶谱与HCV-RNA水平的相关性　对HCV-RNA阳性患者133例进行分析，取HCV-RNA水平的对数值分别与ALT、AST、γ-GT水平进行相关性分析。结果显示，HCV-RNA水平与ALT、AST、γ-GT水平有显著性相关性(p<0.01)，见图2～4。

　　3　讨　　论目前临床上诊断HCV感染主要是检测抗-HCV抗体滴度和HCV-RNA，杨东亮[3]认为HCV-RNA是诊断HCV病毒感染的“金标准”，因为有些患者感染HCV后，临床上并无明显的症状和体征，而HCV-RNA可以检测出HCV病毒在体内的复制[4]。有些地区仍单一靠抗-HCV抗体滴度来诊断HCV感染，这样容易造成HCV的漏诊。漏诊HCV病毒感染不仅会产生传播他人的可能，亦耽误了患者的就诊时机，造成患者病情的加重。现在常规的输血全套里仅包含抗-HCV抗体滴度的检查，而没有HCV-RNA定量检测，这样很容易造成输血后感染HCV[5-6]。作者的研究中有12例抗-HCV抗体滴度为阴性，但HCV-RNA拷贝数却是阳性。对这12例患者进行跟踪随访，在2周后同时检测抗-HCV抗体滴度和HCV-RNA，发现二者均为阳性。也不能仅仅只查HCV-RNA，因为HCV-RNA存在一定的假阴性率，如样本处理不当容易使RNA病毒被RNA酶降解，HCV-RNA阴性时，只表示体内没有HCV病毒的复制，但并不代表体内无HCV病毒感染，说明了在临床上同时检测抗-HCV抗体滴度和HCV-RNA来诊断HCV病毒感染是很有必要的。肝脏酶谱是指肝脏代谢过程中起关键作用的一类酶的总称，肝脏酶谱的检测可很好地反映肝细胞的损伤程度和病变程度[7-8]，同时检测ALT、AST、γ-GT水平其结果更加准确。当肝细胞受伤时，ALT首先检出异常[9]，但ALT水平也不能很准确的反映肝细胞受损的程度[10]，ALT与丙型肝炎患者病情的严重程度也不一定平行。AST是肝脏损伤后释放到血清中的一种蛋白，直接反映肝细胞损伤程度，AST与ALT一样，对肝损伤很敏感，随着HCV-RNA含量的增高，ALT、AST异常率也随之增高[11]。γ-GT在HCV感染时升高尤为明显，在丙型肝炎急性期，可增高至正常值的5倍以上。作者的研究发现，HCV-RNA阳性，抗-HCV抗体滴度阳性者，ALT水平明显升高的约占82.7%，AST水平明显升高的约占85.3%，γ-GT水平明显升高的约占87.3%。将3种酶联合检测，可弥补只查单一一种酶的不足，很好地反映肝细胞的损伤程度，指导临床治疗。同时检测抗-HCV抗体滴度和HCV-RNA定量，以及ALT、AST、γ-GT水平有助于丙型肝炎的早期诊断与鉴别诊断，治疗效果判断和预后，具有重要的临床意义。

　　参考文献

　　[1]陆再英，钟南山.内科学[M].7版，北京：人民卫生出版社，2009.

　　[2]ChenSL，MorganTR.ThenaturalhistoryofhepatitisCvirusin-fection[J].IntJMedSci，2006，3(2)：4752.

　　[3]杨东亮.丙型肝炎的病毒学检测指标及其临床意义[J].中华肝脏病杂志，2004，12(2)：104.

　　[4]肖征，周光.HCV抗原检测与HCV-RNA及HCV抗体检测的比较研究[J].中国人兽共患病学报，2009，17(6)：32.

　　[5]郑怀竟.献血者丙型肝炎病毒窗口期感染的筛查技术展望[J].中华肝脏病杂志，2002，10(2)：159-160.

　　[6]吕莉.丙型病毒性肝炎检测在加强输血管路的应用[J].医学理论与实践，2012，25(6)：726-727.

　　[7]丁环宇，李志勤.肝脏酶谱在肝病诊断中的临床应用[J].现代医药卫生，2010，26(7)：1084-1085.

　　[8]袁世伟，郑卫东.肝脏酶谱检测在诊断肝病中的应用及其临床意义[J].临床和实验医学杂志，2012，11(23)：1884-1885.

　　[9]ZechiniB，PasquazziC，AcetiA.Correlationofserumaminotrans-feraseswithHCVRNAlevelsandhistologicalfindingsinpatientswithchronichepatitisC：theroleofserumaspartatetransamina-seintheevaluationofdiseaseprogression[J].EurJGastroenterolHepatol，2004，16(9)：891-896.

　　[10]黄建平，胡建华，刘晓晖，等.肝胆疾病患者血清肝脏酶谱变化及分析[J].实验与检验医学，2010，28(4)：416-418.

　　[11]丁柳，周易，宋兴勃，等.HCVRNA载量与肝脏组织损伤的关系[J].中国实验诊断学，2011，3(3)：481-483.

　　(收稿日期：2013-10-16)