SysmexXE2100血液分析仪IG 报警信息的临床应用

外周血白细胞(WBC)分类计数是血液分析的基本内容，通常健康人群的外周血粒细胞只有分叶核、杆状核粒细胞两个阶段，在感染性疾病、炎症、败血症和血液病等疾病患者[12]外周血可出现幼稚粒细胞(IG)。幼稚粒细胞包括早幼粒细胞、中幼粒细胞和晚幼粒细胞，是临床诊断、治疗监测和提示预后的重要参数，在外周血中查见幼稚粒细胞常提示髓血屏障的破坏、骨髓造血功能增强或出现髓外造血等信息。而传统的幼稚粒细胞实验室检测尚依靠手工推片染色镜检，劳动强度大，过程繁琐。SysmexXE2100 血液分析仪采用流式细胞术的原理，应用核酸荧光染色技术联合直流电(DC)和射频技术(RF)检测血细胞，通过Flag 直方图、DIFF 散点图、IMI散点图和IG%等参数为临床提供了大量有价值的信息。研究者对300例仪器法出现IG 报警提示的标本进行显微镜复核，以期了解该仪器在检测外周血幼稚粒细胞方面的可靠性。

1　材料与方法

1.1　一般资料　本院门诊出现IG 异常报警信息的300 例血常规标本，静脉抽取2mL 标本置EDTAK2 真空抗凝管，按全国临床检验操作规程(第3 版)执行[3]。标本在采集后4h 内进行仪器分析，同时涂片3 张(A、B、C)，C 片备用，瑞氏染色，供显微镜检查。

1.2　仪器与试剂　SysmexXE2100全自动血细胞分析仪(日本希森美康)，配套的Sysmex稀释液、溶血剂、鞘液及稳定剂。Olympus双筒显微镜。EDTAK2 真空抗凝采血管(上海科华公司)。

1.3　精密度检测

1.3.1　批内精密度　取3 份IG 计数高、中、低值不同的抗凝血在室温下连续测定11次，计算出狊与犆犞%值。

1.3.2　批间精密度　每天同一时间检测水平2和水平3的eCHECK 质控品，连续观察20d，计算IG 值的狊与犆犞%值。

1.4　携带污染率检测　取IG 高(1.96×109/L)值、低(0.03× 109/L)值标本各1份，每份标本混匀后重复检测3次，检测的高值依次为3次Hl，H2，H3;检测的低值依次为L1，L2，L3，计算携带污染率。

1.5　标本检测　SysmexXE2100 全自动血液分析仪可自动检测外周血中的IG 值，并通过Flag所示的红色警示信号和白细胞分类DIFF(细胞五分类)通道所示信息;DIFF散点图上分布在中性粒细胞区域上方提示出现幼稚粒细胞见图1(见《国际检验医学杂志》网站主页“论文附件”);未成熟细胞(IMI)通道所示信息散点图出现红点也提示出现幼稚粒细胞或原始细胞表示其异常，见图2(见《国际检验医学杂志》网站主页“论文附件”)。XE2100在白细胞分类DIFF 通道用自动阈值鉴别线把IG 从成熟粒细胞中自动区分出来。应用聚次甲基染料进入细胞使RNA 和DNA 着色。IG 中的RNA 含量较成熟粒细胞多，所以具较强的荧光信号，可被PMT(光电倍增管)所检测[4]，即导体激光流式细胞分析与核酸荧光染色法相结合从而达到对IG 的定量检测。

1.6　相关性检测　由本科室两位经验丰富的主管技师，对血液分析仪熟练操作，并分别对300份IG 报警阳性标本的A、B血片镜检分类。每张片子在体尾交界处用油镜分类200 个细胞。镜检IG%结果=早幼粒细胞百分比+中幼粒细胞百分比+晚幼粒细胞百分比。2人的IG% 结果分别记录为XA、XB。取2人的IG% 结果的均值(XA+XB)/2 与SysmexXE2100结果进行相关性分析。

1.7　统计学处理　XE2100结果与镜检结果是否具有相关性采用Spearman秩相关性分析。所有统计分析采用SPSS13.0统计软件处理，p<0.05为差异有统计学意义。

2　结　　果

2.1　精密度　XE2100 批内精密度和批间精密度检测均较好，变异系数犆犞均小于15%，结果见表1、2。

2.2　携带污染率　取IG 高值(1.96 ×109/L)、低值(0.03× 109/L)标本各1份，依次检测高值3次(H1、H2、H3)，再检测低值3次(L1、L2、L3)，求得携带污染率为1.4% ，可见结果受携带污染影响较小。

2.3　临床相关性检测　300例标本仪器在Flag直方图、DIFF散射图、IMI散射图、IG% 方面给出了Flag 警示，分布情况见表3、4。从表3可以得出随着Flag警示值的增高，粒细胞系显微镜检查阳性率增高，两者呈明显的正相关(r=0.917，p<0.05)。由表4可得出，IG%从0.5至大于3.0，显微镜复检阳性率逐渐增大，两者呈明显的正相关(r=0.947，p<0.05)。

3　讨　　论

血液分析仪的的发展日新月异，SysmexXE2100 五分类血液分析仪，除采用传统的射频法和电阻抗法外，还利用了半导体激光流式细胞原理结合细胞化学荧光染色技术对血细胞进行检测，应用WBC/BASO、WBC/DIFF、IMI专用通道，保证了白细胞分类计数的质量并促进了异常细胞的检出[5]。IG 的信息来自IMI通道，由于幼稚细胞膜上的脂质成份较成熟粒细胞少而蛋白质较后者多，检测时在通道中加入含聚乙二醇次乙基团和硫化氨基酸的表面活性剂后，成熟粒细胞膜破坏而幼稚粒细胞膜仅部分受损，聚乙二醇次乙基团和硫化氨基酸进入幼稚细胞与细胞内容物结合，不同的幼稚粒细胞对试剂的作用有所不同。再通过电阻抗/射频信号将幼稚细胞检测出来[6]。SysmexXE2100全自动血液分析仪综合应用了多种先进技术，保证了其在正常血液细胞检验及分类计数的质量。本次检测的批内精密度和批间精密度测试结果均小于仪器的指定指标，表明该仪器对于检测IG 指数有良好的重复性。本研究选取300例IG 异常报警信息血样本，采用XE2100仪器法和显微镜方法计数幼稚粒细胞百分比，结果显示Flag报警水平、IG%提示范围与显微镜复检之间均具有较好的相关性(r=0.917和0.947，p<0.05)，与Ruzicka等[7]报道基本一致，AnsariLari等[8]与Nigro等[9]应用XE2100 分析了幼稚粒细胞的功能筛选败血症和感染性疾病，发现由于病理(感染等)或药物等的作用，细胞的大小、形态及内容物发生改变，在实际工作中不能完全依赖仪器。研究发现，Flag红色警示信号小于或等于100，在散点图异常区不出现散点或极少数散点且IG%<0.5%的标本，显微镜复检偶见幼稚粒细胞，可见中性粒细胞轻度毒性变化，可以不进行显微镜复查;Flag红色警示100～150时要考虑仪器在异型淋巴细胞、单核细胞增高时的识别局限性，须结合粒细胞散点图异常区散点的分布情况和IG% 来判定镜检复查的标本;Flag 红色警示160～300，首先应高度警惕，及时涂片，以免将血液病的标本漏检。研究者认为在保证仪器性能稳定的前提下，根据SysmexXE2100全自动血液分析仪测定给出的IG 报警信息、散点图，IG%和患者的既往史等数据情况进行综合分析，就可以做出镜检的判定，这样可在保证质量的前提下极大地提高检查效率[1012]。

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(收稿日期：20131208)