血清ANGPTL3含量与老年代谢综合征的关系

　　作者：王继红 肖亚雄 孔渝菡1 王永红2 李 晞 任晓玲 陈 瑶 作者单位：(重庆医科大学基础医学实验教学中心生物化学与分子生物学实验室 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心，重庆 400016)

　　【摘要】 目的 通过测定人血清血管生成素样蛋白3(angiopioetinlike protein 3，ANGPTL3)的表达水平，探讨ANGPTL3表达量与代谢综合征(Metabolic syndrome，MS)的关系。方法 随机筛选12例老年MS患者为MS组，以10例健康受试者为对照组，采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测每例受试者血清ANGPTL3蛋白质水平。结果 MS组ANGPTL3平均值为(69.15±41.63) mg/L，对照组为(30.81±9.12) mg/L，组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。MS组内女性血清ANGPTL3蛋白质浓度明显高于男性，差异有统计学意义(P<0.05)，而对照组内男、女两性血清ANGPTL3蛋白质浓度差异无统计学意义。结论 老年MS病人体内ANGPTL3含量明显升高，ANGPTL3可能在老年MS病人体内脂代谢和糖代谢紊乱过程中发挥了重要作用。

　　【关键词】 血管生成素样蛋白3;代谢综合征;脂代谢紊乱;糖代谢紊乱

　　The serum ANGPTL3 levels in elderly patients with metabolic syndrome

　　WANG JiHong, XIAO YaXiong， KONG YuHan, et al.

　　Biochemistry and Molecular Biology Lab of Basic Medicine Experiment Teaching Center，Molecular Medicine and Tumor Research Center, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China

　　【Abstract】 Objective To discuss the relationship between the level of serum angiopoietinlike protein 3(ANGPTL3)and metabolic syndrome(MS) patients. Methods 12 elderly MS patients were randomly selected. The enzymelinked immunosorbent assay (ELISA) was used to detect the the level of ANGPTL3 in MS patients’ serum.10 healthy person were taken as control group. Results The level of ANGPTL3 in MS patients was significantly higher than that in control group 〔(69.15±41.63) vs (30.81±9.12) mg/L，P<0.05〕. In MS group, the level of ANGPTL3 in women was significantly higher than that in men(P<0.05)，but the statistical significance was not found in the control group. Conclusions ANGPTL3 level in elderly MS patients is significantly higher than that in control group, ANGPTL3 may play an important role in the process of lipometabolic disturbance and glycometabolic disorder in MS.

　　【Key words】 Angiopioetinlike protein 3; Metabolic syndrome; Lipometabolic disturbance ; Glycometabolic disorder

　　流行病学资料表明，代谢综合征(MS)与心血管疾病和糖尿病的发病密切相关〔1，2〕，目前有关MS的病因及发病机制尚未完全明了，但机体糖、脂类代谢紊乱与其密切相关。人血清血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)可以通过抑制脂蛋白脂肪酶的活性造成动物机体脂代谢紊乱，因此认为该蛋白质主要与脂类代谢有关。日本Inukai〔3〕等通过糖尿病小鼠模型研究发现，该蛋白质在糖尿病小鼠中表达升高。本课题组曾用正常肝细胞株(LO2)为研究对象，在细胞水平发现ANGPTL3的含量与糖脂代谢相关〔4，5〕。Shimamura等〔6〕研究认为，ANGPTL3在胰岛素抵抗个体内的失调可能是MS引起血浆三酰甘油(TG)和游离脂肪酸(FFA)升高的一个发病机制。本课题通过测定MS患者血清ANGPTL3含量，分析ANGPTL3与MS的关系，为寻找MS病因和发病机制探索新途径。

　　1 资料与方法

　　1.1 材料 人ANGPTL3 ELISA测定试剂盒(美国UCL公司);酶标仪(奥地利Sunrise RC);全自动生化仪(日本日立7020);葡萄糖氧化酶过氧化物酶耦联(GODPOD)法葡萄糖测定试剂盒、胆固醇(TC)测定试剂盒、TG测定试剂盒(北京金豪制药有限公司)。HEM906型血压计(日本欧姆龙松阪株式会社);SKCK90超声体检机(深圳Sonka 电子科技有限公司，用于测定身高、体重)。

　　1.2 临床资料 根据重庆医科大学附属第一医院门诊体检结果，筛选符合2004年《中华医学会糖尿病学分会关于代谢综合征的建议》〔7〕和中国人MS诊断标准的病例，即具备以下4项中3项或全部者：①超重和/或肥胖：体重指数(BMI)≥25(kg/m2);②高血糖：空腹血糖(FPG)≥6.1 mmol/L，及(或)餐后2 h血糖≥7.8 mmol/L，和(或)已诊断为糖尿病者;③高血压：收缩压/舒张压≥140/90 mmHg，和(或)已经确诊为高血压并治疗者;④血脂紊乱：空腹TG≥1.7 mmol/L和(或)空腹高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)男<0.9 mmol/L,　女<1.0 mmol/L。共筛选出MS 病例12例，其中男、女各6 例，年龄60～76〔平均(6.55±4.2)〕岁。健康对照组10例，年龄61～73〔平均(67.2±5.9)〕岁，男、女性各5例。

　　1.3 血液标本采集及检测 所有受试者于上午7:30～8:30 采集空腹肘静脉血液4 ml，室温静置30 min，3 000 r/min离心15 min，分离血清，留取 0.5 ml血清冻存于-80℃冰箱中保存，待测ANGPTL3浓度。剩余血清送重庆医科大学附属第一医院检验科进行临床生化项目检测。

　　1.4 血清ANGPTL3测定 用双抗体夹心ELISA方法测定血清ANGPTL3含量，操作严格按照美国UCL公司生产的人ANGPTL3蛋白质ELISA测定试剂盒操作说明进行，每份标本设复孔，取平均值为实验结果。使用奥地利Sunrise RC酶标仪读取各孔OD值，采用标准曲线法计算结果。

　　1.5 血清非ANGPTL3参数测定 用日立7020全自动生化仪检测FPG、空腹TG(fasting blood triglyceride,FBTG)和空腹TC(fasting blood total cholesterol,FBTC)。

　　1.6 其他参数测定 由专人使用统一设备测量受试者身高(m)、体重(kg)，计算BMI〔BMI=体重/身高2(kg/m2)〕。血压测定：由专人使用固定血压计测量受试者左上肢坐位血压，连续测量3次取均值。对于一次血压偏高者吩咐其静坐20 min后再进行测定。

　　1.7 统计学处理 用SPSS13.0软件包进行统计分析，计量资料以x±s表示，组间比较为t检验。

　　2 结 果

　　2.1 血清ANGPTL3蛋白质水平分析 MS组与对照组血清ANGPTL3蛋白质浓度分别为(69.15±41.63) mg/L和(30.81±9.12) mg/L，MS组明显高于对照组(P<0.01)。MS组内女性血清ANGPTL3浓度〔(88.89±44.68) mg/L〕明显高于男性〔(49.42±29.70) mg/L〕(P<0.05)，而对照组内男、女两性血清ANGPTL3蛋白质浓度分别为〔(34.86±11.70)，(26.75±3.06) mg/L〕，差异无统计学意义。

　　2.2 其他参数分析 比较对照组和MS组的BMI，收缩压，舒张压，血清TC、TG以及FPG等指标，发现MS组除舒张压与对照组比较无显著差异外，其余各指标明显高于对照组，差异有统计学意义。见表1。表1 其他参数比较

　　3 讨 论

　　国外动物实验研究发现，ANGPTL3大量表达可引起小鼠体内TG升高〔8〕，还可促进脂肪细胞脂解作用，释放大量FFA〔9〕。由于血液中TG和FFA浓度增加引发高脂血症，进而加重了肝脏和外周组织的胰岛素抵抗，而胰岛素抵抗又可以导致ANGPTL3表达增加〔8〕，二者互为因果，形成恶性循环。Inukai还利用糖尿病模型小鼠研究，发现小鼠肝脏ANGPTL3在基因和蛋白质水平较对照组都明显升高，而且该作用可以被胰岛素逆转。因此，认为ANGPTL3在胰岛素抵抗个体中的失调可能是MS引起血浆TG和FFA升高的一个发病机制〔6〕，而脂代谢和糖代谢紊乱是MS的重要临床表现。

　　国内外有关ANGPTL3的有限研究均建立在动物模型基础上，仅探讨了ANGPTL3与糖代谢紊乱、或者脂代谢紊乱的关系，没有直接把脂代谢与糖代谢结合起来探讨其与MS的关系。本文以人血清作为研究对象，直接分析人血清ANGPTL3含量与MS的关系。结果显示，老年MS病人血清ANGPTL3表达水平较正常组明显升高，提示血清ANGPTL3含量可能与老年MS发生有关。另外在MS组内女性血清ANGPTL3浓度较男性明显升高的结果为国内外首次报道，其是否说明在女性老年MS病人的发病过程中ANGPTL3增高比男性明显，该结论有待进一步证实。通过对健康组和老年MS组病人其他参数的统计学分析发现，MS组的BMI，收缩压，血清TC、TG以及FBG等指标的平均值均高于健康老人组，因此老年MS病人血清ANGPTL3高表达是否与MS病人的肥胖、高血压、单纯糖代谢紊乱、脂代谢紊乱的发病有关也需要进一步研究。

　　【参考文献】

　　1 Anderson PJ，Critchley JA，Chan JC,et al.Factor analysis of the metabolic syndrome：obesity vs insulin resistance as the central abnormality〔J〕. Int J Obes Relat Metab Disord，2001;25(12)：17828.

　　2 Cart DB，Utzschneider KM，Hull RL,et al.Intraabdominal fat is a major determinant of the national cholesterol education program adult treatment panel Ⅲ criteria for the metabolic syndrome〔J〕.Diabetes，2004;53(8)：208794.

　　3 Inukai K，Nakashima Y，Watanabe M,et al.ANGPTL3 is increased in both insulindeficient and resistant diabetic states〔J〕.Biochem Biophys Res Commun，2004;317(4):10759.

　　4 李 倩，王继红，程 梅，等.葡萄糖对人肝细胞血管生成素样蛋白3表达的影响〔J〕.第四军医大学学报,2008;29(3):24851.

　　5 曾建涛，王继红，黄家利，等.葡萄糖对 L02细胞 LXRα与 ANGP TL3基因表达的影响〔J〕.第四军医大学学报，2008;29(7)：6102.

　　6 Shimamura M，Matsuda M，Ando Y,et al.Leptin and insulin downregulate angiopoietinlike protein 3，a plasma triglycerideincreasing factor〔J〕. Biochem Biophys Res Commun，2004;322(3):10805.

　　7 中华医学会糖尿病学分会代谢综合征研究协作组.中华医学会糖尿病学分会关于代谢综合征的建议〔J〕.中华糖尿病杂志,2004;12(3):15661.

　　8 Koster A，Chao YB，Mosior M,et al.Transgenic angiopoietinlike (angptl)4 overexpression and targeted disruption of angptl4 and angptl3：regulation of triglyceride metabolism〔J〕.Endocrinology，2005;146(11):494350.

　　9 Shimamura M,Matsuda M,Kobayashi S,et al.Angiopoietinlike protein 3,a hepatic secretory factor,activates lipolysis in adipocytes〔J〕.Biochem Biophys Res Commun，2003;301(2):6049.