蛋白质Z及凝血因子在恶性实体瘤患者中的变化

　　作者：关则兵 作者单位：广东药学院附属第一医院血液科，广州 510080

　　关键字：蛋白质Z及凝血因子在恶性实体瘤患者中的变化

　　The Change of Protein Z and Plasma Coagulant Factors in Patients with Malignant Tumors

　　GUAN Zebing , PAN Xueyi, CAI Xiaoyan

　　(Department of Hematology，the First Affiliated Hospital of Guangdong University of Pharmacy, Guangzhou 510080,China)Abstract: Objective To study clinical significance of protein Z(PZ) in patients with malignant tumors.Methods PZ was detected with ELISA method, plasma FⅦ:C; FⅧ:C; FX:C and FⅪ:C were tested by ALC2000 fully automatic coagulantmeter in 86 patients with malignant tumors.The correlation between relapsed and unrelapsed patients was analysed.45 healthy people were as control. Results The level of PZ were remarkably lower(1 210.89 ng/ml±251.13 ng/ml vs 2 378.83 ng/ml±429.51 ng/ml,P<001). FⅦ:C. FⅧ:C, FX:C. FⅪ:C were much higher in malignant tumor group than those in control group(162.42%±36.57% vs 116.70%±28.80%,201.95%±77.54% vs 70.15%±21.28%,120.27%±7754% vs 76.13%±19.26%,145.88%±56.48% vs 77.23%±16.22%, respectively,P<0.01). The level of PZ in tumor group and control group has a significant negative correlation with level of FⅦ:C、FⅧ:C、FⅩ:C(P<0.001), PZ has no correlation with FⅪ:C (P>0.05). The level of PZ was lower and the plasma FⅦ: C, FⅧ: C, FX: C, FⅪ: C was higher in group of recurmetastatic patients than those in group of nonrecurmetastatic ones (P<0.01). Conclusion PZ was significantly lower and perhaps was a new mechanism of the acquired hypercoagulable state in patients with malignant tumor.Key words: Malignant tumors; Protein Z; FⅦ: C; FⅧ: C; FX: C; FⅪ: C

　　蛋白质Z(protein Z，PZ)是近年来发现的一种新的抗凝因子，为蛋白Z依赖性蛋白酶抑制性抑制凝血因子Xa的辅因子，其临床上意义正在评估。新近文献报道表明,PZ缺乏与缺血性脑卒中和急性冠脉综合征的危险性明显增加相关,但其确切机制不明。对恶性实体瘤的PZ水平至今未见报道。为此，我们对86例恶性肿瘤患者观察了PZ及其相关凝血因子Ⅶ:C、Ⅷ:C、Ⅹ:C、Ⅺ:C含量的变化，藉以探讨PZ在恶性肿瘤中的变化以及其与血栓性疾病的关系。

　　1 资料与方法

　　1.1 研究对象 恶性肿瘤组86例，男性45例，女性41例，中位年龄59.8(33～82)岁。其中肺癌组34例，肠癌组24例，乳腺癌组12例，恶性淋巴瘤组18例;复发转移组39例，未复发转移组47例。全部病例均经病理或细胞学诊断。正常对照组45例，男性25例，女性20例，中位年龄57.5(28～71)岁，均为门诊正常体检者，且证实其身体健康，未患高血压、高脂血症、冠心病、短暂性脑缺血、糖尿病、尿毒症、周围血管疾病。两组人员受试前2周均未吸烟或使用抗凝、溶血栓剂。

　　1.2 样本采集与保存 两组人员在空腹条件下于前肘静脉采血4 ml。血液与0.13 mol/L枸橼酸钠9∶1于试管内混合、抗凝，室温下放置不超过1 h，即以3 000 r/min离心20 min，收集血浆置于-40℃冰箱保持测，在3个月内完成血浆FⅦ:C、FⅧ:C、FX:C、FⅪ:C指标的测定。

　　1.3 主要试剂和检测方法 PZ用ELISA法检测，试剂盒由法国Stago公司提供，在Moded 680酶标仪上扫描测定。FⅦ:C、FⅧ:C、FX:C、FⅪ:C用一期法在ACL2000全自动凝血仪上进行测定。所有血浆标本都在试验前由冰箱内取出，37℃水浴，10 min内融化，如发现凝块或絮状沉淀则弃用。各项试剂、正常人血浆(标准血浆)均由美国BioMefieux公司提供。

　　1.4 统计学处理 用SPSS V 11.0进行数据处理，实验结果用±s表示。以健康体检者作为对照，各组差异采用方差分析，若F>0.05则采用t检验，以P<0.05具有统计学意义。

　　2 结 果

　　2.1 恶性肿瘤组PZ、凝血因子活性水平测定结果见表1。表1 恶性肿瘤组PZ、凝血因子水平由表l可见恶性肿瘤组PZ低于对照组，血浆凝血因子活性明显高于对照组(P<0.01)。

　　2.2 86例不同种恶性肿瘤PZ及各凝血因子活性水平测定结果见表2。 表2 86例不同种恶性肿瘤组蛋白质Z、血凝因子水平 由表2可看出，除肺癌FⅧ:C比乳腺癌增高外(P<0.05)，其余各组间PZ及凝血因子比差异均无显著性(P值均>0.05)。

　　2.3 复发转移组与未复发转移组恶性肿瘤PZ及各凝血因子活性水平测定结果见表3表3 复发转移组与未复发转移组恶性肿瘤PZ、凝血因子水平由表3可见，PZ在复发转移恶性肿瘤组较未复发转移恶性肿瘤组降低，而血浆凝血因子活性明显增高组(P<0.001)。

　　2.4 PZ与4种凝血因子的相关性结果见表4 表4 PZ与4种凝血因子的相关性组别注：*P<0.01相关性分析显示PZ与FⅦ:C、FⅧ:C、FX:C水平在健康人和患者中均有明显负相关(P均<0.001)，而PZ与FXI:C相关性不明显(P>0.05)。

　　3 讨 论

　　恶性肿瘤患者常存在血液高凝状态，而高凝状态对肿瘤的生长和转移具有重要意义。Sun等[1]指出大约50%以上的肿瘤病人发生凝血机制异常。血栓形成是一类多因素疾病，近年PZ在血栓形成的作用引起了人们的兴趣。PZ是由肝脏合成的一种维生素K依赖的血浆蛋白，人蛋白质Z的分子量为62 ku，其基因定位13 934，结构上与其他维生素K依赖性FⅦ、FⅨ、FⅩ及PC相似[24],但缺乏活化点及催化的组氨酸残基及丝氨酸残基，故无蛋白水解作用。在蛋白质Z依赖性蛋白酶抑制剂(protein Zdependent protease inhibitor，ZPI)抑制FXa的作用中，PZ作为一种辅助因子使ZPI对FⅪa的抑制作用增强1 000倍以上[58]。PZ在临床上的意义尚不清楚，近年来的文献中开始有了一些报道。PZ与血栓的关系现有两种不同的观点，一种认为PZ升高与血栓形成有关，另一种认为PZ降低与血栓形成有关，但都认为PZ血浆浓度变化是血栓形成的因素。PZ含量在恶性实体肿瘤中的变化至今尚无报道。Undar等[9]有关恶性血液肿瘤中的报道发现。急性白血病和非何杰金氏淋巴瘤患者血浆PZ水平与白细胞介素6水平呈负相关。我们在86例恶性实体肿瘤患者的研究中，发现患者PZ含量明显低于对照组(P<0.001)。恶性肿瘤中PZ水平减低的机制尚不清楚。最近Gamba等[10]报道了在体外纯化系统中观察当ZPI抑制FXa活性时PZ水平对其影响，结果显示PZ水平与FXa呈负相关。为此，我们在恶性肿瘤患者中检测 PZ水平的同时也平行检测了其他维生素K依赖的凝血因子FⅦ:C、FⅧ:C、FX:C，FXI:C。发现FⅦ:C、FⅧ:C、FX:C、FXI:C明显提高，即在PZ下降同时其FⅦ:C、FⅧ:C、FX:C、FXI:C升高。为此，我们对PZ水平与FⅦ、FⅧ、FX、FXI活性之间的关系采用Spearman等级相关法进行相关性分析，结果显示，PZ与FⅦ:C、FⅧ:C、FX:C水平在健康人和患者中均存在明显负相关(P均<0.001)，而PZ与FXI:C相关性不明显(P>0.05)。这表明在患者中所见到的血浆FⅦ、FⅧ、FX活性升高可能与PZ水平的降低有关。目前的研究巳证明FⅦ、FⅧ、FX水平升高与血栓性疾病有关，是血栓形成的一个危险因子。FⅦ作为凝血瀑布的起始酶，FX作为凝血过程的关键酶，近年来被视为高凝状态的危险因子。临床和实验证明，恶性肿瘤是高凝状态的常见病理过程。有人认为肿瘤患者血液高凝状态为扩散和转移的癌细胞聚集提供了机会，使之停留在局部组织，加之血液淤滞，携带免疫防御因素减少，更有利于癌细胞的生长，这可能是恶性肿瘤疗效不佳的原因[20,21]。因此有理由推测FⅦ、FⅧ、FX水平可能与恶性肿瘤，特别是肿瘤转移有密切关系[20,21]。为此我们提出，PZ水平下降所致的FⅦ、FⅧ、FX活性和水平的升高可能是PZ下降导致恶性肿瘤高凝状态形成的一个新的机制。这在目前的文献中尚未见类似报道。我们首次观察并提出了PZ在恶性肿瘤高凝状态中的意义。 此外，我们也分析了PZ水平与疾病发病间的关系，结果显示PZ水平与病情间存在密切关系。在复发转移组PZ、FⅦ:C、FⅧ:C、FX:C、FXI:C与未复发转移组比较，有明显差异(P<0.01)。 PZ水平的下降程度也反映了疾病的病理过程，PZ水平随着疾病的反复发作转移而下降更为明显。所以PZ水平下降不仅与动脉血栓形成相关，还可能是恶性肿瘤发病的一个危险因子。因此定期复查PZ、FⅦ:C、FⅧ:C、FX:C、FXI:C对于及早发现高凝倾向，并加以预防和治疗均具有一定参考价值。

　　【参考文献】

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