特发性血小板减少性紫癜患者血小板生成素和β2-微球蛋白与疗效的关系

　　作者：苏林冲， 戚 璐， 曾小菁 作者单位：(贵阳医学院附院 血液科， 贵州 贵阳 550004)

　　【摘要】 目的： 探讨特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者血清血小板生成素(TPO)和β2-微球蛋白(β2-M)与疗效的关系。方法：初治ITP患者，分为治疗有效组和治疗无效组，设正常对照组20例;采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)和放射免疫法(RIA)，分别检测治疗前后血清TPO和β2-MG。同时检测治疗前骨髓涂片的平均巨核细胞数量。结果：在ITP患者中，治疗无效组的TPO和β2-M则明显高于有效组及对照组(P<0.05)，有效组与对照组间无显著差异(P>0.05)，而巨核细胞计数则显著低于有效组(P<0.01);治疗后，治疗无效组的β2-M和TPO水平仍明显高于对照组(P<0.05)，有效组和无效组治疗后的TPO和β2-M水平略有下降，但差异无统计学意义(P>0.05)。结论：血清高水平TPO和β2-M可能预示ITP治疗困难，表明治疗有效与无效的ITP患者在发病机理方面可能存在差异。

　　【关键词】 紫癜，血小板减少性，特发性; 血小板生成素; β2-微球蛋白; 治疗结果

　　An Observation on Relationship of Thrombopoietin and Beta2-microglobulin

　　with the Curative Results of Idiopathic Thrombocytopenic Purpura

　　SU Linchong*, QI lu, ZENG Xiaojing**

　　(Department of hematology, The Affiliated Hospital of Guiyang Medical College, Guiyang 550004, Guizhou, China)

　　[Abstract] Objective: To investigate the relationship of serum thrombopoietin (TPO), and beta-2mi-croglobulin (β2-M) with the curative results of idiopathic thrombocytopenic purpura (ITP). Methods: Thirty patients with newly diagnosed ITP were divided into effective group (group E, n=23) and ineffective group(group I, n=7), according to their curative results. The serum TPO concentrations of all of the patients and 20 healthy people (as control, group C) were detected by using double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and the serum β2-M concentrations were detected by using radio-immunoassay (RIA). Bone marrow megakaryocytes were counted before the treatment of ITP. Results: The megakaryocyte counts of patients in group I were significantly lower than that of patients in group E (P<0.01); The TPO and β2-M levels of patients in group I were significantly higher than those of patients in group E and healthy people in group C (P<0.05), and kept significantly higher than those of group C after a period of treatment (P<0.05). The TPO and β2-M levels of the patients in two groups did not change significantly before and after the treatment (P>0.05). Conclusions: High levels of serum TPO and β2-M in ITP patients may be a sign indicating the difficulty in treatment, and there might be some differences in pathogenesis between “effectively cured” and “difficultly-treat” ITP patients.

　　[Key words] purpura, thrombocytopenic, idiopathic; thrombopoietin; beta 2-microglobulin; treatment outcome

　　特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura，ITP)是一种缺乏明确病因，以血小板减少、骨髓巨核细胞数正常或增生伴成熟障碍为特征，临床表现为皮肤、黏膜出现瘀点、瘀斑的自身免疫性疾病,很少能自行缓解，部分病例呈间歇性缓解与发作，目前多认为ITP与免疫异常有关。ITP的诊断没有特异性标准，主要依据排除其他原因的血小板减少。对2005年9月～2006年12月初治ITP患者血清TPO和β2-MG水平与其治疗效果的关系进行研究，报告如下。

　　1 对象与方法

　　1.1 对象

　　初治、病程在6月以内的ITP病人30例，男13例，女17例，年龄13～80岁，平均31岁。所有病例按文献[1]标准确诊。设正常对照组20例，其中男8人，女12人，年龄19～56岁，平均34岁。

　　1.2 方法

　　1.2.1 治疗及疗效判断 ITP患者给予泼尼松1 mg/(kg·d)口服;或地塞米松0.3～0.5 mg/(kg·d)静脉滴注, 5～7 d后改为泼尼松口服。严重者输注丙种球蛋白0.4 g/(kg·d)，连用5 d或给予血小板，病情稳定后泼尼松逐渐减量。治疗1月

　　后，将显效、良效和进步划分为治疗有效组，无效划为治疗无效组。

　　1.2.2 检测指标 分别于治疗前和治疗1月后抽取清晨空腹静脉血3 ml，计数血小板(PLT);取血清，用双抗体夹心-ELISA法测TPO，RIA测β2-M。试剂盒由上海西唐生物科技有限公司和潍坊三维生物工程集团有限公司提供，操作按试剂盒说明书进行。取每个病人治疗前两张骨髓涂片，膜面积2 cm×3 cm行巨核细胞计数，平均值即为该病人的巨核细胞数。

　　1.3 统计学处理

　　巨核细胞计数、血清TPO和β2-M浓度以均x±s表示，病人组与对照组间用t检验，采用SPSS统计软件(12.0版本)进行统计学分析。

　　2 结果

　　2.1 对照组和ITP治疗前后PLT、TPO、β2-MG水平

　　表1表明，对照组与ITP患者相比，PLT计数差异显著(P<0.01)，但TPO和β2-M差异无统计学意义(P>0.05);治疗后，PLT较治疗前显著上升(P<0.01)，TPO和β2-M值稍下降，与治疗前及对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。 表1 ITP患者和对照组的PLT、TPO、β2-M检测结果治疗后 67.40±49.70(1) 1 423.50±500.84 1.58±0.68(1)与对照组相比，P<0.01。

　　2.2 ITP治疗有效组、无效组和对照组的PLT、TPO和β2-MG

　　表2中提示，ITP治疗无效、有效患者的PLT计数在治疗前无差异，P>0.05，治疗无效组的TPO和β2-M水平明显升高，与有效组及对照组比差异显著，P<0.05，而有效组与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。在治疗后，有效组PLT明显上升，无效组变化不大，两者差异显著，P<0.01;治疗无效组的TPO和β2-M水平仍显著高于对照组P<0.01。治疗有效组与无效组ITP患者的TPO和β2-M水平的组内治疗前后比较，均无统计学意义(P>0.05)。

　　2.3 ITP治疗有效组与无效组患者治疗前巨核细胞计数的检测结果

　　治疗有效组ITP患者接受治疗前每张骨髓片巨核细胞数为(259.3±159.0)个;治疗无效组为(53.7±26.6)个，两组巨核细胞数差异显著，P<0.01。

　　3 讨论

　　ITP是一种多病因致病性疾病，主要是由于循 表2 ITP治疗有效组、无效组和对照组的PLT、TPO和β2-MG检测结果环血中针对PLT生成环节中的某些细胞或PLT本身的自身抗体增多，使PLT成熟障碍或破坏增多引起血小板减少的自身免疫性疾病。

　　3.1 TPO与ITP

　　TPO为低分子量糖蛋白,主要由肝细胞、肾近曲小管和远曲小管细胞及骨髓基质细胞合成[2],不同性别、年龄的血浆TPO浓度无显著差异[3]。TPO是调节巨核细胞增殖分化、成熟和介导血小板生成的最主要调节因素,也是一个早期造血促进因子,能特异性的刺激巨核系祖细胞增殖分化,其生物学效应由其受体C-Mpl介导完成[4]。Espanol等[5]认为, ITP病人血浆TPO水平较正常对照高, 但无显著性差异。本文检测30例初治ITP患者血清TPO值略高于对照组, 差异无统计学意义，与文献报道一致。ITP治疗有效组的骨髓涂片巨核细胞数明显高于无效组, 而无效组TPO显著高于有效组和对照组。Sakane等[6]认为，TPO水平正常的ITP患者巨核细胞未受抑制，数目正常或增多，对激素反应好;高水平者提示巨核细胞受抑，数目不增多，对激素反应差。肖燕等[7]认为, ITP患儿血清TPO水平明显增高且无巨核细胞数增高者疗效差,可能提示预后不良，与本文结果一致。在治疗有效组, PLT减少可能主要是由于PLT破坏增多所致,且多有巨核细胞增多,增多的巨核细胞可能降解了循环中多余的TPO，使血清TPO水平波动不大。Chang M等[8]认为ITP患者PLT寿命明显缩短，过度的PLT更新，TPO的摄取和降解加快，致使血浆TPO水平升高不明显。在ITP治疗无效组，其PLT减少可能主要是由于巨核细胞受抑或成熟障碍，致PLT生成减少，TPO反馈性增高。尽管无效组TPO显著升高，但大部分是TPO不升高的有效者，所以所有的ITP患者综合起来与正常对照组比较就难有显著性差异。

　　3.2 β2-M与ITP

　　β2-M是人类白细胞抗原复合物(HLA)Ⅰ类抗原分子的重要成分，与稳定HLAⅠ类抗原的表达有关，在抗原表达、免疫球蛋白转运、铁代谢、细胞毒性T淋巴细胞作用和自然杀伤细胞介导的细胞毒作用等方面发挥着非常重要的作用，与人体绝大部分疾病都有关系[9，10]。本文检测30例初治ITP患者的β2-M总体上略高于对照组，但差异无统计学意义，与顾凤英等[11]的研究结果一致;但无效组β2-M显著高于对照组和有效组，有效组与对照组无显著差异。郭瑞官等[12]观察32例ITP患儿的血和尿的β2-M，结果均明显高于对照组，治疗好转则显著降低，持续高水平者对治疗反应差，与本研究结果不尽相同。治疗无效的ITP患者β2-M升高原因可能是机体免疫活性细胞分泌明显增加，有核细胞破坏和抗原裂解增加，结合于细胞表面的β2-M释放增多，致血清β2-M水平升高;或者治疗无效组与治疗有效组的发病机制存在不同，前者影响β2-M的合成，而后者影响不大。

　　3.3 不同治疗效果ITP患者的发病机制

　　TPO是巨核细胞-血小板系的体液调控因子，TPO水平的稳定对维持PLT的稳定具有重要的作用，其主要受PLT、巨核细胞数及两者膜表面C-Mpl总量的负调控[13]。Stoll[14]发现在ITP患者中的抗GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/Ⅸ抗体可以和巨核细胞相结合，影响巨核细胞的成熟，使血小板生成受抑。范磊等[15]研究也提示ITP的自身抗体可能通过巨核细胞影响体内PLT的生成和释放，使血小板生成受抑，提示巨核细胞异常在ITP的发病中发挥着非常重要的作用。通常认为β2-M对机体免疫功能、细胞介导的细胞毒性作用等方面有调节作用。ITP是与免疫功能紊乱有关的自身免疫性疾病，在以PLT减少为特征的ITP患者中，TPO和β2-M理论上均应升高。而本研究中治疗有效的ITP患者巨核细胞数显著高于无效者，而无效组的TPO、β2-M水平则明显高于有效组和对照组，提示两者的发病机制可能存在差异。目前认为，PLT破坏增加和生成受抑是慢性ITP发病的重要因素[15，16]。本文中治疗无效的ITP患者最终都会演变为慢性ITP，提示巨核细胞异常、PLT生成受抑在治疗无效者中发挥着更为重要的作用。总之, 治疗有效与无效ITP患者的发病机制可能存在差异,多种原因使患者免疫功能紊乱, 治疗有效者主要产生针对PLT的自身抗体,以PLT破坏增多为主;而治疗无效者产生的抗体则主要作用于巨核细胞, 使其增殖、成熟障碍,致使血小板生成减少。当然也有可能相同的病因, 免疫反应的不同导致了疗效的差异。 ITP患者高水平的TPO和β2-M可能预示治疗困难，对初诊的ITP患者，推荐常规进行血清TPO和β2-M检测，若明显升高，建议尽早加用或换用除肾上腺皮质激素以外的其他免疫抑制剂，或选择其他治疗手段。

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