血象监测评估CD34+细胞在干细胞移植中的应用
发表时间：2010-04-12 浏览次数：521次
作者：吴 蔚 马 莉 汪中强 作者单位： 225001 江苏扬州，扬州市血液学研究所
【摘要】 目的 通过分析自体外周血干细胞移植动员中血象变化、外周血细胞形态预测自体外周血干细胞移植CD34+细胞采集的时机。方法 回顾本院7例外周血干细胞移植治疗恶性淋巴瘤患者在动员时的血象、外周血细胞形态及采集当天的外周血CD34+细胞检测。结果 综合分析血象及外周血细胞形态，于动员方案后白细胞数回升至2.3(2.1～2.7)×109/L，单个核细胞比例达36%(21%～49%)，提示CD34+细胞采集时机，并于采集当天与外周血CD34+细胞流式细胞术(FCM)比较。结论 外周血血象及细胞形态可提示外周血干细胞移植CD34+细胞的采集时机。
【关键词】 血象;CD34+细胞;骨髓移植;外周血干细胞移植
由于外周血干细胞移植(PBSCT)不需多部位骨髓穿刺，去除抽髓之痛苦和不便，易被患者接受，而且PBSCT后受体造血功能重建快，感染、出血等并发症低且轻，减少了抗生素和成分血的应用，降低移植相关病死率，缩短住院时间，节约费用，所以近年来得到了快速发展。
资料表明，自体PBSCT患者应用化疗和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)联合动员后，采集多在骨髓动员方案后造血恢复时，此时外周血中造血干(祖)细胞大量增加，但这种情况维持时间较短暂，如果错过采集时机，不利于采集，达不到有效CD34+细胞阈值。因此把握最佳采集时机，对外周血干细胞移植的成功有重要意义。目前用流式细胞仪测定外周血CD34+细胞数量值来决定采集时间，并要求CD34+细胞数必须达到一定的数量，才能达到有效采集阈值。我们采用密切观察血象、血细胞形态时期的变化提醒CD34+细胞的检测时机，能帮助预测采集时间。本文总结了7例淋巴瘤患者动员血象及外周血细胞形态作为采集预测评估，把握自体外周血干细胞移植(APBSCT)细胞采集时机作一总结报告如下。
1 资料与方法
1.1 病例资料 本院血液科自2000年12月～2004年3月施行自体外周血造血干细胞移植7例，男3例，女4例，年龄16～43岁，其中非霍奇金淋巴瘤5例，霍奇金病2例。外周血干细胞移植采用的动员方案均为MAG方案。
1.2 血象检查 于进仓第1天到动员方案开始，每天检查血象 (Hb、WBC计数、Plt计数)，同时观察外周血细胞形态变化。
1.3 CD34+细胞检测 外周血CD34+细胞检测由美国BD公司制造的流式细胞仪测定，由BD公司提供的ProCOUNT试剂盒。
2 结果
2.1 外周血WBC计数变化趋势 全部患者于动员后10(9～12)天，WBC数降至(0.05～0.1)×109/ L，在此水平维持3～4天，细胞数开始回升，配用惠尔血4(3～7)天WBC数达2.3(2.1～2.7)×109/L，检测外周血CD34+细胞，预测自体外周血干细胞CD34+细胞采集时机。
2.2 外周血细胞形态检查 白细胞开始回升，外周血细胞形态分类可见单个核细胞，提示造血干/祖细胞已外溢至外周血。血象示经动员后白细胞回升4(3～7)天时，WBC数平均达2.3(2.1～2.7)×109/L，单个核细胞比例达36%(21%～49%)，提示外周血CD34+细胞检测时机。第2天血象呈跳跃性上升(见图1)。
图1 7例自体PBSCT动员血象变化图
血片单个核细胞主要为原始细胞、单核细胞及淋巴细胞。原始细胞呈圆形，细胞质量少呈透明蓝色，核染色质细致较脆弱，部分可见核仁，该类细胞较为幼稚，以CD34+细胞为主，也是回输时有效的细胞。单核细胞呈圆形，细胞质丰富呈蓝色，部分细胞胞质可见细微的粉红色颗粒，核染色质扭曲折叠，较疏松，这类细胞较成熟。而动员出的单核细胞与正常的单核细胞不同，核染色质较正常的更为疏松。
2.3 CD34+细胞百分比 采集前外周血CD34+细胞1.75%，(1.43～4.09)×109/L，提示CD34+细胞采集时机。
3 讨论
外周血干细胞移植近年来已被广泛开展。正常外周血中造血干细胞仅为0.2%，在动员后，可使其造血干(祖)细胞浓度显著增加，但维持时间较短暂，临床通过外周血CD34+细胞多少来评价外周血干细胞的动员效果，判断采集造血干细胞的最佳时机，达到有效采集量。我们通过分析血细胞形态评估外周血细胞CD34+细胞采集的时机，更好把握采集时机，提高采集率，减少采集次数以采集到足够用以造血干细胞移植所需的细胞数量。
【参考文献】
1 达万明，裴雪涛.外周血干细胞移植.北京：人民卫生出版社，2000，50-51.
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3 葛林阜，葛林玉，黄宁，等.自体外周造血干细胞移植治疗淋巴瘤.白血病，1999，8:114-116.
