p53、Pgp、GSTπ和TopoⅡα在老年消化道肿瘤中的表

　　作者：檀碧波,韩杰,吕炳蓉,耿玮,赵建辉　　作者单位：河北省人民医院胃肠外科，河北 石家庄 050051

　　【摘要】 目的探讨p53、P糖蛋白(Pgp)、谷胱甘肽S转移酶(GSTπ)和DNA拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)在老年消化道肿瘤中的表达及意义。方法 对33例老年(≥60岁)消化道肿瘤组织进行p53蛋白、Pgp、GSTπ和TopoⅡα免疫组化染色，并以35例(<60岁)消化道肿瘤作为对照。结果 老年组患者在临床病理学特征中，高分化腺癌(22/33)、大肠癌(22/33)患者比例明显高于对照组(均P<0.01)。老年组Pgp、GSTπ表达明显高于对照组(分别为P=0.009、P=0.026)，p53在两组间差异不显著(P=0.293)，而TopoⅡα表达则低于对照组(P=0.032)。结论 老年消化道肿瘤Pgp和GSTπ高表达、TopoⅡα低表达的特点与老年消化道肿瘤以高分化腺癌、大肠癌为主的临床病理特征有关。

　　【关键词】 消化道肿瘤;多药耐药性;老年人

　　【Abstract】 Objective To investigate expressions of p53，Pglycoprotein(Pgp)，GSTπ and TopoⅡα in old patients with gastrointestinal carcinoma.Methods The expressions of p53，Pgp，GSTπ and TopoⅡα in gastrointestinal carcinoma tissue from 33 old patients (≥60 years old) were detected by immunohistochemistry, and 35 patients (<60 years old) were selected as control group simultaneously.Results There were significant differences in clinicopathologic features 〔well differentiated adenocarcinoma (22/33) and colorectal cancer ratios (22/33)〕 between the old patients and control group (all P<0.01). The expressions of Pgp and GSTπ were significantly higher and TopoⅡα lower than those of control group (P= 0.009 1, 0.026 and 0.032). There was no difference in expression of p53 between old patients and control group (P=0.293).Conclusions There are higher expressions of Pgp, GSTπ and lower expression of TopoⅡα in old patients with gastrointestinal carcinoma, which is relevant to their clinicopathological features of high well differentiated adenocarcinoma and colorectal cancer ratios.

　　【Key words】 Gastrointestinal carcinomas; Multidrugs resistance(MDR); Elderly

　　业已证实消化道肿瘤有多种多药耐药相关因子的表达，由此引起的多药耐药性(MDR)表型是内在性或获得性耐药的标志，并是导致化疗失败的关键因素。老年消化道肿瘤具有分化程度高、预后相对较好等临床病理特点，而有关多种耐药相关因子在老年消化道肿瘤中表达的研究尚未见报道。为此，本文对老年消化道肿瘤中p53、P糖蛋白(Pgp)、谷胱甘肽S转移酶(GSTπ)和DNA拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)的表达及其临床意义进行初步研究。

　　1 材料与方法

　　1.1 临床资料 2006年10月～2007年5月在本科住院手术并经病理证实的老年消化道肿瘤患者33例(≥60岁)，术前均未接受治疗。其中胃癌11例，大肠癌22例。男21例，女12例，年龄60～80岁，中位年龄68.4岁。高中分化腺癌22例，低未分化癌11例。依国际胃癌、大肠癌(UICC，1997)TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期14例，Ⅲ～Ⅳ期19例。取同期于本科住院手术并经病理证实的<60岁消化道肿瘤患者35例作为对照组。

　　1.2 方法 ①鼠抗人p53(D07)、Pgp、GSTπ和TopoⅡα单克隆抗体及免疫组化试剂盒均购自北京中杉生物技术公司，采用SP法分别对肿瘤组织进行上述指标免疫组化染色。严格按试剂盒说明书进行操作。②结果由两位病理医师双盲法对切片进行观察，每张切片随机取5个(×400)高倍视野，每视野计数100个细胞。Pgp和GSTπ为细胞膜及(或)胞质、p53和TopoⅡα为胞核呈棕黄色着染为染色阳性。按着染细胞数量分为：“-”阳性细胞数<25%;“+”阳性细胞数25%～50%;“”阳性细胞数51%～75%和“”阳性细胞数≥76%。

　　1.3 统计学处理 应用SPSS13.0软件进行χ2和秩和检验。

　　2 结 果

　　2.1 老年消化道肿瘤多药耐药相关因子表达的情况 老年组Pgp、GSTπ表达明显高于对照组(P=0.023、P=0.033);p53在两组间差异不显著(P=0.293)，而TopoⅡα表达则低于对照组(P=0.032)。见表1。 表1 老年消化道肿瘤多药耐药相关因子表达情况

　　2.2 老年消化道肿瘤的临床病理特点 老年组患者在性别、肿瘤直径及临床分期等方面与对照组差异不显著(均P>0.05)。老年组高中分化腺癌患者比例明显高于对照组(P<0.01);老年组以大肠癌患者为主，而对照组以胃癌患者为主，两组差异显著(P<0.01)。见表2。表2 老年消化道肿瘤的临床病理特点

　　3 讨 论

　　胃癌、大肠癌组织中多药耐药相关因子Pgp、GSTπ过度表达及TopoⅡα含量/活性下降可导致肿瘤细胞MDR产生;同时p53突变蛋白通过对MDR相关因子表达的调节，及在化疗药物作用靶点后抑制药物诱导的细胞凋亡参与了肿瘤的MDR〔1，2〕。肿瘤的MDR与部分肿瘤生物学特性有关。对老年消化道肿瘤而言，明确其临床病理特征及其是否表现MDR方面的特点，对指导老年消化道肿瘤的化疗具有重要意义。

　　肿瘤的MDR和化疗效果与多种耐药相关因子表达有关。本研究表明，老年组消化道肿瘤Pgp、GSTπ表达较对照组明显增高，具有较强的耐药性倾向。Pgp可将许多MDR相关类药物从细胞内泵出细胞外，导致肿瘤细胞内化疗药物浓度降低而产生肿瘤耐药。GSTπ具有细胞解毒作用，可降低多种抗肿瘤药物毒性，其表达越强，抗肿瘤药物毒性降低越明显，肿瘤细胞耐药性也就越强〔3〕。本研究中老年消化道肿瘤p53表达与对照组比较变化不明显，与文献报道结果一致〔4〕。

　　有研究表明，低分化及黏液腺癌对化疗药物具有更强的耐药性、临床化疗效果不佳〔5，6〕。结肠癌细胞表达MDR1mRNA及Pgp更强〔1〕;高中分化型胃癌、大肠癌表达较高的Pgp及MRP而具有更强的耐药性〔7〕。Tokunaga证实〔8〕，Pgp表达与大肠癌分化程度有明显相关性。本研究进一步分析了老年消化道肿瘤的临床病理特点，发现老年消化道肿瘤具有分化程度较高、大肠癌多于胃癌等特点，与文献报道一致〔9，10〕;同时老年组TopoⅡα表达明显低于对照组，而Liu 等研究表明〔11〕，TopoⅡα表达与肿瘤分化程度呈负相关，分化程度越高，阳性表达越低;而低分化肿瘤细胞增殖较快，S期和G2/M期细胞多，故阳性表达率高。因此，本研究表明老年消化道肿瘤分化程度高、大肠癌较多的特点可对Pgp、GSTπ高表达、TopoⅡα低表达的特点进行部分解释，其意义在于老年人消化道肿瘤分化程度高，造成一些耐药相关蛋白表达与其他年龄组不同，临床上对老年患者的化疗应根据这一特点进行相应关注与调整。

　　本研究虽初步证实了老年消化道肿瘤在MDR中有自己的特点，并对这些特点进行了解释，但因本研究样本量较小，且由于肿瘤MDR涉及耐药基因复杂的调节网络，细胞周期相关蛋白、蛋白激酶、细胞凋亡相关因子等也同时参与MDR表型，因此，进一步深入研究老年消化道肿瘤的MDR特点对指导个体化治疗具有重要临床意义。

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