环氧化酶-2和基质金属蛋白酶-2在胃癌中的表达及意义

　　作者：史凡　　作者单位：上海市第六人民医院金山分院消化内科， 上海

　　【关键词】 胃癌,环氧化酶-2,基质金属蛋白酶-2; 免疫组织化学

　　胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一，其最具特征性的生物学行为是肿瘤对组织的浸润和转移，癌细胞的侵袭转移是影响胃癌患者预后的重要因素。肿瘤细胞获得浸润、转移至临近组织及远处器官的能力是一个复杂的过程，近年来的研究表明[1-3]，环氧化酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2)和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2，MMP-2)在肿瘤的侵袭和转移过程中起着非常重要的作用。本研究用免疫组织化学方法检测COX-2、MMP-2在胃癌中的表达情况，结合临床资料探讨两者与胃癌侵袭转移的关系。

　　1　对象与方法

　　1.1　病　例

　　收集我院2007年1月～2010年1月手术切除的胃癌根治标本107例，其中男62例，女45例。胃癌患者术前未进行化疗或放疗，未应用非甾体类抗炎药，并排除了胃癌家族史及胃癌术后复发者。手术过程中记录肿瘤的部位、大小、分化程度、浆膜受侵犯及器官转移情况，按国际抗癌联盟(UICC)关于胃癌TNM分期法进行临床分期，其中Ⅰ、Ⅱ期42例，Ⅲ、Ⅳ期65例。按WHO分型标准进行组织学分型，107例胃癌组织均为腺癌，其中高中分化腺癌64例，低分化腺癌43例。肿瘤浸润未及浆膜层者37例，浸润超过浆膜层者70例。有淋巴结转移者75例，无淋巴结转移者32例。全部标本经10%甲醛固定，常规石蜡包埋，4 μm连续切片，HE染色和免疫组化S-P方法染色。

　　1.2　主要试剂和方法

　　COX-2、MMP-2单克隆抗体，S-P试剂盒，DAB-酶底物显色试剂购自福州迈新生物技术开发公司，严格按照说明书进行操作。用PBS代替一抗作阴性对照，以已知阳性标本作阳性对照。

　　1.3　结果判断

　　在光学显微镜下，每例切片随机选择5个高倍视野，每个视野计数100个细胞，计算COX-2、MMP-2阳性细胞百分率，>25%为阳性(+)，<25%为阴性(-)。

　　1.4　统计学处理

　　应用STATA8.0统计软件进行数据处理，COX-2、MMP-2在胃癌组织中的表达与临床病理参数的关系用χ2检验， COX-2与MMP-2表达的关系采用Spearman等级相关性分析。P<0.05为差异有统计学意义。

　　2　结　果

　　2.1　COX-2、MMP-2在胃癌组织中的表达

　　免疫组化染色结果显示，COX-2、MMP-2阳性表达均定位于胃癌细胞质内，胞质中出现明显的棕黄色或深黄色颗粒。肿瘤细胞呈腺样、条索样结构排列，或散在分布(图1)。

　　2.2　胃癌组织中COX-2、MMP-2的表达与临床病理的关系

　　临床分期、浸润深度不同，COX-2阳性表达率的差异有统计学意义(P<0.05)，淋巴结转移组COX-2的阳性率较无淋巴结转移组高，但差异无统计学意义。提示COX-2阳性患者浸润深度更深，临床分期更晚。此外，COX-2阳性表达与性别、年龄、肿瘤大小、分化程度无关(P>0.05)。MMP-2阳性表达在不同的临床分期、浸润深度之间比较，差异有统计学意义(P<0.05)，有淋巴结转移和无转移组间比较，差异有统计学意义(P<0.05)，提示MMP-2阳性患者浸润深度更深，临床分期更晚，淋巴结转移更常见。MMP-2阳性表达与性别、年龄、肿瘤大小、分化程度无关(P>0.05)。见表1。

　　2.3　COX-2 、MMP-2在胃癌中表达的相互关系

　　COX-2、MMP-2在胃癌中表达的相互关系见表2。由表中可见，Spearman相关分析r=0.218，P=0.024，表明COX-2、MMP-2在胃癌中的表达呈正相关。表1　胃癌组织COX-2 、MMP-2的表达与临床病理参数之间的关系

　　3　讨　论

　　环氧化酶(COX)是前列腺素合成过程中的限速酶，它将花生四烯酸代谢成各种前列腺素产物，后者参与维持机体的各种生理和病理功能。COX主要有同工酶COX-1和COX-2。COX-1在多种组织和细胞中均有表达，参与维持机体正常的生理功能，而COX-2是一种诱导型酶，在静息状态下不表达，只有在细胞因子、内毒素、白介素、致癌物质等刺激下才能在某些细胞内迅速产生。COX-2可在人的大肠癌、胃癌、食管癌、宫颈癌和乳腺癌等多种肿瘤中高表达，尤其与消化道肿瘤的发生发展关系密切。COX-2与炎症和肿瘤的发生、发展有密切关系，并且可作为预防、治疗炎症和肿瘤的靶分子，因而具有重要的临床意义。

　　本研究结果显示，胃癌中COX-2阳性组淋巴结转移率较无淋巴结转移组高，且与肿瘤浸润深度、临床分期明显相关，而与年龄、性别、分化程度及肿瘤大小无关，这与文献报道[4-5]的结论一致，提示COX-2过表达可增强胃癌的浸润和淋巴转移，对胃癌侵袭、转移状况的判断与治疗方案的选择具有较大的潜在价值，选择性应用COX-2抑制剂可以预防胃癌的发生。COX-2抑制剂可抑制多种肿瘤的生长和转移[6]。有报道已把COX-2作为肿瘤化学预防和治疗的靶点，在许多肿瘤组织中，COX-2的mRNA及蛋白均呈一致高表达，而且非甾体类抗炎药物通过抑制COX-2表达，具有防御肿瘤的作用[7]。表2　COX-2、MMP-2在胃癌中表达的相互关系

　　本研究结果显示，胃癌组织中MMP-2阳性组淋巴结转移的发生率明显高于阴性组，且与肿瘤浸润深度、临床分期明显相关，与徐腾云等[10]的研究结论一致。

　　有研究表明，肿瘤组织中高表达的COX-2蛋白可增强MMP-2蛋白的活性，使膜金属蛋白酶的表达增加，并上调肿瘤相关血管因子的表达，促进肿瘤血管的形成，有利于肿瘤侵袭和淋巴结发生转移。因此，当两者表达均为阳性时，胃癌进展更快，淋巴转移更易发生。

　　综上所述，COX-2 和MMP-2在胃癌中均有高表达，此种高表达与胃癌的发展和转移有密切联系，为临床有效的胃癌治疗方案提供了可能的理论依据。本研究提示，在临床上应用COX-2和(或)MMP-2抑制剂，可减缓胃癌的进展，减少胃癌转移进程。

　　【参考文献】

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　　[10]　徐腾云，王晓秋，胡冰，等. 胃癌组织Cox-2和MMP-2与MMP-9蛋白表达及其临床意义的研究[J].中华肿瘤防治杂志，2008,15(13)：1003-1006.