Fas在慢性丙型肝炎肝组织中的表达

　　作者：王宏伟,马志蛟　　作者单位：新乡医学院第一附属医院感染疾病科，河南 卫辉 453100;南阳市第一人民医院消化内科，河南 南阳 473000

　　【摘要】目的 通过检测慢性丙型肝炎患者肝组织Fas的表达，探讨Fas-FasL系统在慢性丙型肝炎发病机制中的作用及其临床意义。方法 50例慢性丙型肝炎患者肝脏穿刺取肝组织做病理活检。免疫组织化学法检测肝组织中Fas的表达，分析肝组织中Fas表达与肝组织炎症、纤维化及临床分型间的关系。结果 慢性丙型肝炎患者肝组织细胞中Fas表达随着肝脏炎症活动度和肝纤维化程度加重而增加(P<0.05)，随着临床病情的加重而增加(P<0.05)。结论 Fas-FasL系统与慢性丙型肝炎患者肝组织的炎症和纤维化有关，Fas-FasL系统介导的肝细胞凋亡可能是慢性丙型肝炎发病机制之一。

　　【关键词】 慢性丙型肝炎,Fas;肝组织

　　Abstract: Objective To study the expression of Fas antigen(Fas) in hepatic tissues of patients with chronic C hepatitis (CCH) and to investigate the role of Fas in CCH pathogenesis.Methods Hepatic tissues of 50 CCH patients were gained by puncturation and then treated by pathologic biopsy.The expressions of Fas in the liver biopsy specimens were determined by immunohistochemistry.The relatinships between the expressions of Fas and inflammation,fibrosis,and clinical classification in hepatic tissues were analyzed.Results The extent of Fas expression was positively correlated with the extent of inflammation,fibrosis of hepatic tissues(P<0.05),and aggravation of patient′s condition(P<0.05)，respectively.Conclusion The expressions of Fas in hepatic tissue are correlated to hepatic inflammation and fibrosis in patients with CCH.Hepatic apoptosis induced by Fas-FasL system may be an important pathologenesy of CCH.

　　Key words: chronic C hepatitis;Fas;hepatic tissue

　　丙型肝炎的发病主要与机体的免疫反应有关[1-2]。肝细胞的凋亡与慢性丙型肝炎的发病密切相关。Fas抗原是介导细胞凋亡的因素，作者通过肝脏穿刺检测肝组织Fas表达，探讨其与慢性丙型肝炎患者肝组织炎症和纤维化的关系，以及Fas-FasL系统在慢性丙型肝炎发病机制中的作用及其临床意义。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料

　　随机选择2002年5月至2006年12月在新乡医学院第一附属医院住院确诊的慢性丙型肝炎患者50例，诊断均符合2000年(西安)第6次全国传染病和寄生虫病学学术会议修订的病毒性肝炎的诊断标准[3]。男38例，女12例，年龄18～54岁，平均(37.2±10.1)岁，所有病例抗HCV阳性，病程1～12 a，临床分型[3]：慢性轻度16例，慢性中度24例，慢性重度10例。

　　1.2 Fas-FasL表达的检测

　　所有患者均在超声介导下肝穿刺获得肝组织，经体积分数10%福尔马林固定，石蜡包埋，采用免疫组织化学SP法。兔抗Fas单克隆抗体及免疫组织化学时应用的正常羊血清、二抗(羊抗多价生物素)、辣根酶标记链霉卵白素试剂，均购自北京中山公司。兔抗Fas单克隆抗体工作稀释滴度1100。按试剂盒说明进行染色，DAB显色，苏木素复染，呈棕黄色颗粒。结果判断：(-)为20=l，基本无表达;(+)为21=2，Fas阳性细胞个别散在分布于病灶区;(++)为22=4，Fas阳性细胞三五成群聚集于病灶区;(+++)为23=8，Fas阳性细胞呈弥漫性分布。每张切片选取不重复的6个视野积分后计算平均值，即为这张切片Fas阳性细胞定量结果。

　　1.3 肝组织炎症活动度分级(G)和纤维化程度分期(S)标准

　　参照2000年(西安)第6次全国传染病和寄生虫病学学术会议修订的病毒性肝炎的诊断标准[3]。

　　1.4 统计学处理

　　用SPSS 10.0软件分析，数据以均数±标准差(x±s)表示，组间差异性比较采用方差分析。

　　2 结果

　　2.1 Fas表达与肝组织炎症关系

　　Fas在肝细胞膜及胞浆均有不同程度表达。其表达主要位于汇管区小叶内;汇管区周边碎屑状、桥形及灶状坏死区内亦有Fas表达。慢性丙型肝炎患者G1期11例，G2期17例，G3期12例，G4期10例。G1、G2、G3、G4期Fas阳性细胞数分别为：1.53±0.48、3.26±0.87、5.12±1.03、6.75±1.12。方差分析(LSD法)显示G2、G3、G4期慢性丙型肝炎肝组织Fas阳性细胞数高于G1期(P<0.05)，G3、G4期高于G2期(P<0.05)，G4期高于G3期(P<0.05)。Fas阳性细胞数随着肝脏炎症活动度的加重而增加。

　　2.2 Fas表达与肝组织纤维化关系

　　慢性丙型肝炎患者S1期9例，S2期19例，S3期14例，S4期8例。S1、S2、S3、S4期Fas阳性细胞数分别为：1.32±0.37、3.15±0.64、4.92±0.83、6.28±0.92。方差分析(LSD法)显示S2、S3、S4期慢性丙型肝炎肝组织Fas阳性细胞数高于S1期(P<0.05)，S3、S4期高于S2期(P<0.05)，S4期高于S3期(P<0.05)。Fas阳性细胞数随着肝脏纤维化程度分期的增加而增多。

　　2.3 Fas表达与慢性丙型肝炎临床分型的关系

　　慢性丙型肝炎患者临床分型中，慢性轻度组、慢性中度组、慢性重度组Fas阳性细胞数分别为：1.68±0.56、3.42±0.98、5.75±1.32。方差分析(LSD法)显示慢性中度、重度肝炎组Fas阳性细胞数高于慢性轻度肝炎组(P<0.05)，慢性重度肝炎组高于慢性中度肝炎组(P<0.05)。

　　3 讨论

　　Fas-FasL被认为是介导细胞凋亡的一对跨膜蛋白。用Fas抗体或自然存在的FasL(Fas在体内的天然配体)作用后，表达Fas的细胞可在数小时内凋亡[4]。正常肝细胞上无Fas表达，病毒性肝炎时，受染的肝细胞膜上的病毒抗原可诱导肝细胞表达Fas，浸润的细胞毒性淋巴细胞上的FasL与肝细胞膜上的Fas特异性结合，导致肝细胞凋亡，这是宿主清除受染的细胞、防御病毒感染的一种特殊机制[5]。Fas -FasL介导的细胞凋亡过度表达在病毒性肝炎的发病机制中可能具有重要作用[6]。

　　本研究结果显示，Fas在肝细胞膜及胞浆均有不同程度表达。其表达阳性细胞主要位于汇管区小叶内，汇管区周边碎屑状、桥样及灶状坏死区内亦有明显的FasL表达。Fas阳性细胞数随着肝脏炎症活动度的加重而增加，且随着肝脏纤维化程度分期的增加而增多。提示肝组织炎症与Fas表达有关，Fas-FasL介导的细胞凋亡可能参与了慢性丙型肝炎的病理过程，Fas在肝组织中的过度表达是引起肝细胞炎症坏死和肝纤维化的机制之一[7-9]。

　　本研究结果亦显示慢性丙型肝炎患者肝组织细胞中Fas表达阳性率明显增高，其中慢性中度、重度肝炎组显著高于轻度肝炎组，慢性重度肝炎组高于中度肝炎组，提示Fas在肝组织的表达程度与慢性丙型肝炎的临床分型相关，随着临床病情的加重而增加。

　　综上所述，肝组织细胞中Fas表达随着肝脏炎症活动度和肝纤维化进展程度加重而增加，与慢性丙型肝炎的临床分型相关，Fas -FasL介导的细胞凋亡过度表达可能在慢性丙型肝炎的发病机制中具有重要作用。

　　【参考文献】

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