慢性胃炎、异型增生、胃癌幽门螺杆菌感染与iNOS表达关系的研究

　　作者：于永强 沈金库 高会斌 齐维娟 孙剑经 薄爱华 作者单位：(1.河北北方学院附属第一医院消化内科, 河北 张家口 075000;2.河北北方学院实验中心, 河北 张家口 075000)

　　【摘要】 目的: 探讨慢性胃炎、异型增生、胃癌幽门螺杆菌(HP)感染与诱导型NO合酶(iNOS)表达的关系。方法: 选取我院2002～2005年胃粘膜组织标本124例，同时采集血清。其中慢性胃炎(Ⅰ组 )58例，异型增生(Ⅱ组) 41例，胃癌(Ⅲ组 )25例。各组均采用酶联免疫法及免疫组化法检测HP抗体和iNOS表达水平。结果: iNOS的表达随胃粘膜病变的进展逐级增高，且HP阳性者iNOS表达高于HP阴性者(P<0.05)。结论: iNOS可能参与了HP感染引起的胃粘膜癌变过程并发挥了重要作用。

　　【关键词】 慢性胃炎; 异型增生; 胃癌; 幽门螺杆菌; iNOS

　　基金项目：张家口科学技术研究与发展指导计划项目(编号：040222)

　　Study on the Relationship between HP Infection and Expression of

　　iNOS in Gastric Carcinoma，Gastric Epithelial Dysplasia

　　and Inflammatory Gastric Musosa

　　YU Yongqiang，SHEN Jinku,GAO Huibin，et al

　　1.Department of Gastroenterology，The First Affiliated Hospital,Hebei North University,Zhangjiakou,

　　075000,Hebei,China;2.Experimental Center, Hebei North University,Zhangjiakou,075000,Hebei,China

　　【ABSTRACT】 Objective：To investigate the expression of iNos in different gastric mucosa lesion and its relationship with the infection of HP. Methods：The total gastric tissues and the corresponding blood serum had been collected from 124 cases, including 58 cases with inflammatory gastric mucosa(group Ⅰ)，41 cases with gastric epithelial dysplasia(group Ⅱ) and 25 cases with gastric carcinoma(group Ⅲ). In all cases，Immunohistochemical streptavidin/peroxidase (SP) method and ELISA were used to detect the expression of iNos and the HP antibody in blood serum respectively. Results：The expression of iNos increased along with the progression of gastric neoplasia. In HP positive group, the expression of iNos was higher than that in HP negative group(P<0.05). Conclusion：The expression of iNos might participate in the process of gastric carcinogenesis coursed by HP infection and play an important role.

　　【KEY WORDS】 Inflammatory gastric mucosa;Gastric epithelial dysplasia;Gastric cancer;HP;iNOS

　　幽门螺杆菌(HP)与多种胃肠疾病的发生有关，是世界卫生组织确认的致癌高危因素，但其确切的致病机理目前尚不十分清楚。近几年来，人们注意到HP感染所造成的炎症反应可刺激诱导型NO合酶(iNOS)产生大量的NO。NO不仅能介导DNA损伤，且可直接损伤DNA，诱导细胞凋亡在胃癌的启动、促进和进展中起重要的作用。本研究旨在观察慢性胃炎、异型增生、胃癌组织HP感染状态下iNOS的变化，探讨NO、HP在致病过程中的作用。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料 我院2002～2005年124例胃组织及血清标本，经内镜及病理诊断的慢性胃炎58例(Ⅰ组)，异型增生41例(Ⅱ组)，胃癌25例(Ⅲ组)。

　　1.2 主要试剂 美国Santa Craz公司生产抗iNOS多抗。北京中山生物公司提供, 美国美利泰格公司生产HP抗体检测试剂盒。

　　1.3 方法

　　1.3.1 HP抗体检测 所有各组均采静脉血2mL,离心取血清。应用酶联免疫扩散方法按照试剂盒说明检测血清HP抗体，依据HP抗体检测结果分为两组。HP抗体阳性组，HP抗体阴性组。

　　1.3.2 免疫组化法 染色程序按SP法操作常规进行，对iNOS抗原进行微波修复。在同一条件下以PBS代替I抗为阴性对照，以已知iNOS阳性组织为阳性对照。结果判定：iNOS阳性为细胞浆着棕黄色细颗粒。

　　1.4 统计学方法 采用χ2检验进行统计学处理。

　　2 结果

　　2.1 不同胃粘膜HP检出率 慢性胃炎(Ⅰ组)HP的阳性率(70.7%), 异型增生(Ⅱ组)HP阳性率(75.6%), 胃癌(Ⅲ组)HP阳性率(76.0%)见表1。

　　2.2 iNOS的表达与HP感染的关系 从慢性胃炎到异型增生、胃癌，iNOS的表达逐渐升高，且每一组中HP(+)者的iNOS表达阳性率显著高于HP(-)者(P<0.05),见表1。2007年8月于永强等：慢性胃炎、异型增生、胃癌幽门螺杆菌感染与iNOS表达关系的研究

　　3 讨论

　　自从上世界80年代以来，HP在胃肠疾病的发生中所起的作用被人们逐渐认识，特别是其与胃癌的发生有密切的关系。从胃炎、异型增生到胃癌的演变过程是胃癌发生的基本规律，而HP感染在这一过程中起着重要的作用[1，2]。一氧化氮(NO)是由一氧化氮合酶(NOS)催化生成的，近年来研究发现过量的NO可引起DNA损害，从而促进基因突变和肿瘤的发生。已有研究表明HP感染可引起胃粘膜iNOS表达明显增加，血清NO水平增高[3，4]。

　　本实验结果表明：从慢性胃炎、异型增生到胃癌胃粘膜组织中HP感染阳性率依次增高，三组之间比较无显著差异，表明HP感染与慢性胃炎，异行增生，胃癌的发生都有密切关系，且各组中iNOS的表达阳性率与HP感染的阳性率也协调同步增高，成正相关。各组中HP(+)的iNOS表达率明显高于HP(-)，两者比较有显著差异(P<0.05)，表明在HP感染状态下，胃粘膜的iNOS活性增高，NO合成增加。而NO作为一种自由基不仅能介导DNA损伤，而且可直接损伤细胞DNA,诱导细胞凋亡促进胃癌的发生,这说明NO可能作为一种损伤因子与HP一起共同参与胃粘膜的损伤过程[5]。通过对HP感染与iNOS表达上调之间关系的进一步研究可能会为临床对胃癌的早期诊断治疗提供新的思路与方法。

　　【参考文献】

　　1 Chan AO,Luk JM,Hui WM,et al.Molecular biology of gastric carcinoma：from laboratory to bedside[J].J Gastroenterol Hepatol,1999,14:11501160

　　2 胡伏莲，周殿元.幽门螺杆菌感染胃黏膜基因表达和细胞生物学行为[J].中华消化杂志，2001，21(1)：1821

　　3 张洪，张振科，赵志鹏,等.胃幽门螺杆菌与胃黏膜一氧化氮合酶表达的意义[J].中国航天医药杂志,2002，4(2)：1720

　　4 尹春华，张万岱，曾锦章,等.幽门螺杆菌感染者血清一氧化氮水平及胃黏膜细胞凋亡的变化[J].中西医结合脾胃杂志,2002，8(4)：219220

　　5 周小江，谢勇，吕农华,等.幽门螺杆菌感染与环氧化酶—2 诱导型一氧化氮合酶表达关系的研究[J]. 中国实用内科杂志,2006，26(24)：19611964