超声诊断SD大鼠非酒精性脂肪肝的价值

　　作者：吕瑛，李运红，徐肇敏 作者单位：南京大学附属鼓楼医院消化科，江苏南京 210008

　　【摘要】 目的 评价超声诊断非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver, NAFL)的价值。方法 48只SD大鼠随机分成正常对照组(6只)和高脂饮食组(42只)，正常对照组饲养8周;高脂饮食组分为7组，每组6只，每隔2周处死1组，处死后观察肝组织学改变，处死前1d行超声检查。结果 超声对脂肪肝阳性诊断准确率是78.2%，其中轻度脂肪肝诊断准确率约为70%,中度脂肪肝诊断准确率为90%。结论 超声是诊断脂肪肝的首选方法。

　　【关键词】 超声;诊断;脂肪肝;大鼠

　　基金项目：江苏省自然科学基金资助项目(BK2003009)

　　The value of ultrasonography in diagnosing　SD rats with nonalcoholic fatty liver

　　Lü Ying, Li Yunhong, Xu Zhaomin

　　Department of Gastroenterology, Affiliated Gulou Hospital ofNanjing University, Nanjing 210008, China

　　ABSTRACT: Objective To evaluate the value of ultrasonography in diagnosing nonalcoholic fatty liver. Methods Totally 48 male SD rats were randomly allocated into control group (n=6) fed with standard diet for 8 weeks and model group (n=42) induced by highfat diet. The model group was divided into 7 groups, one group of them were sacrificed every two weeks, and liver histology was observed. The rats were examined by ultrasonography on the day before they were killed. Results The accuracy of ultrasonography for diagnosing fatty liver was 78.2%. The accuracy in diagnosing mild and moderate fatty liver was 70% and 90%, respectively. Conclusion Ultrasonography is the first choice in diagnosing fatty liver.

　　KEY WORDS: ultrasonography; diagnosis; fatty liver; rat

　　随着生活水平提高，饮食结构与生活方式的改变，脂肪肝的患病率逐年升高，非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)是代谢综合征的组成部分，已成为普遍关注的医学和社会问题[12]。因此，对脂肪肝作出正确判断非常重要。脂肪肝诊断的金标准方法是肝穿刺活组织检查，因其有创伤性，很难作为临床和筛查的有效方法。而体表超声的优点是无创伤、简便，但存在主观性及不准确性[3]，而且漏诊率约为33%[4]。本研究对SD大鼠进行体表超声检查及病理学检查，并加以比较，观察体表超声对NAFL的诊断价值。

　　1 材料与方法

　　1.1 建立大鼠非酒精性脂肪肝模型

　　健康成熟的SD雄性大鼠共48只，体重143-187g。所有SD大鼠适应性饲养2周后，随机分成8组，每组6只。其中1组为对照组，用基础饲料喂养8周;其余7组为高脂饮食组，用高脂饲料(在基础饲料上加100g/L猪油和20g/L的胆固醇)喂养。实验动物自由饮水和进食，高脂饮食组每隔2周隔夜空腹处死1组，对照组喂养8周后处死。

　　1.2 每组大鼠处死前一天进行肝脏体表超声

　　受检测大鼠经乙醚麻醉后取仰卧位，固定四肢;腹部皮肤涂耦合剂;肋间横切面分别测量大鼠的肝左叶厚度及左叶长度。整个过程由同一位有经验的超声医师进行检查。

　　1.3 肝脏组织病理观察

　　大鼠于B超检查当夜禁食，次日空腹处死。大鼠经乙醚麻醉后，取出肝脏称量质量。其后甲醛固定，常规石腊包埋制片，HE染色，光镜观察。标本由同一位有经验的病理科医师对肝脏脂肪病变程度作出单盲判断。

　　1.4 实验仪器

　　ATLHDI5000彩色超声诊断仪，探头型号为L512,探头频率为10MHz。超声耦合剂采用美国Aquasonic100耦合剂。

　　1.5 B超诊断脂肪肝标准

　　采用参考文献[5]的标准[5]：①肝区近场弥漫性点状高回声，回声强度高于脾脏和肾脏，少数表现为灶性高回声;②远场回声衰减，光点稀疏;③肝内管道结构显示不清;④肝脏可轻至中度肿大，肝前缘变钝。

　　1.6 脂肪肝的病理学诊断标准

　　根据肝小叶内脂肪细胞占肝细胞总数的比值分为0，<1/3，1/3-2/3，>2/3将肝细胞脂肪变性分为(-)()4级，达到()或以上诊断为脂肪肝[6]。

　　2 结 果

　　2.1 肝脏病理学观察

　　实验结束前，高脂饮食组死亡5只。肝脏大体观察，高脂饮食组大鼠喂养4周后肝脏体积即增大，外形饱满，色泽灰黄，切面油腻;光镜观察HE染色切片显示造模6周后肝脏即有脂肪病变，可见不同程度的混合性肝细胞脂肪变;高脂饮食喂养8周时，大鼠肝脏已达到轻度脂肪肝;随着喂养时间延长，脂肪变程度加重，有部分出现汇管区炎症及小叶内炎症。

　　2.2 常规超声检查

　　发现正常肝脏实质回声稍低，分布均匀，可见稀疏散在、短小线状回声。脂肪肝肝脏前方回声密集增强，后方回声衰减，肝内管道走行不清。病理学检查发现高脂饮食喂养6周的大鼠已有小部分出现轻度脂肪肝改变，而B超下可见高脂饮食喂养8周时部分大鼠出现脂肪肝声像图。

　　2.3 肝脏病理和常规超声检查结果比较

　　见表1。正常肝脏的超声及病理结果见图1、图2;高脂饮食喂养8周时B超诊断为正常肝脏(图3);同一大鼠肝脏病理标本可见有1/3以上肝细胞脂肪病变(图4);高脂饮食喂养14周的大鼠超声诊断为脂肪肝(图5);同一只大鼠肝脏病理标本可见有2/3以上肝细胞脂肪病变(图6)。表1 肝脏病理和常规超声检查结果(略)

　　B超与病理学诊断比较，B超对脂肪肝阴性诊断的特异度为100%,对脂肪肝阳性诊断的灵敏度为78.3%(18/23)，漏诊率为21.7%(5/23)，与文献资料所述超声可漏诊1/3的NAFL患者相近[4]。经卡方检验，P=0.063，说明B超与病理学诊断结果的差异没有统计学意义。

　　3 讨 论

　　NAFLD是一种无过量饮酒史，以肝实质细胞脂肪变性和脂肪蓄积为特征的临床病理综合征。近年来发病率逐年上升，在总人群中，NAFLD的发病率约为20%，是一种全球性的疾病[7]，可发生于任何年龄，包括儿童。随病程的进展其表现不一，包括单纯性脂肪肝、脂肪肝炎、脂肪性肝纤维化和肝硬化，部分有癌变[8]。由于脂肪肝患者多数无自觉症状，因此，早期、正确诊断NAFL十分重要。

　　目前，临床上NAFL公认的最可靠的诊断依据是肝穿刺活检，但因其有创伤性及一定风险而不易被患者接受。因此，影像学检查如CT和B超是临床上常用的诊断方法[9]。脂肪肝在超声诊断中的特征是由于脂肪肝病人肝细胞内脂肪沉积，对超声波能量吸收明显，并产生散射作用，声能主要为肝的前场所吸收，后场发生明显衰减，即形成所谓的“亮肝”。刘云霞等对2002年11月以前发表的脂肪肝影像学诊断试验研究进行系统性评价[10]，认为增强CT对脂肪肝的定量诊断价值优于定性诊断，难以区分轻度脂肪肝和正常脂肪肝;而B超诊断脂肪肝的灵敏度、特异度均较高，且成本-效果-安全性比高，所以B超可作为诊断和筛选脂肪肝的有效方法。本实验通过对SD大鼠进行B超及肝脏病理学检查比较，超声对脂肪肝阴性诊断准确率为100%。因此，超声不会导致脂肪肝的过诊断;B超对脂肪肝的阳性诊断准确率为78.3%，其中对轻度脂肪肝诊断准确率约为70%，对中度脂肪肝诊断准确率为90%。轻度脂肪肝细胞内脂肪滴少,声波反射稍增多而穿透、绕射稍减少,声像图表现近场回声稍增强,远场衰减不明显。中重度脂肪肝细胞内脂肪滴多,声波反射多而穿透、绕射很少,声像图表现近场回声增强,远场明显衰减。因此，对中度以上的脂肪肝超声诊断准确率高。

　　本实验中B超对脂肪肝的诊断漏诊率为21.7%。由于常规超声显像技术只能定性，不能定量，不同的检查者判断的差异性较大，相对客观性较差，影响准确性。提高超声的诊断率是超声专业医师所面临的一项重要课题，国内林江莉等对脂肪肝B超图像特征提取研究[11]，认为近远场平均灰度比特征等对脂肪肝B超图象有着较好的描述能力。近年来出现一项新技术——超声组织定征，原理是利用超声组织定征中射频信号的背向散射积分值来诊断脂肪肝[12]，是声学密度测定技术与超声技术的有机结合，将该技术用于均匀性脂肪肝的诊断，能为临床提供一项数字定量化、标准化的新指标，提高超声诊断率。

　　总之，B超诊断脂肪肝尤其对中重度脂肪肝有经济、准确、迅速、无创等优点，可作为诊断脂肪肝的首选方法。同时，应结合其它学科的新技术提高超声诊断率，以利于脂肪肝的早期诊断、早期治疗。

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