自体肿瘤疫苗治疗结直肠癌72例分析
发表时间：2010-01-27 浏览次数：588次
自体肿瘤疫苗治疗结直肠癌72例分析作者：李增鹏 肖华亮 甘岫云 杜娟 王东 作者单位：1 400042 重庆，第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤诊治中心； 2 510095 广州市肿瘤医院病理科 【关键词】 结直肠癌 自体肿瘤疫苗 近年来自体肿瘤疫苗主动特异性免疫治疗已成为预防和治疗恶性肿瘤复发和转移的一种新的有效手段［1］。自1996年开展该项目以来，我们已成功应用该技术治疗各类恶性肿瘤共381例，其中结直肠癌72例，现报告如下。1 资料和方法 1.1 一般资料 1996-1999年大坪医院行结直肠癌根治性切除的患者共198例。治疗组72例加用了自体肿瘤疫苗治疗，男性47例，女性25例，年龄41～65岁，平均53.5岁，其中高、中及低分化腺癌各为19、31及22例。单纯手术组126例仅行常规治疗。 1.2 自体肿瘤疫苗的制备 将切除的肿瘤标本放入含50 μg/ml庆大霉素的生理盐水中，无菌条件下快速送至实验室。标本经充分洗涤后在超净台内去除坏死组织、脂肪和正常组织，以手术刀片或剪刀切碎至<1 mm3后，放入含有胶原酶、透明质酸酶和DNA酶的混合液中，37 ℃下消化2 h，梯度离心后收集肿瘤细胞，以Hank's液洗 3次。台盼蓝排斥试验,活细胞>80%，细胞浓度2×107/ml。加福氏佐剂，制成自体肿瘤疫苗并分装。 1.3 免疫程序 手术后第5天开始用肿瘤疫苗治疗。整个疗程分5次接种，每次间隔2～3 d，每次接种4个部位，即双侧腹股沟淋巴结和双侧腋窝淋巴结区域。 1.4 淋巴细胞功能实验 主动免疫治疗前3 d，5次免疫治疗后1周，分别采集患者血清，检测血清中IL2、IFNγ水平。IFNγ及IL2 ELISA试剂盒由美国Genezyme公司提供。结果判定：每个血清标本的A(OD)值减去对照孔的A值为绝对值，根据A值计算标本的IL2、IFNγ浓度。 1.5 统计学处理 治疗前、后免疫参数结果以 -x±s表示，采用t检验，所有资料均用SPSS 10.0软件进行统计处理。生存率采用寿命表法，并进行LogRank检验。2 结果 2.1 接种后的不良反应 接种20 min后注射部位均有疼痛和烧灼感，呈急性反应，少数患者24 h后局部症状完全消退，多数患者在48 h后转为硬结，直径5～25 mm，72 h后硬结逐渐消退。11例患者在注射后出现一过性低热，一般≤38 ℃，不需任何处理，次日可消退。未出现过敏性休克和其他不良反应。 2.2 治疗前后IL2、IFNγ浓度的变化 肿瘤疫苗治疗后患者的血清IL2、IFNγ浓度为(18.32±5.43)、(12.20±4.56)pg/ml，均明显高于治疗前的(11.12±3.56)pg/ml(P=0.037)和(6.02±2.73)pg/ml(P=0.025)。 2.3 随访结果及生存率分析 随访6～84个月，肿瘤疫苗治疗组患者的平均生存时间62.45个月，中位生存期59.32个月；而单纯手术组平均生存时间仅为43.74个月，中位生存期44.35个月。经LogRank检验，两组患者的累计生存率比较，差异有统计学意义(P=0.027)。3 讨论 肿瘤生物治疗是继手术、化疗、放疗之后又一个重要的补充手段，称之为第四治疗模式，近十多年来已成为抗肿瘤研究的一个热点［2］。主动特异性免疫治疗是肿瘤生物治疗研究的重要课题之一。以肿瘤抗原或肿瘤相关抗原加佐剂组成疫苗在国外已有从动物实验到临床应用的报道［3］。本研究的72例结直肠癌患者行辅助性自体肿瘤疫苗治疗后，IFNγ、IL2水平显著上升，提示机体细胞免疫功能增强，引起Ⅰ型免疫反应，从而杀伤肿瘤细胞。经临床随访观察，瘤苗治疗组患者的生存率明显提高，与对照组相比差异有统计学意义。表明结直肠癌自体肿瘤疫苗能有效诱导机体的细胞免疫反应，延长肿瘤患者的生存期，而且仅出现注射局部反应及低热等轻微的全身症状，毒副作用小，是很有前景的抗肿瘤辅助手段之一。 肿瘤疫苗虽然还面临许多悬而未解的难题，但为人类攻克癌症开辟了一条新的思路。【参考文献】［1］ Kahlenberg M S, Sullivan J M, Witmer D D, et al. Molecular prognostics in colorectal cancer［J］. Surg Oncol,2003,12(3):173-186.［2］ Indar A A, MaxwellArmstrong C A. Active specific immunotherapy for colorectal cancer［J］. Expert Rev Anticancer Ther,2003,3(5):685-694.［3］ Emens L A, Jaffee E M. Cancer vaccines: an old idea comes of age［J］. Cancer Biol Ther,2003,2(4 Suppl 1):S161-168.［4］ Kochman S, Bernard J. Antitumour immune response and cancer vaccination: the critical role of dendritic cells［J］. Curr Med Res Opin,1999,15(4):321-326.
