肺结核患者血清IL-23和IL-22检测及临床意义

　　白细胞介素(interleukin)是白细胞与机体免疫细胞之间相互作用的细胞因子，在激活和调节免疫细胞、传递信号及感染性疾病中具有重要作用。近年来发现，白细胞介素22(inter-leukin22，IL-22)和白细胞介素23(interleukin23，IL-23)在参与感染性疾病的发病机制中可能处于关键地位。IL-23能诱导幼稚CD4+T细胞分化为高活性的Th17细胞[1]。Th17细胞通过生成IL-17A，L-17F和IL-16等多种细胞因子影响多种疾病的发生、发展[1-2]。IL-22可由Th17细胞、Th22细胞及NK22细胞产生，在机体抵御微生物感染中发挥重要作用[3]。本文以肺结核(pulmonarytuberculosis，PTB)患者为研究对象，通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测常规抗结核药物治疗前和治疗后患者血清IL-22和IL-23水平的变化，探讨其在肺结核发生、发展中的意义。

　　1　资料与方法

　　1.1　一般资料　根据中华人民共和国卫生行业标准WS288-2008肺结核诊断标准，收集2012年6月至2013年6月于东莞市慢性病防治院进行治疗的新发PTB患者47例(PTB组)，年龄18～65岁，平均(38.15±1.93)岁;男性17例，女性28例;其中常规抗结核药物治疗3d以内患者19例(治疗前组)，常规抗结核药物治疗28～35d患者28例(治疗后组);所有患者经痰涂片检查后，结核分枝杆菌反应阳性患者19例，阴性患者28例。所有患者均无其他免疫相关性或免疫性疾病，且4个月内未使用过激素及免疫抑制剂。选取同期东莞市慢性病防治院体检科健康志愿者(healthyvolunteers，HV)26名(HV组)，年龄18～57岁，平均(35.64±2.47)岁;男性11例，女性15例。所有标本均采用肝素抗凝管空腹采血2mL，1500r/min，离心5min，收集上清液-80℃冰箱保存备用。

　　1.2　方法　采用ELISA法检测血清IL-22和IL-23水平，IL-22和IL-23ELISA检测试剂盒购买于深圳达科为生物公司，操作步骤按照说明书进行，检测仪器为MK3-酶标仪(芬兰)。

　　1.3　统计学处理　采用Graphpadprism5.0软件进行统计学分析，计量资料以狓±狊表示，组间比较采用狋检验，相关性分析采用Pearson相关分析，以p<0.05为差异有统计学意义。

　　2　结　　果2.1　血清IL-22和IL-23水平比较　PTB组血清IL-22水平[(51.06±1.80)pg/mL]明显低于HV组[(59.88±2.46)pg/mL]，两组比较差异有统计学意义(t=2.904，p=0.005);PTB组血清IL-23水平[(26.02±1.35)pg/mL]明显低于HV组[(35.06±2.66)pg/mL]，两组比较差异有统计学意义(t=3.377，p=0.001)。见图1。

　　2.2　血清IL-22和IL-23水平与PTB患者临床特征的关系　PTB患者中治疗前血清IL-22水平[(46.73±2.32)pg/mL]明显低于治疗后[(53.99±2.46)pg/mL]，治疗前IL-23水平[(20.68±1.69)pg/mL]也明显低于治疗后[(29.65±1.64)pg/mL]，差异均有统计学意义(t=2.044，p=0.047;t=3.685，p=0.001)。结核分枝杆菌反应阳性患者血清IL-22水平[(46.44±1.62)pg/mL]明显低于阴性患者[(57.86±3.23)pg/mL]，结核分枝杆菌反应阳性患者IL-23水平[(21.81± 1.28)pg/mL]也明显低于阴性患者[(32.24±2.07)pg/mL]，差异均有统计学意义(t=3.461，p=0.001;狋=4.538，p<0.01)。不同性别或年龄PTB患者血清IL-22和IL-23水平比较差异无统计学意义(p>0.05)。

　　2.3　相关性分析　Pearson相关性分析显示，PTB患者血清IL-22水平和IL-23水平无明显相关性(r=-0.107，p=0.476)。结核分枝杆菌反应阳性患者血清IL-23水平与IL-22水平呈正相关(r=0.307，p=0.023)。

　　3　讨　　论PTB是由结核分枝杆菌感染引起的肺部感染性疾病，占各器官结核病总数的80%～90%。大量研究已证实，CD4+T淋巴细胞在器官结核病感染诱导引起的机体免疫反应中发挥重要作用，特别是在机体清除体内结核分枝杆菌过程中至关重要[4]。CD4+T淋巴细胞产生的干扰素(IFN)-γ可有效控制结核分枝杆菌的持续感染。特别是人类免疫缺陷病毒(HIV)携带者(CD4+T淋巴细胞严重丢失)器官结核病发病率很高[5]。CD4+T淋巴细胞亚群(Th1、Th2、Th17、Th22和Treg)产生一系列细胞因子，协同控制器官结核病[6]。我国是器官结核病高负担国家，器官结核病年发病人数约为130万，年死亡人数达13万，远超其他传染病死亡人数的总和。因此，寻找有效的途径控制器官结核病的发病率和病死率是我国当今亟须面临的问题。近年来研究发现，白细胞介素家族在参与感染性疾病的发病机制中可能处于关键地位[7]。IL-23是2000年发现的一种促炎性细胞因子，由P19和P40两个异二聚体分子组成。IL-23主要表达于树突状细胞和巨噬细胞，在自身免疫性疾病、炎症性疾病及感染性疾病的发病机制中具有重要作用[1，8-9]。已证实IL-23/Th17细胞轴在HBV感染的肝病病理发生、发展中起主要调控作用[10]。本文研究发现PTB组血清IL-23水平明显低于HV组(p<0.05)，特别是结核分枝杆菌反应阳性患者血清IL-23水平明显低于阴性患者(p<0.05)。经常规化疗药物治疗后PTB患者血清IL-23水平明显增高(p<0.05)。IL-22也是2000年发现的一种在炎症疾病及感染性疾病中具有重要作用的细胞因子，在机体中主要由Th17细胞、Th22细胞及NK22细胞分泌产生[3，11]。当机体发生炎症或感染时，IL-22在宿主防御体系中扮演第一道防线的作用，特别在银屑病、异位性皮炎和溃疡性结肠炎患者中尤为突出[11-12]。有关IL-22在抗结核免疫中的作用，目前国内外均有报道。有学者认为其在抗结核免疫中也具有重要作用，但也有学者认为其在抗结核免疫中并非处于主导地位。本文发现PTB组血清IL-2明显低于HV组(p<0.05)，特别是结核分枝杆菌反应阳性患者血清IL-22水平明显低于阴性患者(p<0.05)。PTB患者经常规化疗药物治疗后血清IL-22水平明显增高(p<0.05)。说明IL-22在结核病发生、发展中可能具有一定的作用。本研究中Pearson相关性分析显示患者血清IL-23水平与IL-22水平无相关性，但结核分枝杆菌反应阳性患者血清IL-23水平与IL-22水平呈正相关。综上所述，作者有以下推测：(1)结核分枝杆菌反应阳性患者IL-22的表达受到机体IL-23水平的影响，这可能与结核分枝杆菌反应阳性患者机体抗原递呈细胞活性增高有关。(2)当机体结核菌反应受到控制后，机体IL-23表达降低，但这种降低并不影响IL-22的表达。(3)IL-23可能在PTB患者发病前期发挥重要作用，而IL-22在PTB患者整个感染期可能均具有重要作用。因此，检测PTB患者IL-23和IL-22水平对评估PTB患者病情转归具有一定的临床指导意义。然而，在PTB发生、发展过程的不同阶段是否有Th17细胞、Th22细胞或NK22细胞参与调控还有待进一步研究。

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　　(收稿日期：2013-11-08)