未抗病毒治疗人类免疫缺陷病毒感染者隐匿性乙型肝炎的调查及其临床特点

人类免疫缺陷病毒(HⅣ)感染者如感染HBV,表现为HBV喀阴性,HBVDNA阳性者(即隐匿性乙型肝炎)多见,其中单独抗-HBc阳性更常见。本研究通过对未进行抗病毒治疗(ART)的HIV感染者和健康体检者筛查血中HBV标志物,对HBsAg阴性者检测血中HBVDNA,来评估HⅣ感染者和健康对照组隐匿性肝炎发生率区别及临床特点,为下一步治疗与预防方案确定提供理论依据。　　资料与方法　　1.研究对象:HIV感染者来自上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心⒛09年4月至2011年4月门诊随访患者,HⅣ感染者入组勿8例(感染组),未行抗HⅣ治疗,男性220例,女性28例。年龄15~82岁,平均年龄(43±13)岁,所有患者HBsAg阴性,上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心检验科HIV抗体初筛试验和上海市疾病预防控制中心实验室HIV抗体确认阳性。排除标准:HBsAg阳性感染者。患者均检测HCV抗体和HCVRNA,仅1例患者检测出抗-HCV阳性,并HCVRNA1.63×10的7次方拷贝/ml。健康对照组121例(健康组),来自医院体检人群。人选标准:HIV抗体初筛试验阴性,HBsAg阴性。排除标准:HBsAg阳性普通人群。男性53例,女性68例。年龄20~88岁,平均年龄(47±17)岁。　　2.HBV标志物:HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc。5ml新鲜血于无抗凝管,美国雅培公司AXSYM仪器,雅培公司提供试剂,采用微粒子酶联免疫分析法检测。　　3.HBVDNA检测:采集新鲜静脉血于乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)管,分离血浆后,保存在-80℃冰箱内。采用美国罗氏COBASAmpliPrep/COBASTaqManHBVTest,version2.0检测HBVDNA水平。检测结果分为三种:(1)未检测出;(2)<20IU/耐(血浆中测到HBVDNA,但不呈线性分布);(3)>20IU/1nl呈线性分布。第2、3种确定HBVDNA为阳性。　　4.CD4+T淋巴细胞:在人组前2周内采集新鲜静脉血于乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)管,充分混匀后,立即测定。采用流式细胞术,美国BD公司流式细胞仪FACSCalibur,BD公司提供试剂,CD4+T淋巴细胞计数正常值:(410~1590)×10的6次方/L。　　5.统计学方法:用STATA10软件处理数据。率的比较用Fisher’s精确概率检验,两两比较用Bonferroni校正。ALT和CD4+T淋巴细胞计数组间比较用Wilcoxon检验,HBVDNA载量比较采用几何均数后多组比较秩和Kruskal-Wallis检验。尸(0。Os为差异有统计学意义。　　结果　　1.HBV标志物检测结果:感染组248例中,HBVDNA阳性者24例,占9.7%,男性20例,女性4例;健康组121例,HBVDNA阳性者4例,占3.3%,均为女眭,两组比较,P=0.035,差异有统计学意义。　　感染组抗-HBc(+)/抗-HBs(+)者110例,HBⅤDNA(+)8例(7.3%),HBⅤDNA(-)102例;抗-HBc(+)/抗-HBs(-)者53例,HBⅤDNA(+)11例(20.8%),HBⅤDNA(-)42例;抗-HBc(-)/抗-HBs(+)者21例,HBⅤDNA(+)3例(14.3%),HBVDNA(-)18例;-HBc(-)/抗-HBc(-)者64例,HBVDNA(+)2例(3.1%),HBVDNA(-)62例。健康组抗-HBc(+)/抗-HBs(+)者50例,HBVDNA(+)1例(2.0%),HBⅤDNA(-)49例;抗-HBc(+)/抗-HBs(-)者17例,HBⅤDNA(+)1例(5.9%),HBVDNA(-)16例;抗-HBc(-)/抗-HBs(+)者8例,HBⅤDNA(+)0例,HBⅤDNA(-)8例;抗-HBc(-)/抗-HBs(-)者44例,HBVDNA(+)2例(4.5%),HBⅤDNA(-)42例,两组比较,抗-HBc(+)/抗-HBs(+)和抗-HBc(-)/抗-HBs(-)差异有统计学意义,P=0.018和P=0.003。　　2.感染组患者血HBVDNA载量:感染组HBⅤDNA(+)者24例,HBⅤDNA载量最低者血中能测到HBⅤDNA,但在检测值水平以下,即<20IU/ml,最高者3.22×10的5次方IU/Ⅲ。大于100IU/ml9例,占37.5%;20~99IU/ml4例,占16.7%<20IU/ml11例,占45.8%。　　3.感染组HBⅤDNA(+)与HBⅤDNA(-)患者CD4+T淋巴细胞计数和ALT检测结果:CD4+T淋巴细胞计数和ALT水平在感染组HBⅤDNA(+)组分别为(113±23)×10的6次方/L和(34.2±7.0)U/L;HBVDNA(-)组分别为(78±7)×10的6次方/L和(42.5±3.2)U/L,两组比较,差异无统计学意义。　　讨论　　HⅣ感染者隐匿性乙型肝炎发病率为5%~25%,而普通人群仅为0.7%。在我们的队列中,HⅣ感染者合并隐匿性乙型肝炎者占9.7%,普通人群中占3.3%,提示HⅣ感染者合并隐匿性乙型肝炎比例增高与HⅣ感染有关。合并HCⅤ感染者隐匿性乙型肝炎也常见。本研究中仅有一例患者血中检测出HCVRNA,此例患者出现隐匿性乙型肝炎不能排除HCV感染。　　我们的研究显示HⅣ感染者和普通人群,抗-HBc单独阳性者隐匿性乙型肝炎比例最高,HⅣ感染者组占20.8%,普通人群中占5.9%。HⅣ感染者抗-HBc(+)/抗-HBs(-)组分别与抗-HBc(+)/抗-HBs(+)组、抗-HBc(-)/抗-HBs(+)组两组比较,差异有统计学意义。有报道在HBⅤ感染高危人群(血液透析和HⅣ感染者)中,血清抗-HBc单独阳性者,隐匿性乙型肝炎阳性率为30%。所以在HBⅤ感染高危人群中,抗-HBc单独阳性者一定程度上反应隐匿性乙型肝炎存在,但在低风险人群中,不能做此推断。　　我们的研究显示,HⅣ感染者,HBVDNA(+)者与HBVDNA(-)者CD4+T淋巴细胞水平比较,差异无统计学意义。但隐匿性乙型肝炎与低CD纩T淋巴细胞水平相关,考虑HIV感染者CD4水平降低,既往HBV感染病毒再激活;或者HⅣ感染者,急性感染HBV后,因免疫抑制不能完全清除病毒。HⅣ感染女眭中,隐匿跬HBV感染CD4+T淋巴细胞低于200×10的6次方/L更常见。HⅣ感染者免疫损伤,隐暨跬乙型肝炎HBVDNA病毒载量偏低,肝脏炎症反应较轻,ALT水平与IIBVDNA（-)组无差异。我们研究的局限性为因隐匿性乙型肝炎HBVDNA病毒载量低,未进行基因分型和耐药测定。　　HⅣ感染者抗病毒治疗的部分药物对抗HBⅤ也有活性,如中止这些药物时,HBV再次活跃。因此,在ART之前检测是否有乙型肝炎是必要的,对今后制定和调整抗病毒方案、预防接种疫苗提供理论依据。　　参考文献　　1.Jardim RN,Goncales NS,Pereira JS. Occult hepatitis B virus infection in immunecompromised patients[J].Braz Infect Dis,2008.300-305.　　2.Gupta S,Singh S. Occult hepatitis B virus infection in ART-naive HIV-infected patients seen at a tertiary care centre in north India[J].BMC Infectious Diseases,2010.53.　　3.Cohen Stuart JW,Velema M,Schuurman R. Occult hepatitis B in persons infected with HIV is associated with low CD4 counts and resolves during antiretroviral therapy[J].Journal of Medical Virology,2009,(3):441-445.doi:10.1002/jmv.21422.　　4.Tsui JI,French AL,Seaberg EC. Prevalence and long-term effects of occult hepatitis B virus infection in HIV-infected women[J].Clinical Infectious Diseases,2007.736-740.　　5.Bloquel B,Jeulin H,Burty C. Occult hepatitis B infection in patients infected with HIV:report of two cases of hepatitis B reactivation and prevalence in a hospital cohort[J].Journal of Medical Virology,2010.206-212.