血管内皮生长因子及转化生长因子β联合检测在老年结核性与恶性胸腔积液中的价值

　　作者：李迎莉　　作者单位：210002江苏省南京市，解放军第四五四医院呼吸科

　　【摘要】目的监测老年结核性胸腔积液和老年恶性胸腔积液中血管内皮生长因子(VEGF)和转化生长因子β(TGFβ)在鉴别老年结核性和老年恶性胸腔积液中的价值。 方法 老年结核性胸腔积液组31例，老年恶性胸腔积液组30例，分别行胸腔闭式引流术。采用酶联免疫吸附法(ELISA)法检测2组患者的胸液中VEGF及TGFβ的水平。 结果 恶性胸腔积液中VEGF及TGFβ的水平呈正相关(r=0.438，P<0.05)。恶性胸腔积液中VEGF及TGFβ水平[(269±62)ng/L，(125.5±12.0)mg/L]较结核性胸腔积液[(104±55)ng/L，(81±23)mg/L]升高，差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 VEGF及TGFβ在老年恶性胸腔积液的形成起重要作用，对恶性胸腔积液与结核性胸腔积液的鉴别具有重要价值。

　　【关键词】 胸腔积液,血管内皮生长因子,转化生长因子β

　　【Abstract】　Objective To investigate the function of vascular endothelial growth factor (VEGF) and transforming growth factorβ(TGFβ)levels in the pleural fluid of older patients with malignancy and tuberculosis. Methods The levels of VEGF and TGFβ in pleural fluid of 61 older patients were measured by enzymelinked immunosorbent assay(ELISA)method. Results There was significantly positive correlation between the levels of VEGF and TGFβ in the pleural fluid of patients with malignant pleural effusions (r=0.438,P<0.05). The levels of VEGF and TGFβ(269±62 ng/L,125±8.1 mg/L) were significantly higher in the pleural fluid of patients with malignant pleural effusions group than those in tuberculosis group(104±55 ng/L,85±12.0 mg/L)(P<0.05). Conclusions These findings suggest that VEGF,TGFβ are significant to the patient with malignant chest fluid and then may play an important role in differentiation of it from tuberculosis.

　　【Key　words】 pleural effusion; vascular endothelial growth factor; transforming growth factorβ

　　近年来老年患者胸腔积液的发生率明显增高，结核性胸腔积液和恶性胸腔积液有时难以鉴别，因此，寻找敏感性和特异性更高的辅助诊断方法鉴别老年患者结核性胸腔积液和恶性胸腔积液有着重要意义。而肿瘤的发生发展均为血管生成依赖性。肿瘤血管生成与肿瘤的浸润转移及预后密切相关，研究表明，血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)具有强大的促进血管新生和增加血管通透性作用，在肿瘤转移的启动中起重要作用，可能参与渗出性胸腔积液的形成[1]。检测其在胸腔积液中的水平对结核性胸腔积液和恶性胸腔积液的鉴别具有重要价值。

　　1 对象与方法

　　1.1 研究对象 病例组选择2005年1月至2007年10月于我院呼吸内科住院病例老年结核性胸腔积液(结核组)31例经临床证实，抗结核治疗有效，随访2月无复发，其中男14例，女17例，年龄60～81岁，平均(69±12)岁;恶性胸腔积液患者(恶性组)30例(肺癌18例、间皮瘤8例、转移瘤4例)均经细胞学或病理学证实，其中男19例，女11例，年龄61～86岁，平均(73±13)岁。

　　1.2 方法 治疗前2组患者分别给予常规抗痨及化疗4～6周后经患者同意行胸腔穿刺。2组经B超定位后，常规操作，于胸腔内置入中心静脉导管，外接一次性引流袋进行引流，引流量第1天为800～1000 ml，不引流时予肝素帽封管，抽取胸腔积液后立即送检。

　　1.3 试验方法 所有患者治疗前后分别收集15 ml胸腔积液4 ℃低温3000 r/min离心10 min，取上清液于-20 ℃冻存待测。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测胸腔积液中VEGF、转化生长因子β(TGFβ)水平，试剂盒购于深圳晶美生物工程有限公司，严格按说明书要求操作。采用酶速率法测定胸腔积液中腺苷脱氨酶活性。

　　1.4 统计学方法 数据以均数±标准差(±s)表示，采用SPSS 13.0软件包进行统计分析，各组间的比较采用t检验，用Pearson相关系数分析2种变量间的相关性。以P<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1 2组腺苷脱氨酶水平比较 观察指标：观察2组患者治疗前胸部B超、胸液中腺苷脱氨酶水平。结核组胸腔积液中腺苷脱氨酶(50±17) U/L，恶性组胸腔胸液中腺苷脱氨酶(23±9) U/L，结核组胸腔积液中腺苷脱氨酶水平较恶性组显著升高，2组差异有统计学意义(P<0.05)。

　　2.2 2组患者治疗前后胸液中VEGF、TGFβ比较 治疗前恶性组胸腔胸液中VEGF、TGFβ水平均较结核组显著升高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。表1 2组治疗前VEGF、TGFβ水平比较注：与结核组比较，▲P<0.05治疗后恶性组胸腔胸液中VEGF、TGFβ水平均较结核组无显著差异(P>0.05)。见表2。表2 2组治疗后VEGF、TGFβ水平比较注：与结核组比较，▲P<0.05

　　结核组胸腔积液中治疗前后VEGF、TGFβ水平无显著变化，恶性组治疗后VEGF、TGFβ水平较治疗前显著下降(P<0.05)。

　　2.3 胸腔积液中VEGF、TGFβ相关性分析 统计学处理结果提示胸腔积液中VEGF与TGFβ水平呈正相关(r=0.438,P<0.05)。

　　3 讨论

　　胸腔积液中的VEGF可能来源于多种类型细胞，如间皮细胞、胸腔积液中的浸润细胞(如炎性细胞、恶性肿瘤细胞)。但目前仍不清楚恶性胸腔积液中VEGF是以间皮细胞还是以肿瘤细胞表达为主。肿瘤细胞诱导的微血管生长及肿瘤环境中血液循环建立的过程，对肿瘤的生长，浸润和转移都有重要作用。肿瘤微血管内皮细胞在趋化因子作用下募集于肿瘤缺血缺氧组织，在诱导因子的刺激下发生定向分化，形成成熟内皮细胞，并在促血管生长因子如VEGF和TGFβ作用下形成血管。胸膜组织无论是在正常或异常状态下，均有VEGF受体表达[2]。本研究亦显示老年恶性胸腔积液患者胸水中VEGF浓度较结核性胸腔积液显著增高。有文献报道VEGF在老年恶性胸腔积液中的表达增高，其表达水平与年龄、TNM分期以及是否有吸烟史有关。高龄患者VEGF不仅刺激肿瘤细胞血管增生，也增加血管通透性，从而使肿瘤细胞较易通过和转移。大量研究提示检测胸腔积液VEGF水平有助于良、恶性胸腔积液的鉴别[3]。

　　目前腺苷脱氧酶活性检验被广泛用于诊断结核性胸膜炎，结核性胸腔积液中腺苷脱氨酶活性明显高于恶性胸腔积液，以33 U/L作为腺苷脱氨酶诊断结核性胸膜炎的临界值[4]，其敏感性较高。随着对实体肿瘤的血管生成和功能认识的深入，大量血管生长因子及血管生长抑制因子的发现使人们认识到肿瘤内血管生长具有可调节性。其中VEGF及其受体(VEGFR)和TGFβ是目前发现的最重要的促肿瘤血管生长因子，能促进肿瘤血管内皮细胞的增殖、迁移和存活，增加肿瘤血管的通透性，在肿瘤血管生成过程中发挥关键作用[5]。缺氧是有效的VEGF基因表达刺激因子。缺氧诱导的VEGF表达增高被认为与肿瘤对放射治疗及化学治疗产生抵抗相关。目前认为许多细胞因子对VEGF表达有调控作用，其中TGFβ是最有效的刺激因子之一。研究显示恶性胸腔积液TGFβ体内、体外均可诱导产生VEGF，对兔子胸腔内注射TGFβ可刺激产生VEGF，并呈剂量相关性[6]。本研究亦显示老年恶性胸腔积液患者胸腔积液中VEGF水平与TGFβ水平呈正相关，但TGFβ诱导产生VEGF的确切机制及细胞内传导途径仍有待进一步研究。老年恶性胸腔积液患者具有发现晚、转移早的特点，部分患者明确时体质状况差，不能耐受化、放疗。采用酶联免疫吸附法检测VEGF和TGFβ水平，对老年患者胸腔积液的鉴别和预后提供重要信息。比较胸腔积液中VEGF水平与TGFβ水平及腺苷脱氨酶活性在对诊断老年患者结核性胸腔积液和恶性胸腔积液具有重要价值。

　　VEGF及TGFβ在恶性胸腔积液的形成中起重要作用，尤其老年恶性胸腔积液中的表达增高，其水平高低与预后有关[7]。本组老年患者结核组胸腔积液治疗前后VEGF、TGFβ水平无显著变化，而恶性组胸腔积液治疗前后VEGF、TGFβ水平显著下降(P<0.05)，表明老年恶性胸腔积液中VEGF及TGFβ的表达对判断患者的病情和预后可能具有一定意义。

　　【参考文献】

　　[1] Hamed EA,ElNoweihi AM,Mohamed AZ,et al.Vasoactive mediators(VEGF and TNFalpha)in patients with malignant and tuberculous pleural effusions[J].Respirology,2004,9(1):8186.

　　[2] Gravelyn TR,Michelson MK,Gross BH，et al.Tetracycline pleurodesis for malignant pleural effusions. A 10year retrospective study[J]. Cancer,1987,59(11):19731977.

　　[3] Ruiz E,Aleman C,Alegre J,et al. Angiogenic factors and angiogenesis inhibitors in exudative pleural effusions[J].Lung,2005,183(3):185195.

　　[4] 熊盛道，徐国鹏，熊维宁.白细胞介素18和腺苷脱氨酶活联合检测鉴别结核性与恶性胸腔积液的价值[J].中华结核和呼吸杂志,2007，10(3):779780.

　　[5] Toi M,Matsumoto T,Bando H.Vascular endothelial growth factor:its prognostic,predictive,and therapeutic implications[J].Lancet Oncol,2001,2(11):667673.

　　[6] Gary Lee YC，Melkerneker D,Thompson PJ,et al.Trasforming growth factorβ induces vascular endothelial growth factor elaboration from pleural mesothelial cells in vivo and in vitro[J].Am J Respir Crit Care Med，2002,165(1):8894.

　　[7] Momi H,Matsuyama W,Inoue K,et al.Vascular endothelial growth factor and proinflammatory cytokines in pleural effusions[J].Respir Med，2002,96(10):817822.