COPD急性加重期与稳定期患者诱导痰细胞组成及血清炎症因
发表时间：2011-08-04 浏览次数：363次
作者：李磊,夏熙郑 作者单位：475000河南大学淮河医院呼吸内科;450000郑州大学第二附属医院呼吸内科
【摘要】目的：探讨慢性阻塞性肺病(COPD)患者气道内炎症细胞组成及血清CRP、TNF-α水平的变化及其在急性加重期中的作用。方法：检测32例COPD急性加重期患者及26例稳定期患者和26例健康对照组的诱导痰液中细胞组成;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测所有试验者的TNF-α和CRP水平，分析上述指标的变化和关系。结果：COPD急性加重期与稳定期患者诱导痰细胞均以中性粒细胞为主，稳定期患者中性粒细胞计数下降，但仍高于健康对照组;AECOPD组患者的TNF-α和CRP水平明显高于稳定期和健康对照组，稳定期COPD患者的TNF-α和CRP水平明显高于健康对照组;AECOPD组诱导痰的中性粒细胞百分比与TNF-α和CRP水平呈正相关。结论：COPD急性加重期与稳定期患者的诱导痰，中性粒细胞增多与COPD气道炎症反应持续存在有关;COPD患者体内存在TNF-α和CRP持续高表达，提示COPD患者存在持续的气道炎症反应。
【关键词】 COPD 痰诱导,细胞分类,炎症因子
资料与方法
COPD组：2008年5月～2009年3月COPD患者58例。其中急性加重期组32例，男21例，女11例，平均年龄65.52±7.8岁;稳定期组26例，其中男14例，女12例，平均年龄68.42±8.5岁。COPD诊断按照中华医学会呼吸病学会制定的《慢性阻塞性肺病诊治指南(2007年修订版)》的标准。均有胸部X线胸片、肺功能、血常规检查。
对照组：选择同期健康体检者26例，男15例，女11例，平均年龄66.34±5.6岁，与COPD组无差异，并且排除可能导致CRP、TNF-α升高的疾病，同时要求戒烟2个月以上。
方法：①诱导痰的采集及处理: 根据曾勉等[1]的方法，雾化吸入3%高渗盐水2分钟，此后每3分钟深咳1次，共20分钟，收集的痰液量至少1g以上。置于恒温水浴振荡箱振荡15分钟，3500r/分离心20分钟，沉淀细胞作痰液质量检查，上清液待测。②血清CRP、TNF-α血标本的制作和检测方法：所有受试者经禁食及无吸氧10小时后，采静脉血3ml。采用化学发光免疫法测定高灵敏度血清CRP水平，TNF-α的测定应用BIOSOURCE试剂盒，应用ELISA 法分别检测其含量，操作按试剂盒说明书进行。③肺功能检测：所有COPD组均行肺功能测试。选择第1秒用力呼气容积占预计值的百分比(FEV1%)和第1秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV1/FVC)作为肺功能测试指标。
统计学处理：各项数据均以均数±标准差(X±S)表示，两组以上样本资料采用单因素方差分析，其中两两比较用SNK-q检验，两因素相关分析用Pearson直线相关分析，检验水准α=0.05。用SPSS13.0统计软件包处理数据。
结 果
健康对照组的体重显著高于COPD组,健康对照组的吸烟指数显著低于COPD组,性别、年龄、身高两组比较差异没有统计学意义。见表1。表1 COPD组与正常对照组生理参数比较(略)
AECOPD组患者血浆CRP和TNF-α水平显著高于稳定期组血浆水平和健康对照组血浆水平(P<0.05);稳定期组显著高于健康对照组血浆水平(P<0.05)。
诱导痰中中性粒细胞计数与血浆CRP和TNF-α水平的相关性： COPD组患者诱导痰中中性粒细胞计数与血浆CRP和TNF-α水平皆呈显著正相关;痰中巨噬细胞计数与血浆CRP和TNF-α水平皆呈显著负相关。健康对照组患者诱导痰中中性粒细胞计数与血浆CRP和TNF-α水平无相关性(r=0.013，P>0.05)。
讨 论
COPD是一种气流受限为特征的疾病，导致COPD急性加重最主要原因为小气道和肺实质的炎症,中性粒细胞和CRP、TNF-α在气道局部炎症中起重要作用[1]。
诱导痰技术[2]在COPD应用中的安全性和可行性已得到证实，是一种简便可靠的新方法。哮喘患者诱导痰中以嗜酸性粒细胞和巨噬细胞为主，而COPD患者诱导痰中则以中性粒细胞为主[3]。
本实验研究了COPD患者诱导痰的细胞成分及比例和血清炎症因子变化的关系，证明了COPD患者的急性加重与气道内的中性粒细胞浸润有关，并可以导致血清炎症因子CRP、TNF-α水平升高。同时，COPD稳定期患者的气道内仍然存在中性粒细胞的浸润和血清炎症因子CRP、TNF-α水平升高，提示在稳定期的COPD依然存在着气道内的局部炎症反应，而这种炎症是导致COPD患者的全身炎症反应的原因之一，并可能是导致消瘦等全身慢性炎症反应的症状的原因。从而证实诱导痰技术和血清炎症因子CRP、TNF-α水平的监测对于研究COPD病情变化和全身炎症反应具有重要意义。
【参考文献】
1 Churg A,Dai J,Tai H,et al.Tumor necrosis factor-alpha is central to acute cigarette smoke-induced inflammation and connective tissue breakdown.Am J Respir Crit Care Med,2002,166:849-854.
2 Langer F,et al.Chest 2004,126:135-141.
3 Krisiukeniene A,Sitkauskiene B,Malakauskas K.Peculiarities of induced sputum inflammatory cell counts in allergic versus non-allergic asthma.Clin Exp Allergy.Medicina(Kaunas),2005,41(3):196-202.
