银杏达莫对特发性肺间质纤维化的作用

　　作者：袁晓梅，孙浩杰 作者单位：新乡医学院第一附属医院：1. 呼吸内科;2. 核医学科，河南卫辉 453100

　　【摘要】目的 探讨外周血转化生长因子β1(TGFβ1)浓度与特发性肺间质纤维化(IPF)发病机制的相关性，同时研究银杏达莫对IPF的治疗机制及治疗效果。方法 对78例正常健康人(对照组)、78例住院IPF患者检测外周血TGFβ1。IPF患者随机分为常规治疗组和加用银杏达莫治疗组，两组IPF患者用药前后分别采用酶联免疫吸附试验检测外周血TGFβ1进行对比分析。结果 IPF组外周血TGFβ1浓度[(276.090±45.784)pg/mL]明显高于对照组[(50.031±24.664)pg/mL](P<0.05)。加用银杏达莫治疗组治疗后外周血TGFβ1浓度[(87.75±31.32)pg/mL]与治疗前[(241.20±38.665)pg/mL]比较呈不同程度的降低，而且较常规治疗组[(146.35±35.204)pg/mL]明显降低，有显著性差异(P<0.05)。加用银杏达莫治疗组患者病情较常规治疗组明显减轻(P<0.05)。结论 TGFβ1与IPF的发病机制有关。银杏达莫能够抑制外周血TGFβ1的表达，有利于缓解病情。

　　【关键词】 特发性肺间质纤维化 转化生长因子 β1 银杏达莫

　　特发性肺间质纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis, IPF)又称肺间质纤维化(pulmonary interstitial fibrosis, PIF)，是一种原因不明、以弥漫性肺泡炎和肺泡结构紊乱、最终导致肺间质纤维化为特征的疾病。转化生长因子β1(transforming growth factorβ1, TGFβ1)是目前公认的重要的致纤维化介质。本文检测2005年1月至2007年1月78例IPF住院患者外周血TGFβ1含量，探讨外周血TGFβ1浓度与IPF发病机制的相关性，同时观察银杏达莫对支气管哮喘的治疗机制及治疗效果。

　　1 材料与方法

　　1.1 研究对象及分组

　　IPF组：78例IPF患者为2005年1月至2007年1月新乡医学院第一附属医院呼吸内科住院患者，其中男性43例，女性35例，年龄23～68岁，平均年龄(40.2±1.2)岁，符合2002年中华医学会呼吸病学分会发布的特发性肺(间质)纤维化诊断标准[1]，资料完整。随机分为常规治疗组和加用银杏达莫治疗组。对照组：为同期健康志愿者78例，均排除心、脑、肝、肾、肺等脏器的器质性及纤维化性疾病,其中男性42例，女性36例，年龄(13～75)岁，平均年龄(40.8±1.1)岁。各组年龄、性别经统计学处理无显著性差异，具有可比性。

　　1.2 治疗方法

　　常规治疗组每天采用地塞米松5mg加50g/L葡萄糖液250mL缓慢静滴，治疗组另予银杏达莫注射液(贵州益佰制药股份有限公司生产)20mL加50g/L葡萄糖注射液或9g/L氯化钠注射液500mL静滴(糖尿病患者不用葡萄糖液)，每日1次。两组均治疗15d。治疗15d后复检1次。治疗期间不服用免疫抑制剂、干扰素等其他药物。必要时可使用抗生素和液体支持疗法。

　　1.3 标本收集

　　对照组于入选当日、IPF组于确诊当日肘静脉抽血，IPF组病情评分后给予治疗。于治疗15d后再次抽血。每次抽取外周肘静脉血1mL，置于干净试管中，静置凝固后1h内1000r/min离心10min，取血清于-70℃冷冻冻存，供测定TGFβ1用。

　　1.4 测定方法

　　TGFβ1测定采用酶联免疫吸附法，试剂盒购自武汉博士德公司，保存温度为2～8℃，测定前盒内所有试剂均自然恢复到室温(20～25℃)。检测前先酸化待检血清，使TGFβ1活化，然后根据试剂盒提供的方法进行酶联仪测450nm吸光度(A)，结果与标准曲线比较。

　　1.5 疗效判断

　　参照我国中华医学会呼吸病学分会2002年4月发布的特发性肺(间质)纤维化诊断和治疗指南(草案)[1]。根据患者综合症状、Velcros罗音体征、胸部X片、高分辨CT、肺功能肺总量(TLC)、肺活量(VC)、肺弥散功能(Dlco)、动脉氧分压等积分进行综合比较，根据治疗前、治疗后积分，采用尼莫地平评分法(疗前积分减疗后积分再除以疗前积分)进行疗效判定。治愈：积分下降95%以上;显效：积分下降70%～95%;有效：积分下降30%～70%;无效：积分下降<30%。

　　1.6 统计学处理

　　数据均用±s表示，采用SPSS12.0统计软件处理，组间比较用成组设计资料两样本均数比较的t检验，组内比较用配对设计资料的t检验及Ridit分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结果

　　患者组外周血TGFβ1浓度明显高于正常组(P<0.05)。常规治疗组患者在治疗后与治疗前相比，外周血TGFβ1浓度降低;加用银杏达莫治疗组患者在治疗后与治疗前相比，外周血TGFβ1浓度降低，而且较常规治疗组降低明显(P<0.05)。详见表1。加用银杏达莫治疗组患者病情较常规治疗组明显减轻(P<0.05，表2)。表1 各组外周血中的TGFβ1水平(略)表2 IPF患者治疗后病情分级的变化(略)

　　3 讨 论

　　IPF开始的病理改变以肺泡炎为主，当肺泡巨噬细胞受到各种刺激物刺激活化后，分泌多种细胞因子，导致炎症反应并刺激成纤维细胞过度增生，分泌纤维结素，形成纤维化。

　　转化生长因子β1是各种内源性和外源性刺激引起正常组织纤维化发生的主要细胞因子，在组织器官的纤维化中发挥了十分重要的作用，被公认为纤维化形成与发展的启动枢纽，是关键性细胞因子[2]。TGFβ1不但能诱导其他因子的表达，更重要的是它可使成纤维细胞活化、增殖并转分化为肌成纤维细胞，促进纤维连接蛋白、糖蛋白和胶原等细胞外基质分泌，减少蛋白酶和趋化因子分泌，提高蛋白酶抑制物水平，促进整合素受体表达，最终导致肺纤维化。目前已经应用TGFβ1诱导肺切片纤维化模型的建立[3]。但是关于外周血中TGFβ1与IPF的临床研究少见报道。本实验结果表明IPF患者外周血中TGFβ1水平较对照组明显升高，表示TGFβ1与IPF的发病机制有关。

　　IPF的治疗，目前缺乏肯定的或特异性的治疗，糖皮质激素是传统的治疗肺纤维化的主要药物，临床应用较多的是泼尼松，可抑制炎症和免疫反应，减轻肺泡炎，从而延缓肺纤维化的进程，但它仅对20%的IPF患者有效，而且常常为一过性反应[4]。随着对肺纤维化发病机制的深入研究，国内外的研究热点集中于寻找新的抗纤维化药物，并尽可能在疾病的早期进行干预治疗。

　　在各种实验模型和临床纤维化疾病中，TGFβ1持续上升，抑制它的生物活性会抑制基质生成和调节纤维化过程[5] 。因此，通过阻断TGFβ1的作用以治疗肺纤维化疾病已引起了人们的很大关注。实验观察中已证实用TGFβ抗体或抗血清可以明显减轻BLM 诱发的肺纤维化;在仓鼠气管内应用可溶性TGFβ受体后，可竞争性地与TGFβ结合，从而明显降低羟脯氨酸水平和脯氨酰羟化酶的活性，组织病理检查显示纤维化改变明显减轻[6]。动物实验提示，银杏叶可能通过抑制NF2κB的活性，减少TGFβ mRNA表达及蛋白产生，使炎症及纤维化病变减轻[6]。

　　常规治疗组与加用银杏达莫治疗组治疗后TGFβ1均值较治疗前明显下降，且加用银杏达莫治疗组TGFβ1下降更为显著，表明银杏达莫和糖皮质激素对肺间质纤维化均具有治疗作用。银杏达莫可能是通过抑制TGFβ1的表达抑制肺纤维化的进程而发挥治疗作用的，应用糖皮质激素的同时加用银杏达莫，可以更好地抗纤维化，因此是一类极具前途的治疗肺间质纤维化的药物，应进一步观察研究。

　　【参考文献】

　　[1]中华医学会呼吸病学分会. 特发性肺(间质)纤维化诊断和治疗指南(草案) [J]. 中华结核和呼吸杂志, 2002, 25(4):369382.

　　[2]朱剑萍，姚宏伟，陈季强. TGFβ1诱导肺切片纤维化模型的建立 [J]. 中国药理学通报, 2006, 22(4):501504.

　　[3]SELMAN M, KING TE JR, PARDO A. Idiopat hic pulmonary fibrosis: prevailing and evolving hypotheses about its pathogenesis and implications for therapy [J]. Ann Intern Med, 2001, 134(2):136151.

　　[4]ISAKA Y, TSUJIE M, ANDO Y, et al. Transforming growth factorbeta antisense oligodeoxynucleotides block interstitial fibrosis in unilateral ureteral obstruction [J]. Kidney Int, 2000, 58(5):18851892.

　　[5]WANG Q, WANG Y, HYDE DM, et al. Reduction of bleomycin induced lung fibrosis by transforming growth factor beta soluble receptor in hamsters [J]. Thorax, 1999, 54(90):805812.

　　[6]武慧，冯一中，顾振纶. 肺间质纤维化的治疗现状 [J]. 国际呼吸杂志, 2006, 26(8):620624.