病毒性肝炎患者葡萄糖-6-磷酸脱氢酶检测的临床意义
发表时间：2012-06-05 浏览次数：550次
作者：刘运周,曾学平,肖洋 作者单位：中国人民解放军第421医院检验科,广州
【摘要】 目的 探讨红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)检测对甲、乙型病毒性肝炎患者的临床意义。方法 采用高铁血红蛋白还原试验定量检测259例甲型病毒性肝炎患者、303例乙型病毒性肝炎患者及593例对照者红细胞G-6-PD的活性。结果 对照组中G-6-PD缺陷20例(3.37%)，甲型病毒性肝炎组G-6-PD缺陷31例(11.97%)，与对照组相比差异有统计学意义(χ2=23.67，P<0.01);乙型病毒性肝炎组G-6-PD缺陷20例(6.60%)，与对照组相比差异有统计学意义(χ2=4.90，P<0.05);甲、乙型病毒性肝炎组的G-6-PD缺陷率差异也有统计学意义(χ2=4.88，P<0.05)。结论 检测甲、乙型病毒性肝炎患者的红细胞G-6-PD水平，对防止在治疗过程中并发溶血性贫血有较重要的作用。
【关键词】 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶;甲型病毒性肝炎;乙型病毒性肝炎;缺陷率
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(Glucose-6-phosphate dehydrogenase，G-6-PD)缺陷是新生儿溶血发病的重要危险因素之一，对新生儿进行G-6-PD筛查是预防发生溶血的有效辅助手段[1-3]。病毒性肝炎是严重影响人类健康的疾病[4]，可诱发G-6-PD缺陷患者溶血[5]。为探讨红细胞G-6-PD检测对甲、乙型病毒性肝炎的临床意义，尤其是在治疗时指导用药的意义，作者检测了562例临床确诊为甲、乙型病毒性肝炎的住院患者红细胞G-6-PD的活性，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 研究对象
(1)病毒性肝炎组：562例，为2004年8月至2006年9月在中国人民解放军第421医院传染科住院患者，其中甲型病毒性肝炎患者259例，男152例，女107例，年龄16.2～65.8岁，平均(36.7±13.8)岁;乙型病毒性肝炎患者303例，男175例，女128例，年龄15.3～68.1岁，平均(38.3±12.5)岁。诊断标准符合2000年全国西安病毒性肝炎学术会议制定的诊断标准[6]。(2) 对照组：593例，为同期在中国人民解放军第421医院体检及住院患者，主要为心、脑血管病、消化道疾病、呼吸道疾病、外伤等患者，其中男357例，女236例，年龄15.6～70.2岁，平均(37.9±14.1)岁。3组性别经χ2检验差异无统计学意义(χ性别2=5.17，P=0.141);3组年龄经方差分析差异无统计学意义(F年龄=0.1124，P=0.8938)。
1.2 检测方法
采用高铁血红蛋白还原试验定量法检测G-6-PD酶活性。于试管中加109 mmol•L-1枸橼酸钠0.2 mL、葡萄糖20 mg，取静脉血1.8 mL摇匀，3 000 r•min-1离心5 min后调整血细胞与血浆比例为11，混匀后取0.2 mL加0.18 mol•L-1的亚硝酸钠葡萄糖液与0.4 mmol•L-1美蓝液的等量混合液0.02 mL，颠倒混匀15次，加塞置37 ℃水浴3 h，取此液0.05 mL加0.02 mol•L-1 pH7.5磷酸盐缓冲液5 mL混匀，2 min后用蒸馏水作空白于635 nm波长下，722型分光光度计测取其吸光度“A”;另取未加亚硝酸钠葡萄糖液保湿的血液0.05 mL加0.02 mol•L-1 pH7.5的磷酸盐缓冲液5 mL，混匀2 min后测其吸光度“B”;然后再加入亚硝酸钠葡萄糖液1滴混匀，5 min后用同样方法测其吸光度“S”，其高铁血红蛋白还原率=1-(A-B)/(S-B)。参考范围：本实验室参考范围定为高铁血红蛋白还原率>0.75。
1.3 统计学处理
率的比较用χ2检验，所有统计分析均用SPSS 11.5统计分析包进行统计分析。
2 结果
在临床确诊的562例甲、乙型病毒性肝炎患者中有51例G-6-PD缺陷(9.07%)，其中甲型肝炎259例中G-6-PD缺陷31例(11.97%)，乙型肝炎患者303例中G-6-PD缺陷20例(6.60%);593例对照者中有G-6-PD缺陷20例(3.37%);甲型肝炎组与对照组相比差异有统计学意义(χ2=23.67，P<0.01);乙型肝炎组与对照组相比差异有统计学意义(χ2=4.90，P<0.05);甲型肝炎组与乙型肝炎组相比差异也有统计学意义(χ2=4.88，P<0.05)。
3 讨论
G-6-PD缺陷症是一种χ性连锁隐性遗传性疾病。G-6-PD基因突变是造成酶活性降低的根本原因，目前，全世界已鉴定的G-6-PD基因突变型超过70多种，中国有13种，其中1 376M、1 388M、95M 3种基因点突变是广东人主要的G-6-PD基因突变型[7]。
有研究指出，红细胞G-6-PD缺陷患者由于其肝细胞膜的G-6-PD可能亦存在缺陷，从而影响肝细胞膜的正常功能，故易遭受病毒攻击而感染[5]。本组研究表明，甲、乙型病毒性肝炎组G-6-PD缺陷率分别为11.97%和6.60%，均较对照组的缺陷率3.37%高，也证实了这一点，从而提示红细胞G-6-PD缺陷者感染病毒性肝炎的机率较其他群体增大，尤其更易感染甲型病毒性肝炎，这可能与甲型肝炎病毒侵袭肝细胞膜的模式有关，其具体机制有待进一步研究。
G-6-PD是磷酸戊糖旁路代谢的起始酶[8]，它具有递氢作用，使氧化型辅酶Ⅱ(oxidized nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADP+)还原为还原型辅酶Ⅱ(reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)。NADPH是红细胞内重要的还原物质，能使红细胞内氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)还原为还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)。GSH为细胞清除氧自由基的重要物质[9]，由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成，在人体内具有活化氧化还原系统、激活含有巯基酶、解毒等重要作用[10]，维持血红蛋白及其他酶类中的巯基免受氧化损害，从而起到保护红细胞的作用。当G-6-PD缺陷患者受到病毒、细菌感染或氧化剂药物的毒素作用时，其红细胞内不能产生足够的GSH，致使血红蛋白中巯基被氧化，血红蛋白发生沉淀并附于红细胞膜内面，形成变性珠蛋白小体，加上红细胞膜脂质和膜蛋白巯基的氧化，其流动性和变形性发生改变，导致溶血[11]。溶血后肝细胞处理血红素的负担加重，进一步缺氧，从而加重了肝细胞的损害;其氧化性代谢产物进一步聚积，GSH进一步减少，又加重了溶血，如此形成恶性循环。某些氧化性药物，如阿斯匹林、非那西汀、磺胺嘧啶、伯氨喹啉、呋喃唑酮及磺胺异恶唑等，均能诱发G-6-PD缺陷患者发生溶血，加重肝细胞的损害。因此，检测病毒性肝炎患者红细胞G-6-PD活性，可确定其是否存在G-6-PD缺陷，从而尽量避免使用上述药物，以免诱发溶血性贫血。
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