白芍与当归对阻塞性黄疸大鼠肠道的保护作用

　　作者：戴维，陈念平，张利强 作者单位：广东医学院附属医院肝胆外科，广东湛江 524023

　　【摘要】 目的 观察白芍、当归对阻塞性黄疸大鼠肠道的保护作用。方法 SD大鼠30只，雌雄不拘，体质量210～260g，随机分为3组，每组10只：⑴结扎胆总管+生理盐水组(BDL+NS组);⑵BDL+白芍组;⑶BDL+当归组。全部大鼠于实验后第14天处死，处死前1d用十万分之一吖啶橙标记的大肠杆菌灌胃。处死后立即取肠淋巴结、肝和肾制成10%匀浆制片，在荧光镜检查标记菌，并计算细菌移位率;取小肠测定DNA含量。结果 3组肠道细菌移位率和DNA含量各为：⑴BDL+NS组为70.0%和(12.12±1.23)mg/g;⑵BDL+白芍组为56.6%和(12.43±1.31)mg/g;⑶BDL+当归组为16.6%和(16.37±1.24)mg/g[细菌移位率：小肠DNA含量⑴vs⑵，P>0.05;⑵vs⑶、⑶vs⑴均为P<0.01]。小肠DNA含量：⑴vs⑵，P>0.05;⑵vs⑶、⑶vs⑴，P<0.01。结论 当归浸液对阻塞性黄疸大鼠肠道有一定的保护作用，而白芍未观察到有如此效果。

　　【关键词】 阻塞性黄疸;细菌移位;白芍;当归;大鼠

　　急性阻塞性黄疸是外科常见病，患者术后常因免疫力下降，肠道功能受损，出现细菌移位，肠内细菌和毒素从肠内进入血流引起全身脓毒血症，患者往往病情重笃，病死率高。中药白芍(Paesmia lactiflora,P.l)和当归(Angelica sinensis,A.s)是我国传统中药，具有抗炎、提高免疫力、补血活血，保护胃肠道功能等作用[15]。本文是研究这两种中药对阻塞性黄疸大鼠肠道的保护作用。

　　1 材料与方法

　　1.1 动物模型的制备与分组

　　选择体质量210～260g的SD大鼠30只，随机分为3组，每组10只：⑴结扎胆总管+生理盐水组(BDL+NS组);⑵BDL+P.l组;⑶BDL+A.s组。30只大鼠均于实验前在实验室中行适应性喂养7d，术前禁食12h后，以氯胺酮腹腔麻醉(剂量100～150mg/kg给药)。麻醉后以无菌手术操作，行上腹正中切口，开腹后仔细分离胆总管，以1号丝线双重结扎并剪断胆总管后关腹。全程实验观察14d处死全部动物，

　　1.2 P.l和A.s煎剂的制备和给药

　　P.l和A.s均为根部切片(购自北京同仁堂药房)各100g分别装入烧瓶内加去离子水400mL，然后将烧瓶放入水浴箱内以80～90℃振荡浸泡5h，然后取其滤过液，最后使每mL含生药量为0.1g，每鼠按0.5g/kg体质量灌胃。

　　1.3 吖啶橙大肠杆菌示踪菌液的制备、使用和检测

　　大肠杆菌(ATCC25922标准株，干粉)，使用前经复苏培养后接种于LB培养基(胰蛋白胨10g+细菌酵母提取物5g+NaCl 10g+去离子水800mL)，再加入吖啶橙(按1/100000体积分数浓度)在37℃水浴箱中振荡培养过夜，制成2×109/mL的大肠杆菌液，大鼠处死前24h以大肠杆菌液灌胃(按10mL/kg体质量)。处死后立即取肠淋巴结、肝和肾制成10%匀浆每次取50μL制片(连续3次)，在荧光镜下观察。凡发现标记菌记录为阳性，并计算细菌移位率。另取小肠50mg，用比色法测定DNA含量。

　　1.4 统计学处理

　　计数资料采用χ2检验，计量资料采用单因素分析及SNK检验。

　　2 结果

　　2.1 大体观察结果

　　BDL+NS组和BDL+P.l组大鼠在实验后3～4d鼠尾出现黄染，且逐渐加深，尿液也逐渐由浅黄变为深黄色，皮肤全身黄染。而BDL+A.s组大鼠鼠尾有轻度黄染，尿液保持浅黄色。3组大鼠均存活无1例死亡。

　　2.2 细菌移位率和DNA含量的检测结果

　　3组大鼠肠道细菌移位率的比较详见表1。3组统计结果表明：BDL+A.s组的细菌移位率明显较BDL+NS组和BDL+P.l组低(P<0.01)。

　　3组大鼠小肠DNA含量：⑴BDL+NS组(12.12±1.23)mg/g;⑵BDL+P.l组(12.43±1.31)mg/g;⑶BDL+A.s组(16.37±1.24)mg/g[⑴vs⑵，P>0.05;⑵vs⑶、⑶vs⑴，P<0.01]。说明BDL+A.s组的小肠DNA含量显著高于其它两组。表1 3组大鼠肠道细菌移位率的比较

　　3 讨论

　　当归植物多生于高山寒湿阴凉的落叶林中，为多年生草本植物，其根为主要入药部分，多产于我国甘肃、云南、四川等省。其化学成分复杂，主要为黄酮类、香豆素类、有机酸类、蒿本内酯类及异构物。水提取物为多糖，是当归含量最多、最重要的药用部分。业已证明当归对免疫系统、循环系统、血液系统及呼吸系统等都有作用。杨铁虹等[6]报道，当归多糖有活化T细胞增值，对T细胞有直接促进作用，且呈现剂量与效力依赖关系。赵离原等[7]也证实当归多糖，在小剂量时对促进小鼠淋巴细胞增殖刺激指数不明显，但当归多糖剂量增至1.5g/L时，淋巴细胞增殖刺激指数可高达CPM值17.50。郭建巍等[8]研究证实当归多糖对BALB1c小鼠脾细胞有显著增殖能力和增强巨噬细胞的吞噬能力。最近(2006)Wang等[9]，以当归浸出液施用于致死性内毒素或脓毒血症小鼠，证实对小鼠有很好地保护作用;还发现当归水浸出液有大小分子量片段，凡小于10kDa分子量片段的水浸出液有显著减少高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的释放，能有效地减少HMGB1的全身积累，可降低脓毒血症死亡率最高可达90.0%，其生存率与剂量呈现依懒关系。从本文的研究结果也清楚表明，当归水浸液对阻塞性黄疸大鼠肠道有显著地保护作用;肠细菌移位率显著降低(BDL+A.s组vsBDL+NS和VBDL+P.l组，P<0.01);小肠DNA，BDL+A.s组也显著高于其它两组。这一结果说明当归水浸出液对阻黄大鼠有确切地保护作用。但这种作用是否与抗炎症前因子HMGB1有关，进一步研究是十分必要的。因为HMGB1因子是起动动物或人死亡的最重要的致病因子，是致死性内毒血症和脓毒血症的新靶点[10]，能抑制HMGB1因子的释放和身体的积累，可有效挽救生命，减少死亡。

　　白芍有抗菌、抗炎等作用，特别对痢疾杆菌、伤寒杆菌等有较强的抑、杀菌能力。白芍与当归、熟地等中药同属于中医药学补血类药物[11]。但本文研究结果尚未见有对阻塞性黄疸大鼠细菌移位有防治作用，这与Wang等[9]报道该药对致死性内毒素血症和脓毒血症无效的结果相同。

　　【参考文献】

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　　[7]赵离原，周勇，严宣左,等.当归多糖体外对免疫调节作用的实验研究[J].上海免疫学杂志，1995，15(2)：9799.

　　[8]郭建巍，吕同德，张银霞，等.当归多糖对免疫细胞增殖作用的实验研究[J].微生物字免疫学进展，2003，31(4)：3740.

　　[9]Wang H C， Li W，Li J，et al. The Agueous extract of a popular herbal nitrient supplement, Angelia sinensis profects mice against Leathal endotoxemia and sepis[J].Nutritunal Immunology,2006,136:360365.

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