甲硝唑对大鼠深Ⅱ度烧伤创面愈合的影响

　　作者：张颖涛 作者单位：山西省人民医院，山西 太原 030012

　　【摘要】 目的：研究甲硝唑对大鼠深Ⅱ度烧伤创面愈合的影响。方法：20只SD大鼠，随机分为两组，制成20%体表面积深Ⅱ度烫伤，实验组采用甲硝唑180mg/kg灌胃，对照组采用相同剂量1%羧甲基纤维素钠灌胃，每天1次直至创面愈合，观察创面愈合天数，光镜观察肉芽组织及胶原纤维生长情况，电镜观察成纤维细胞生长情况。结果：大鼠全部存活。实验组创面愈合所需时间与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。伤后7 d及14 d光镜观察发现实验组肉芽组织及胶原纤维生长优于对照组，14 d时实验组创面再上皮化的进程优于对照组。伤后14 d时电镜观察发现实验组成纤维细胞生长优于对照组。结论：口服甲硝唑可以加速烧伤创面的愈合。

　　【关键词】 甲硝唑 深Ⅱ度烧伤 创面愈合

　　The effect of metronidazole on wound healing of seconddegree burned rats

　　ZHANG Yingtao1，CEN Ying2

　　(1.The People′s Hospital of Shanxi，Taiyuan 030012，China;2.West China Hospital of Sichuan University，Chengdu 610041，China)

　　Abstract：Objective：To study the therapeutic effect of metronidazole on wound healing in partial thickness burn rats.Methods：Partial thickness burns with 20% of total body surface were made in 20 rats，which were randomly divided into 2 groups.The experimental group was treated with oralling metronidazole 180 mg/kg，and the control group was treated with the same dose of 1% carboxymethyl cellulose sodium solution，once a day until complete healing of the burned wound.The healing time were compared，the growth of granulation tissue and collagen fibers were evaluated under light microscope，and the growth of fibroblast were observed under transmission electron microscope.Results：All rats survived until wound healings were completed.The healing time of experimental group were shorter than that of control group(P<0.05).Light microscope observation showed that the growth of granulation tissue and collagen fibers of experimental group were much better than that of control group.Transmission electron microscope showed that the fiberblast growth was obviously better in the experimental group.Conclusion：The oral administration of metronidazole can promote wound healing of partial thickness burn.

　　Key words：metronidazole;burn;wound healing

　　创面愈合是一个非常复杂的过程，包括炎症发生、细胞游走、血管生成、临时基质合成、胶原沉着以及再上皮化等诸多过程[1]。影响创面愈合的因素很多，而烧伤后创面局部缺血缺氧，造成氧自由基的产生，继之机体发生脂质过氧化反应，导致创面愈合障碍[2]。应用抗氧化剂可以加速创面的愈合过程。创面愈合的增快可以表现为新生血管以及纤维母细胞的数量增加、胶原的形成和创面再上皮化的情况良好[3，4]等等。许多文献证实甲硝唑具有清除氧自由基的能力。本研究采用随机对照实验，探讨甲硝唑对创面愈合的影响。

　　1 资料与方法

　　1.1 实验动物及材料 20只SD大鼠，雌雄各半，体重180 g～230 g，随机分为实验组及对照组，每组10只，由四川大学华西医学中心实验动物中心提供，FGF一抗、二抗及三抗，北京中山生物技术有限公司生产，甲硝唑片剂由湖北华中药业公司生产，每片0.2 g。

　　1.2 动物模型的建立 大鼠80℃恒温水浴烫其背部10 s，造成20%面积深Ⅱ度烧伤创面，并经组织学证实。两组均于烧伤后1 h腹腔注射生理盐水30 mL/kg以抗休克。烫伤后第2日起，实验组甲硝唑每日180 mg/kg(溶于1%羧甲基纤维素钠溶液中，制成10%甲硝唑羧甲基纤维素钠溶液)灌胃，对照组同等剂量1%羧甲基纤维素钠溶液灌胃，每日1次。

　　1.3 观察指标

　　1.3.1 大体观察 计算创面愈合天数(愈合标准为95%烫伤创面愈合)。

　　1.3.2 光镜观察 伤后7 d及14 d分别取创面组织块，4%多聚甲醛固定，逐级乙醇脱水，石蜡包埋、切片，采用HE染色，每例切片随机观察5个高倍视野(400倍)，观察每高倍视野下成纤维细胞数、纤维细胞数、毛细血管数量以及胶原纤维分泌的情况。

　　1.3.3 电镜观察 伤后14 d的部分创面组织块，立即用3%戊二醛固定后，送透射电镜室电镜下观察成纤维细胞超微结构的情况。

　　1.4 统计学处理 实验所得数据采用t检验进行统计学分析。

　　2 结 果

　　2.1 愈合天数 所有纳入动物均成活至创面愈合，愈合天数实验组为(20.2±1.75) d，对照组为(22.2±2.30) d。实验组愈合天数与对照组相比，差异具有显著性(P<0.05)。

　　2.2 光镜观察 伤后7 d实验组组织中的纤维母细胞、纤维细胞和毛细血管数量较对照组显著增多;实验组可见少许胶原纤维存在，对照组未见胶原纤维出现;创面均未见明显表皮细胞覆盖。伤后14 d实验组动物肉芽组织中成纤维细胞、毛细血管数量仍多，并出现多量红色胶原纤维，纤维细胞数量明显增多;对照组成纤维细胞、毛细血管数量较7 d时有明显增多，但少于实验组，红色胶原纤维及纤维细胞数明显少于实验组。两组表皮细胞都覆盖创面，实验组可见创面完全被表皮覆盖，表皮细胞呈1层～3层排列，尚未形成完善的复层鳞状上皮，表皮外尚可见红染的角化层，而对照组仅见表皮覆盖部分创面，未见复层上皮及角化层。

　　2.3 电镜观察 伤后14 d实验组成纤维细胞胞体较大，核大，核仁明显，胞浆中有丰富的粗面内质网。胶原纤维量多，密集，排列整齐。对照组成纤维细胞胞体较小，细胞器少见并有少许肿胀，胶原纤维较稀疏，排列较杂乱。

　　3 讨 论

　　重度烧伤后，早期由于缺血再灌流损伤，组织发生过氧化反应，产生大量的氧自由基，导致脂质过氧化反应的发生[5]，脂质过氧化对烧伤局部及全身组织器官均可造成损伤。在烧伤创面局部，氧自由基可以通过破坏角化的上皮细胞和管腔的渗透性以及胶原的代谢导致创面愈合的障碍，同时，毛细血管的渗透性增加导致创面的肿胀程度加重，也造成创面愈合的障碍[2，6]。而应用抗氧化剂可以促进创面愈合、减轻创面组织的水肿[7]。Shchepetkin[8]已经证实甲硝唑具有清除活性氧自由基的能力，Mallikar等[9]通过检测重度烧伤后血浆中MDA浓度进行了甲硝唑、VITC和VITE三者抗脂质过氧化能力的比较，结论是三者均具有强的抗脂质过氧化能力，以VITC降低MDA水平的能力为最显著，甲硝唑和VITE次之，二者抗脂质过氧化的能力相似。Musalmah等[7]已经证实口服VITE可以加快大鼠背部切口的愈合速率。而在本实验中实验组创面的血管、纤维母细胞、成纤维细胞、胶原纤维的数量均显著比对照组增多，愈合情况好于对照组，说明甲硝唑在促进烧伤创面的愈合中有一定的作用。这可能与它的抗脂质过氧化作用有关。烧伤后发生的脂质过氧化本身就对上皮组织造成损伤，甲硝唑抑制脂质过氧化可以减少上皮的损伤，进而促进了上皮的修复和形成。

　　严重烧伤后，肠黏膜发生应激性损伤，各种细菌及内毒素侵入，造成肠源性感染，而肠道是厌氧菌重要的栖息部位。本实验中，应用甲硝唑后，可以有效地控制创面厌氧菌感染及肠源性感染，有利于创面愈合，同时，甲硝唑可以抑制毒性氧自由基引起的脂质过氧化，减轻肠黏膜的损伤，使细菌侵入的几率降低，亦有利于创面的愈合。

　　甲硝唑促进创面愈合的机制非常复杂，目前尚不十分清楚，仍有待进一步的研究。

　　【参考文献】

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　　[3] Galeano M，Torre V，Deodato B.Raxofelast，a hydrophilic vitamin Elike antioxidant，stimulates wound healing in genetically diabetic mice[J].Surgery，2001，129(4)：467～477.

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　　[7] Musalmah M，Fairuz AH，Gapor MT.Effect of vitamin E on plasma malondialdehyde，antioxidant enzyme levels and the rates of wound closures during wound healing in normal and diabetic rats[J].Asia Pac J Clin Nutr，2002，11(Suppl 7)：S448～S451.

　　[8] Shchepetkin IA.Metronidazole effect on active oxygen production by human blood neutrophils[J].Antibiot Khimioter，1997，42(8)：38～41.

　　[9] Mallikar J，Rao C.Ghosh A：Does metronidazole reduce lipid peroxidation in burn injuries to promote healing?[J].Burns，2002，28(5)：427～429.