30例血性前列腺液L型细菌溶血培养法结果分析
发表时间：2012-05-03 浏览次数：614次
作者：伊惠霞,杨志伟,杨利 作者单位：新疆医科大学第一附属医院，新疆 乌鲁木齐 840000
【摘要】Domingue[1]报道在进行L型细菌培养时发现，L型细菌可以在细胞内寄生。将红细胞(RBC)裂解稀释后培养L型细菌可以提高L型细菌的检出率。故本研究采取的标本为新疆地区维吾尔族16岁～48岁重症前列腺炎血性前列腺液，以了解细菌L型的阳性率及细菌L型感染的关系。
【关键词】 L型细菌,红细胞,血性前列腺液
Abstract： Domingue[1]reported type L bacteria could parasite in the cell when he was culturing it. Culturing type L bacteria after decomposing and diluting red blood cell(RBC) could raise its checking rate. The sample is from bloodied liquid of prostate. The people have serious postatitis who are from Viggar in XinJiang at the age of 16 to 48 years old. The objective of research is to know the relation between the positive rate of type L bacteria and its influence.
Key words：Type L bacteria;Red blood cell(RBC);Bloodied liquid of Prostate
1 对象与方法
1.1 对象
门诊泌尿科、男性科16岁～18岁维吾尔族30例重症前列腺炎血性前列腺液。
1.2 培养基
L型细菌固体培养基用改良的kagan法制备，L型细菌液体培养基(高盐培养基)。
1.3 培养方法
1.3.1 溶血稀释培养
无菌条件下选取外观为血性前列腺液分别作溶血培养L型细菌，常规检查，推片瑞特染色。将血性前列腺液2滴加入0.25%无菌低渗盐水2 ml的试管内，混匀后经0.22 μm滤膜过滤稀释后，取稀释液0.1 ml接种于高渗液体培养基，37℃烛缸培养，稀释倍数1∶100。
1.3.2 细菌L型分离培养
液体培养基24 h后在低倍镜下观察生长情况，2 d～3 d后取0.1 ml试管培养液种入L型平板。37℃平板烛缸培养，逐日观察[2]。
1.3.3 细菌L型鉴定
L型平板上“油煎蛋样”(L型)或“颗粒型”(G型)菌落，将此菌落取下涂片自然干燥后作细胞壁染色。
1.3.4 RBC形态观察
将前列腺液推片瑞特染色显微镜下观察RBC的形态。
1.3.5 返祖菌鉴定
按文献[3]将L型或G型菌落传代培养及返祖实验后生长的菌落视为返祖菌。
2 结果
2.1 溶血培养细菌L型
30份标本溶血滤过稀释后高渗培养24 h，有细菌生长者培养基混浊，无细菌型生长者培养基清亮透明，48 h后9份标本液体呈颗粒状生长，粘附于管壁或管底，液体混浊6份，微混2份，清澄1份。试管直接在低倍镜下观察见管壁颗粒呈L型或G型菌落，取颗粒直接涂片革兰染色，可见有颗粒、棒状、细丝状。4份呈沉淀微混生长，取沉淀物涂片，其余都清亮，涂片细菌L型阴性，细胞壁染色缺壁浓染。
2.2 溶血培养细菌L型检出结果
30份重症前列腺血性标本溶血滤过稀释后接种高渗液体和L型平板培养，13份标本L型细菌呈阳性。包括金黄色葡萄球菌6株，表皮葡萄球菌2株，变形杆菌2株，肠球菌1株，产肠杆菌2株。
2.3 RBC形态
30份标本中16份RBC出现皱折呈陈旧RBC形态，14份RBC形态未见异常。
2.4 常规镜检
30份标本中89%患者卵磷脂减少，93%患者RBC满视野。
3 讨论
Domingue[1]在研究肾病患者血液中分离细菌L型时，提出一种新的检查方法，将含有RBC标本溶血过滤稀释后培养L型细菌可提高检出细菌L型的阳性率。该组将30份重症前列腺炎血性前列腺液标本经过溶血、裂解、过滤、稀释后分离出13株细菌L型，检出率为43.3%。国内外学者已报道，细菌L型具有粘附在RBC上和侵入红细胞内的特点[2]。文献报道慢性前列腺炎的前列腺液，普通法培养细菌L型检出率为37.8%，因此进一步证实该论点。
一般认为急慢性前列腺感染，主要病源菌为大肠杆菌，其次为葡萄球菌，而从本组检出的L型细菌种类可见葡萄球菌为首位，其次为大肠杆菌，与文献[4]结论一致。
该组30份重症前列腺炎患者均为新疆维吾尔族，年龄16岁～48岁，其中1例16岁患者细菌L型呈阳性，由此说明前列腺患者年龄段在扩大。特别是新疆地区，由于医院缺少医药，医疗水平差，易误诊、漏诊，且反复用青霉素、氨苄西林、庆大霉素、头孢菌素等，但均未坚持治疗，致使反复发作，造成急慢性前列腺炎迁延到重症前列腺炎。因此说明，血性前列腺液在作细菌培养的同时，用溶血稀释法作L型细菌培养可提高阳性率，以进一步明确诊断。
细菌变成L型后，尽管其抗原性可能发生改变或减弱，但机体的免疫系统并不能将其清除。因此L型细菌能在体内长期生存并引起慢性疾病急性发作，有可能是L型细菌隐蔽于机体免疫功能或抗生素所达不到的部位或机体本身功能不健全而引起的。
【参考文献】
[1]Domingue GJ.Call walldeficient bacteria[M].Addisonwesley,Massachusetts,1982：121.
[2]邓维秀.血沉增快与细胞L型的关系探讨—溶血培养细菌L型[J].上海医学检验杂志，2000，15(6)：369.
[3]李仲兴，郑家齐，李家宝.临床细菌学[M].北京：人民出版社，1996：68，75，96，182.
[4]张春兰.慢性前列腺炎与细胞L型感染[J].贵州医药，1995，19(11)：301
