组织因子在肾癌中的表达及其临床意义

　　作者：魏汉平,徐仁方　王坚,谈炎　　作者单位：1.苏州大学附属第三医院泌尿外科，江苏 常州 2.苏州大学附属第三医院病理科

　　【摘要】 目的研究组织因子(TF)在肾癌中的表达并探讨其临床意义。方法 运用免疫组织化学MaxVisionTM法分别检测30例肾癌组织及15例癌旁正常组织中TF的表达情况。结果 TF在肾癌组织中的表达率90.0%(27/30)显著高于在癌旁正常组织中的表达率13.3%(2/15)，且差异有显著性意义。结论 TF与肾癌的发生、发展可能具有密切关系，它可能在肾癌的治疗方面具有一定意义。

　　【关键词】 组织因子;肾癌;免疫组化;表达

　　Expression of Tissue Factor in Renal Cell Carcinoma and Its Clicinal Significance Wei Hanping，Xu Renfang，Wang Jian，et al

　　(Department of Urology,the Third Affiliated Hospital of Suzhou University,Changzhou Jiangsu 213003，China)

　　ABSTRACT: Objective To study the expression of tissue factor(TF)in renal cell carcinoma and investigate its clinical significance. Methods The expression of TF in 30 cases of renal cell carcinoma and 15 cases of normal kidney tissue was detected by MaxVisionTM immunhistochemistry method. Results The expression rate of TF in renal cell carcinoma (90.0%,27/30)was significantly higher than that in normal kidney tissue(13.3%,2/15),there was significant difference between the two groups.Conclusion Maybe there is a close relationship between TF and renal cell carcinoma .TF may be significant in the treatment of renal cell carcinoma.

　　KEY WORDS: Tissue factor;Renal cell carcinoma;Immunhistochemstry;Expression 组织因子(tissue factor,TF)又称凝血因子Ⅲ，是一种相对分子质量约为47000的单链跨膜糖蛋白受体，由263个氨基酸残基构成，可分为胞外区、跨膜区、胞内区3个结构域。TF是体内外引起血液凝固强有力的启动因子，在止血、组织修复、血栓形成等一系列生理、病理过程中发挥重要作用[1]。近年来有研究发现多种肿瘤如结直肠癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、食道癌、子宫颈癌、卵巢癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌、神经胶质瘤等恶性肿瘤细胞及肿瘤新生血管内皮细胞中常异常高表达，参与肿瘤血管的生成，促进肿瘤的生长、浸润和转移[2～6]。但TF在正常血管内皮细胞表面却不表达[7]。TF在肿瘤细胞中高表达的这种特性使之成为最具吸引力的肿瘤治疗的靶蛋白，成为人们研究的热点。肾癌是泌尿系统恶性肿瘤中发病率较高的肿瘤之一，目前对肾癌的发生发展机制尚未明确，国内也未见到有关组织因子与肾癌关系的报道。为此我们设计了此实验，以了解TF在肾癌组织中的表达情况并探讨其临床意义。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料

　　30例肾癌组织来自苏州大学附属第三医院泌尿外科2007年2月至2008年3月做肾癌根治术的30名患者。其中男16例，女14例，年龄32～73岁，平均61岁，术后病理均证实为肾透明细胞癌。 15例肾癌旁正常组织(病理证实无癌残留)取自苏州大学附属第三医院泌尿外科2007年3月至2007年12月15名做肾癌根治术患者的远离癌(>4cm)的肾组织。其中男9例，女6例，年龄46～68岁，平均56岁。所有标本均经10%甲醛固定，常规石蜡包埋切片。

　　1.2 主要试剂

　　兔抗人TF多克隆抗体一抗购自武汉博士德生物工程有限公司;快捷型酶标羊抗鼠/兔IgG聚合物二抗、DAB溶液、PBS溶液、3%过氧化氢溶液、二甲苯均由苏州大学附属第三医院病理科提供。

　　1.3 实验方法

　　运用免疫组织化学MaxVisionTM法。30例肾癌组织和15张癌旁正常组织切片共45张，每张切片厚约3μm。常规二甲苯脱蜡、梯度乙醇水化，自来水冲洗5min;100℃高温下组织抗原修复30min，PBS液冲洗3min×3，甩去PBS液;每张切片滴加兔抗人TF多克隆抗体50μl,4℃过夜;PBS液冲洗3min×3，甩去PBS液;每张切片滴加快捷型酶标羊抗鼠/兔IgG聚合物50μl，室温下孵育15min;PBS液冲洗3min×3，甩去PBS液;每张切片滴加新鲜配制的DAB溶液100μl，显微镜下观察3min;用自来水冲洗，苏木素复染，自来水冲洗返蓝，经梯度酒精干燥脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

　　每例观察10个高倍镜视野，TF蛋白棕黄色定位于细胞膜，血管内皮细胞表面也有表达。阳性细胞<10%为阴性，>10%为阳性。

　　2 结 果

　　30例肾癌组织中27例TF表达阳性(90.0%)，15例对照组织中2例TF表达阳性(13.3%)。TF在肾癌细胞中的表达率显著高于其所对应的癌旁正常组织(P<0.01)。

　　3 讨 论

　　TF是血液中凝血因子Ⅶ的膜受体，一直被认为是外源性凝血途径的启动因子，可修复血管壁缺损，达到止血目的。随着对TF的深入研究，发现TF与恶性肿瘤有密切关系[8]。在恶性肿瘤组织中，TF常在细胞膜和新生血管内皮细胞表面高表达，促进肿瘤的发生发展，在正常血管内皮细胞表面却不表达。由于肿瘤血管结构的不完整，肿瘤细胞表面高表达的TF容易与血液中FⅦ结合从而引发临床肿瘤患者各种与凝血异常相关的疾病[9]。现在的大部分研究都认为TF的高表达是肿瘤恶化、转移的早期事件之一且与肿瘤患者的预后密切相关[10]。人们利用TF的这种分布特征，设计了一些以TF为靶点的抗癌药物，且已经处于动物试验阶段和临床试用阶段[11]。

　　在本次实验中我们发现TF在肾癌组织中高表达而在正常组织中低表达，且TF在两者中表达的差异具有统计学意义。那么TF对肾癌的作用可能与其在其它大部分肿瘤中的作用相同，即对肾癌的发生发展起到促进作用。通过以TF为靶点所研究出来的抗癌药物可能具有广谱的抗癌作用，能够应用于肾癌的治疗。然而Yvonne Forster 等通过运用ELISA和PCR法对75例肾癌组织中TF的表达情况进行研究发现大多数非恶性肾脏组织TF水平比肾癌组织相对较高[12]。那么TF在肾癌组织中的表达与正常组织相比究竟有没有区别及有何种区别,有待通过加大样本量或联合其它方法进一步加以验证。

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