尖锐湿疣病人阴毛毛囊和皮损处HPV亚型分布

　　作者：王友宝，赵纯雄，韩韬 作者单位：(青岛市海慈医院泌尿外科，山东 青岛 266033)

　　【摘要】 目的 研究尖锐湿疣(CA)病人阴毛毛囊和皮损处人乳头状瘤病毒(HPV)阳性率及亚型分布，了解HPV亚型与临床发病的关系。方法 采用PCR方法对尖锐湿疣病人皮损和阴毛毛囊中的HPV进行亚型检测。结果 尖锐湿疣病人皮损处HPV阳性率为96.15%(100/104)，其中75例为HPV6亚型，32例为HPV11亚型，两者混合感染11例，4例为其他亚型。尖锐湿疣病人阴毛毛囊中HPV阳性率为32.56%，其中19例为HPV6亚型，9例为HPV11亚型，两者混合感染2例，2例为其他亚型。尖锐湿疣病人皮损组织中HPV阳性率明显高于阴毛毛囊HPV阳性率(χ2=82.15,P<0.01)。尖锐湿疣病人阴毛毛囊中的HPV亚型分布与皮损中HPV亚型分布一致，两者无显著性差异(P>0.05)。结论 引起男性尖锐湿疣的HPV亚型以HPV6、11亚型为主。

　　【关键词】 尖锐湿疣;乳头状瘤病毒,人;皮损

　　A DISTRIBUTION OF SUBTYPE OF HUMAN PAPILLOMAVIRUS IN PUBIC HAIRS AND SKIN LESION OF PATIENT WITH CONDYLOMA ACUMINATA WANG YOUBAO, ZHAO CHUNXIONG, HAN TAO (Department of Urology, The Affiliated Hiser Hospital of Qingdao University Medical College, Qingdao 266033, China); [ABSTRACT] Objective To investigate the distribution of human papillomavirus (HPV) subtypes in patients with condyloma acuminata (CA) its relation with clinical morbidity. Methods Specimens from folliculus pili of pubic hairs and skin lesions of patients with CA were detected and checked for HPV subtypes. Results The positive HPV in impaired skin was 96.15%(100/104), in which, 75 was classified as subtype HPV6, and 32 as HPV11, combined infection of the above two subtypes was 11 cases, and four cases were other subtypes. The specimens taken from folliculus pili showed that HPV was positive in 32.56%, in which, 19 were subtype HPV6, nine were HPV11, combined infection of HPV6 and HPV11 found in two, and the other two cases were other subtypes. The positive rate of HPV in damaged skin was remarkably higher than that of the folliculus pili (χ2=82.15,P<0.01). Differences of the distribution of the subtypes between the two groups were not significant (P>0.05). ConclusionThe main cause of HPV subtype that responsible for CA in men is HPV6 and HPV 11.

　　[KEY WORDS] condylomata acuminata; papillomavirus, human; skin lesion

　　尖锐湿疣主要是由人乳头瘤病毒(HPV)引起的性传播性疾病。目前已知HPV有100个亚型,与尖锐湿疣发病相关的主要为HPV6、11、16、18等10多个型别[1]。尖锐湿疣传染性强、治疗效果差、复发率高。在随后的病变发展中还可能引起组织癌变,严重影响病人的生活和身心健康[2]。本研究旨在分析尖锐湿疣病人寄生部位HPV亚型分布，为研究和防治该病提供依据。

　　1 材料与方法

　　1.1 标本采集

　　标本均取自来我院就诊的尖锐湿疣男性病人，其中尖锐湿疣病人皮损标本(尖锐湿疣疣体组织)104例，耻骨部阴毛标本86例(每例4～5根)。标本取材后立即送-70 ℃冰箱保存备用。

　　1.2 仪器和试剂

　　GeneAmp PCR System 9700(美国)扩增仪、ABgene电泳仪与所有引物均购自北京华大基因研究中心，PCR试剂2×Taq Platinum PCR Master Mix购自青岛市天根公司代理处。所用引物的序列如下[3]：MY09上游引物:CGTCCMARRGGAWACTGACT MY11，下游引物:GCMCAGGGWCATAAYAATGG;HPV6上游引物:GCATTGCCTGACTCGTCTCT，HPV6下游引物：CATGTTGGTACTGCGTGTGG;HPV11上游引物:GTATCCAAGGYYGYYGCCA，HPV11下游引物:ACAGGTCATCAGGCACAGTT。

　　1.3 DNA提取

　　将阴毛和皮损标本放入EP管中，生理盐水冲洗2次，使用TIANGEN组织基因组DNA提取试剂盒(离心柱型)，按照说明提取标本中的DNA。提取的DNA放入-20 ℃冰箱保存备用。

　　1.4 PCR扩增

　　反应体系为25 μL,严格按照试剂说明书的步骤对提取的DNA进行PCR扩增。

　　1.5 统计学处理

　　实验结果采用PPMS 1.5[4]统计软件进行处理，计量资料的比较采用t检验，计数资料的比较采用χ2检验。

　　2 结 果

　　从尖锐湿疣病人的皮损处和阴毛毛囊标本中提取的DNA,经过特异性引物成功PCR扩增后，经电泳得到了目的条带(图1)。尖锐湿疣病人皮损处HPV阳性率为96.15%(100/104)，其中75例为HPV6亚型，32例为HPV11亚型，两者混合感染11例，4例为其他亚型。尖锐湿疣病人的阴毛毛囊中HPV阳性率为32.56%，其中19例为HPV6亚型，9例为HPV11亚型，两者混合感染2例，2例为其他亚型。尖锐湿疣病人皮损组织中HPV阳性率明显高于阴毛毛囊HPV阳性率(χ2=82.15,P<0.01)。尖锐湿疣病人阴毛毛囊中的HPV亚型分布与皮损中HPV亚型分布一致，两者无显著性差异(P>0.05)。

　　3 讨 论

　　HPV感染后，男性主要表现为生殖器上皮疣状改变，在随后的病变过程中，可能发展成肛门生殖器周围皮肤癌变[4]。本研究通过PCR等技术手段，在大部分病人的皮损部位成功检测到HPV病毒的存在。本文结果显示，尖锐湿疣皮损处HPV阳性率为96.2%,阴毛毛囊中HPV阳性率率为32.56%，皮损组织HPV阳性率明显高于毛囊中的阳性率。两组中HPV的亚型分布是以HPV6、11为主，且HPV亚型分布无显著性差异(P>0.05)。尖锐湿疣经过治疗后，由于HPV在阴毛毛囊中可以较长时间存活，虽然皮损可以在相对短时间内痊愈，但是在机体免疫力下降、病毒被再次激活等情况下，尖锐湿疣容易复发，这是尖锐湿疣治疗中比较棘手的问题。在尖锐湿疣病人成功治疗皮损后，仍然可以在阴毛毛囊中检测到HPV的存在。阴毛毛囊中存在的HPV是尖锐湿疣复发的根源。本结果提示，尖锐湿疣病人在治疗过程中可以适时运用PCR等手段检测其阴毛毛囊中的HPV存在情况，有利于了解和预测病人疾病的疗效和转归。

　　【参考文献】

　　[1]张丽芳,包其郁,郑飞云,等. 温州地区尖锐湿疣组织人乳头瘤病毒检测及型别分析[J]. 中国皮肤性病学杂志, 1998,12(2):71.

　　[2]金杰,黄晓波,黄毅. 牛津临床泌尿生殖与艾滋病手册[M]. 北京：人民卫生出版社, 2006:6768.

　　[3]吴晓静,任建功,刘永江,等. 尖锐湿疣样本中HPV病毒的分子检测[J]. 遗传, 2005,27(5)：699704.