维拉帕米对ESWL所致肾损伤保护作用的实验研究
发表时间：2010-06-04 浏览次数：511次
作者：姜华茂，郭敏，张春阳，李晨光，张大田 作者单位：(辽宁医学院附属第一医院泌尿外科，辽宁 锦州121001)
【摘要】 目的 建立家兔体外冲击波致伤模型，探讨维拉帕米对ESWL所致肾损伤的作用。方法 家兔24只，随机分为对照组和维拉帕米组，每组12 只，以体外冲击波(12KV·2000次)致伤，致伤前15 min分别静脉注射生理盐水和人参总皂甙，术后24 h测定肾脏出血组织体密度和被膜下出血面积及尿γ-GT/Cr、IgG/Cr的水平，并进行病理观察。结果 维拉帕米组尿γ-GT、IgG的水平低于对照组，与对照组比较维拉帕米组肾脏出血组织体密度和被膜下出血面积明显减小。病理观察示2组肾脏皆出现不同程度损伤。结论 维拉帕米可减轻ESWL所致家兔肾损伤。
【关键词】 维拉帕米;体外冲击波碎石术;肾损伤
Experimental Study on Protective Effect of Verapamil on ESWL Induced Renal DamageJIANG Huamao, GUO Min, ZHANG Chunyang, LI Chenguang, ZHANG Datian
(Department of Urology, the First Affiliated Hospital of Liaoning Medical University, Jinzhou 121001 China)Abstract: Objective to study the effect of verapamil on renal damage induced by extracorporeal shock wave lithotripsy (ESWL) in renal injury models of rabbits. Methods 24 rabbits were randomly divided into the verapamil group and the control group, 12 in each group, and they were treated with intravenous injection of verapamil and saline respectively,15 minutes later, they were given the extracorporeal shock wave lithotripsy. The urinary γ-GT/Cr, IgG/Cr and the volume of renal hemorrhagic tissue and hemorrhagic area under renal fascia were measured 24 hours after ESWL. Results In the verapamil group, there was a significant decrease in the urinary γ-GT/Cr, IgG /Cr volume density of renal hemorrhagic tissue and hemorrhagic area under renal fascia compared with the control group after ESWL. We observed renal injury in different degree in rabbits 24 hours after ESWL. Conclusions Verapamil has protective effects on renal injury induced by shock wave in rabbits.
Key words: verapamil; extracorporeal shock wave lithotripsy; renal injury
体外冲击波碎石术(Extracorporeal shock wave lithotripsy,ESWL)现已成为上尿路结石患者的首选治疗方案, 随着ESWL的广泛应用，冲击波对肾脏的损伤引起了人们的重视[1]。冲击波所致肾损伤与物理损伤、缺血再灌注损伤和氧自由基损伤等有关。钙拮抗剂具有抗自由基脂质过氧化损伤，保护细胞膜功能等作用。本研究制作了ESWL致肾损伤的家兔模型，通过测定肾脏出血组织体密度和被膜下出血表面积及尿γ-GT/Cr、IgG/Cr的水平，探讨维拉帕米对ESWL所致肾损伤的保护作用。
1 材料和方法
1.1 主要试剂和仪器
肌苷试剂盒(上海长征-康仁医学科学有限公司);γ-GT试剂盒(上海科华-东菱诊断用品有限公司); IgG试剂盒(上海长征医学科学有限公司)。WD-91型B超定位水囊式体外冲击波碎石机(广东威达公司);7170A型全自动生化分析仪(日立公司)。
1.2 实验动物和分组
选用雄性日本大耳白家兔24 只(辽宁医学院实验动物中心提供)，月龄3～4月，体重(2.0±0.2)kg,随机分为维拉帕米组和对照组，每组12 只。实验前1 天，使用8%硫化钠脱去家兔背腹侧体毛。
1.3 冲击波致伤实验
以3%戊巴比妥钠1.0 mL/kg麻醉后，B超介导定位F2定位于左肾肾盂，频率70 次/分，工作电压12 KV，冲击次数2 000 次。维拉帕米组和对照组分别于致伤前15 min以10 mL/kg静脉注射维拉帕米注射液(0.8 mg/kg)和生理盐水。
1.4 光镜标本制作与观察
术后24 小时，麻醉后取家兔左肾，灌流固定24 小时。将肾脏横行切成许多薄片，刀片间距2.48 mm。按卡瓦列里原理测量肾脏出血面积。选择肉眼有出血的薄片，上极向上定向石蜡包埋，连续切片，HE染色，在40 倍光镜下，点记数法，计算出血体积。
1.5 尿γ-GT、IgG和Cr的测定
致伤后24 h取尿液，全自动生化分析仪测γ-GT、IgG及Cr值。
1.6 统计学分析
对2 组致伤后出血区体积、被膜下出血表面积、尿γ-GT/Cr和IgG/Cr值分别进行t检验。以上统计学分析均使用SPSS11.5软件完成。
2 结 果
2.1 肾脏的病理改变
两组冲击波处理的肾脏都有不同程度的肿胀，可见大小不同，或点状，或成片的被膜下出血。在肾脏切面上可见到大小不一的出血区。光镜下，两组肾脏皆出现不同程度的损伤，损伤区域内可见大量红细胞，其间有一定量中性粒细胞浸润，可见破裂的肾小体，近、远端小管等。
2.2 出血区体积、出血面积、尿γ-GT / Cr和IgG/Cr测量结果及统计学处理 见表1，表中γ-GT/Cr的单位为U/mmolCr、IgG/Cr的单位为mg/mmolCr。表1 致伤后尿γ-GT/Cr和IgG/Cr的值*表示与对照组比较，P<0.01
3 讨 论
ESWL致肾损伤的主要机制为自由基损伤作用和肾血流下降。ESWL的空化效应产生自由基，损伤肾小球和肾小管，局部肾素、内皮素水平升高，使肾血流量和GFR下降，血液淤滞和微循环障碍。钙离子拮抗剂通过抑制钙内流，减少氧自由基产生和抑制内皮素生成减轻冲击波对肾脏的损伤[2，3]。本研究中，光镜下ESWL所致肾损伤为肾脏实质的出血和肾单位的破坏。维拉帕米组和对照组的病理观察未见明显区别，这可能是冲击波引起的机械损伤作用所致。本研究中，维拉帕米组的出血区体积、出血面积皆低于对照组。其原因可能是：维拉帕米能保护毛细血管内皮细胞的完整性，减少血浆渗出;同时阻止Ca2+由细胞外进入细胞内，拮抗肾素、内皮素的缩血管作用，缓解肾缺血,改善微循环，减少肾素及醛固酮的分泌。
ESWL可使肾小球滤过膜和肾近曲小管破坏、细胞损伤，导致IgG和γ-GT释放入尿中[4]。本研究中，维拉帕米组的尿γ-GT和IgG水平均低于对照组，说明维拉帕米通过其药理作用，提高肾脏对缺血缺氧的耐受力，保护肾小球滤过膜、近曲小管上皮微绒毛及细胞器的完整性，从而减轻了ESWL所致的肾小球和肾小管的损伤。
综上所述，我们认为, 维拉帕米能减轻ESWL所致的肾损伤有较一定的保护作用。另外，维拉帕米方便、价廉、较少副作用，对一些上尿路结石病人，尤其伴有高血压的病人，有一定的应用价值。
【参考文献】
[1] May M, Gunia S, Helke C, et al. An unusual complication of extracorporeal shock wave lithotripsy: rupture of the kidney with consecutive nephrectomy[J]. Aktuelle Urol, 2004,35:316-319.
[2] Porpiglia F, Destefanis P, Fiori C, et al.Role of adjunctive medical therapy with nifedipine and deflazacort after extracorporeal shock wave lithotripsy of ureteral stones[J].Urology， 2002，59(6):835-838.
[3] Li X, He D, Zhang L, et al.A novel antioxidant agent, astragalosides, prevents shock wave-induced renal oxidative injury in rabbits[J]. Urol Res， 2006, 34(4):277-282.
[4] Kirkali Z, Kirkali G, Tahiri Y. The effect of extracorporeal electromagnetic shock waves on renal proximal tubular function[J]. Int Urol Nephrol, 1994,26:255-257.
