尿Cox-2检查在诊断浅表性膀胱移行细胞癌中的临床价值
发表时间：2009-07-02 浏览次数：636次
作者：张丽萍 庄国华 吴卫春 作者单位：311100 杭州师范大学医学院附属余杭医院 【关键词】 膀胱癌 目前临床上诊断膀胱癌主要有尿脱落细胞学检查和膀胱镜检查。尿脱落细胞学检查特异性高, 但敏感性低，而膀胱镜是有创检查, 且不能早期诊断。因此寻找一种无创伤的早期诊断方法是目前膀胱肿瘤研究的新热点。环氧化酶(Cox)是人体内催化花生四烯酸转变为前列腺素的限速酶，它存在两种同工酶即环氧化酶-1 (Cox-1) 和环氧化酶-2 (Cox-2)，其中Cox-2为诱导酶。Cox-2与肿瘤的浸润、转移、细胞凋亡等特性有关，已开始应用于检测膀胱移行细胞癌［１］。本文对50例膀胱移行细胞癌患者同时行尿Cox-2蛋白和尿脱落细胞学检测，比较其敏感性、特异性和Youden指数，探讨尿Cox-2诊断膀胱移行细胞癌的临床价值。 1 资料与方法 1.1 对象 选择2004年6月至2007年11月本院收治的浅表性膀胱移行细胞癌患者50例，男32例，女18例，年龄42～75岁(平均57.2岁)，均经手术或膀胱镜检查病理证实。并以同期治疗的非膀胱肿瘤患者50例作为对照组，其中前列腺增生症23例，泌尿系结石12例，尿路感染5例，肾积水6例，肾癌4例。取晨起时新鲜尿液标本约150ml，分为3份：50 ml尿检测Cox-2蛋白，剩余尿行尿脱落细胞学检查。 1.2 方法 尿Cox-2蛋白检测：取50ml新鲜尿液离心，弃上清液，加入红细胞裂解液作用5 min后离心，弃上清液，细胞沉渣涂片，待细胞涂片干燥后用4%多聚甲醛溶液固定5 min，微波抗原修复，加3%H2O2作用5min后加Cox-2一抗工作液，按标准的免疫组化S-P法步骤进行实验操作，DAB显色，苏木素复染，脱水，封片，镜检。通过观察细胞涂片的中央部分，见超过20个棕黄色细胞即判为尿Cox-2蛋白表达阳性。尿脱落细胞学检查：按常规方法，以巴氏分级法Ⅰ、Ⅱ级定为阴性, Ⅲ～Ⅴ级为阳性；找到癌细胞为尿脱落细胞学检查阳性。 1.3 统计学处理 采用SPSS 11.5统计软件，用χ2 检验。
2 结果 50例膀胱移行细胞癌患者中45例(占90.0%)尿Cox-2蛋白表达阳性，5例阴性患者其病理分级为G1级或分期为Ta期；对照组50例中3例尿Cox-2蛋白表达阳性。尿Cox-2蛋白诊断膀胱移行细胞癌的敏感性为90.0%，特异性为94.0%，Youden指数84.0%。50例膀胱癌患者同时行尿脱落细胞学检查发现14例(占28.0%)阳性，而对照组均阴性。尿脱落细胞学检查诊断膀胱移行细胞癌的敏感性为28.0%，特异性为100%，Youden指数28.0%。尿Cox-2蛋白的敏感性和Youden指数均明显高于尿脱落细胞学(P<0.01)。在各个级别的膀胱移行细胞癌中尿Cox-2 的敏感性均高于脱落细胞学(P<0.05)，特别是在G1级的膀胱肿瘤中尿Cox-2蛋白的敏感性也达到77.8%。见表1。表1 肿瘤级别与各种方法诊断敏感性比较（略）
3 讨论 人的Cox -2基因长8.3 kb，位于染色体1q25.2～25.3之间，含有9个内含子和10个外显子。Cox-2为诱导酶，生理状态下多数细胞中不存在这种酶，只有在细胞受到炎症刺激、组织损伤或细胞恶性转化时表达增强。近年来的研究表明, Cox-2在膀胱肿瘤中具有较高的表达，并且同肿瘤的临床分期、病理分级以及对周围组织的浸润、复发、预后均有着密切的关系。Mohammed等［２］发现Cox-2蛋白在膀胱癌组织中高表达，而在正常膀胱标本很少表达。Komhoff等［３］发现，Cox-2表达的升高同肿瘤的病理分级呈正相关，即Cox -2表达升高越明显，病理分级越高，组织分化越差，恶性程度越高。Ristimaki等［４］的研究数据表明, Cox-2在非浸润性膀胱癌中有较高的表达，在浸润性膀胱癌中有更高的表达，Cox -2在溃疡和炎性假瘤等非肿瘤情况下具有病理分级的作用。刘存东等［１］用RT-PCR方法检测31例膀胱癌患者和50例非膀胱肿瘤患者尿中Cox-2mRNA的表达情况，结果显示Cox-2mRNA诊断膀胱癌的敏感性为100%，特异性为72.1%，且尿中Cox-2mRNA的表达与肿瘤的分级呈正相关。陈振乾等［５］采用免疫组化法检测膀胱移行细胞癌患者尿Cox-2 蛋白的表达，结果发现尿Cox-2 诊断膀胱癌的敏感性为89.7 %, 特异性为93.3 % ,Youden指数83.1 %，特别是在G1级的肿瘤中敏感性也达到83.3 %。本实验结果显示，尿Cox-2蛋白在诊断膀胱移行细胞癌时的敏感性为90.0%，特异性为94.0%，Youden指数84.0%，特别是在G1级的肿瘤中敏感性也可达到77.8%，其敏感性和Youden指数均明显高于尿脱落细胞学检查(P<0.05)。本文对照组有5例尿Cox-2蛋白表达阳性，其中1例为尿路感染，2例为良性前列腺增生，另2例为肾癌，从而降低了尿Cox-2诊断膀胱癌的特异性。
从本检测结果来看，尿Cox-2蛋白是诊断和随访膀胱移行细胞癌的一种高敏感性和高特异性的指标，适合于复发率很高的膀胱癌的诊断与随访。
【参考文献】 1 刘存东，曾甫清，杜丹，等. 尿脱落细胞Cox-2 mRNA检测在膀胱癌诊断中的价值. 临床泌尿外科杂志， 2004, 19(9): 557～560.
2 Mohammed SI，Knapp DW，Bostwick DG, et al. Expression of cyclooxygenase-2 (COX-2) in human invasive transitional cell carcinoma (TCC) of the urinary bladder. Cancer Res， 1999, 59(22):5647～5650.
3 Komhoff M, Guan Y, Shappell HW, et al. Enhanced expression of cyclooxygenase-2 in high grade human transitional cell bladder carcinomas. Am J Pathol, 2000, 157: 29～35.
4 Ristimaki A, Nieminen O, Saukkonen K, et al. Expression of cyclooxygenase-2 in human transitional cell carcinoma of the urinary bladder. Am J Pathol, 2001, 158: 849～853.
5 陈振乾，陈奇. 尿Cox-2 蛋白与CK20 mRNA诊断膀胱移行细胞癌的临床价值. 临床泌尿外科杂志，2007, 22(5): 348～350.
